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小鼠脊髓損傷打擊模型精細行為的比較研究2021/11/10

目的探討脊髓損傷小鼠除運動功能障礙外，在自主運動、探索行為和自我照顧行為等家籠（homecage）內精細行為方面的異常表現。方法8周齡雌性C57BL/6小鼠10只，接受T10脊髓打擊造模。另選11只小鼠為假手術組。術后1～5周，每日固定時間將小鼠置于家籠中記錄其精細行為，使用HomeCageScan軟件分析動物32種日常行為所占時間百分比。結果與假手術組動物相比，早期脊髓損傷小鼠的探索行為、自主運動和自我照顧行為中多數行為活動均存在顯著異常（P＜0.01），部分行為在損傷后1～5周出現恢復。脊髓

哮喘模型的幾種造模方法2021/01/15

1.小鼠過敏性哮喘模型BALB/c小鼠于第0天和第14天分別腹腔注射0.1mL/只OVA液(0.2mg/mL)和DBP溶液（0.5mg/kg），第21~23天連續3天以0.5%的OVA溶液霧化激發，每天于上午下午固定時間霧化2次，每次20min。霧化過程中觀察小鼠一般行為變化，后一次霧化結束后24小時，小鼠摘眼球取血，取支氣管肺泡灌洗液(BronchialAlveolarLavage,BALF)及肺組織。2.枸櫞酸誘發豚鼠咳嗽實驗取體重200-260g豚鼠，雌雄各半，置于500mL的觀察室內，以

類風濕關節炎模型幾種方法2021/01/15

（一）佐劑誘導型（AA）AA早由Freund于20世紀50年代創立，又稱弗氏佐劑關節炎，介導溶劑分為*佐劑（CFA）和不*佐劑（IFA）。通常用CFA作介導劑，AA模型在T細胞相關致炎通路的藥物篩選上發揮著重要的作用。（二）膠原誘導型（CIA）CIA模型是由Trentham等于1977年*建立的實驗性關節炎動物模型。通過皮下注射Ⅱ型膠原和等量CFA的混合液來建造，來源于雞、小牛和大鼠的Ⅱ型膠原均能引起關節炎癥。CIA是MHC相關型，以T/B淋巴細胞介導的關節炎癥侵蝕為主要特征。（三）膠原抗體誘導

科研項目的設計方法2021/01/07

除了一些安全性評價動物實驗外，我們這里提到的大多數動物實驗都是整體科學研究計劃的一個重要組成部分，動物實驗往往是為了證明或演繹某一科研假說而采取的手段。要進行動物實驗的設計，我們有對一般科學實驗的整體設計進行簡單的論述。廣義來講，科學研究選題是由社會發展和人們生活水平決定的(如癌癥和心血管疾病的發生就和人們所處生活環境有很大的關系)；狹義來講，科學研究的選題是由研究機構目標和能力來決定，或由研究者興趣來決定。(一)科研假說的形成科研假說(hypothesis)是科研活動的靈魂，一個立論充分的假說

Western blot內參蛋白的選用！2021/01/07

一、WesternBlot實驗為什么要用內參?WesternBlot實驗結果進行內參校正已成為一種慣例。目的蛋白表達量的相對多少，前提條件是等量的組織細胞蛋白上樣，才有比較的基礎，特別是表達量不高時，上樣量的的差別就很有可能影響結果的分析。因此，在WesternBlot試驗中，進行內參的檢測，有以下兩點作用：1、校正蛋白質定量、上樣過程中存在的誤差，實驗結果的準確性；2、使用內參可以作為空白對照，檢測蛋白轉膜情況是否、整個WesternBlot顯色發光體系是否正常。二、你的內參選對了嗎？作為內參

ELASA檢測方法一2020/12/31

ELASA：用于檢測未知抗體的間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色：于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。5.終止反應：于各反應孔中加入2M硫酸

PAS染色方法2020/12/31

一、服務介紹PAS染色法(PeriodicAcid-Schiffstain)在組織學上，主要用來檢測組織中的糖類。過碘酸把糖類相鄰兩個碳上的羥基氧化成醛基，再用Schiff試劑和醛基反應使呈現紫紅色。隨著醫學實驗技術的發展，糖原染色應用的范圍更加廣泛，如用以證明與鑒別細胞內空泡狀的性質，心肌病變及其他心血管疾病的診斷，糖原累積病診斷和研究，糖尿病的診斷和研究，用于某些腫瘤的診斷等。二、實驗原理PAS染色又稱過碘酸雪夫染色，糖原染色。PAS染色一般用來顯示糖元和其它多糖物質。過碘酸能使細胞內的多糖

MTT和CCK8區別2020/12/24

MTT增殖曲線，基本上就是基礎的功能實驗了，養過細胞的你應該都會做。但是，要怎么樣才能省時省力呢？你也知道，如果用MTT的話，加入10ul的MTT后要等四個小時，在活細胞的線粒體中形成甲囋，然后在把培養基吸掉，再加上DMSO溶解，進行檢測。這個方法是常用的MTT方法，但是會有三個問題，*個是有的甲囋不容易溶解。還有一個問題就是，由于要讓DMSO充分溶解甲囋，所以會要混勻，就會產生泡沫，影響酶標儀讀值：第三個問題，就是在吸去培養基的時候，容易把甲囋也吸走，導致終讀值不準。當然也不是沒有辦法的，這篇

血清的保存2020/12/24

血清的保存應該注意以下幾點：（1）生物學實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%，因此，血清在凍入低溫冰箱前，預留體積空間，否則易發生污染或玻璃瓶凍裂。（2）熱滅活是指56℃，30分鐘加熱已解凍的血清。生物學實驗中加熱過程中須規則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補體成分（complement）滅活。除非，一般不建議作此熱處理，因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有:細胞毒作

行為學-水迷宮2020/09/18

1.將水迷宮加入適當的水，水溫控制在25±1℃。2.實驗前把動物帶入實驗室中熟悉環境。3.設置軟件。4.一階段：（定位航行）將小鼠頭對著墻壁依次放入四個象限水迷宮進行實驗（所有小鼠需全部做完后換下一象限）。若動物在60s內登上平臺區域，則錄像結束。若動物在60s內未登上平臺區域，則用木棍指引大鼠游上平臺，并停留30s。每只小鼠每天訓練4次，訓練天數為4天。5.每只動物實驗結束后需用干毛巾擦拭，必要時需要使用電吹風吹干。6.二階段（空間探索）：待一象限到第四象限全部做完后，將水迷宮中的平臺撤走，將

行為學-曠場實驗2020/09/18

一、曠場實驗介紹曠場實驗是利用動物對新開闊環境的恐懼而主要在周邊區域活動，在區域活動較少，但動物的探究特性又促使其產生在區域活動的動機，也可觀察由此而產生的焦慮心理。藥物可以明顯增加自主的活動而減少探究行為，劑量的抗精神病藥物可以減少探究行為而不影響自主活動。二、曠場實驗原理該實驗（openfieldtest)又稱敞箱實驗，是評價實驗動物在新異環境中自主行為、探究行為與緊張度的一種方法。以實驗動物在新奇環境之中某些行為的發生頻率和持續時間等，反應實驗動物在陌生環境中的自主行為與探究行為，以尿便次

慢性支氣管炎動物模型2020/08/26

基本原理慢性支氣管炎(chronicbronchitis)是指由感染或非感染因素引起的氣管、支氣管黏膜及其周圍組織的慢性非特異性炎性反應。慢性支氣管炎的病理特點是支氣管腺體增生、黏液分泌增多。臨床常以咳嗽、咳痰或伴有喘息反復發作，每次持續3個月以上，連續2年以上的慢性過程為特點，嚴重時可并發阻塞性肺氣腫，甚至肺源性心臟病。慢性支氣管炎以老年人居多，病程初期一般癥狀比較輕微，發病季節以冬季較為多見，至春季天氣轉暖后癥狀緩解;晚期-般表現為炎性反應較前加重，且癥狀不分季節、常年存在。目前，慢性支氣管

心肌梗死動物模型2020/08/26

造模機制通過結扎引起模型動物的冠狀動脈狹窄或閉塞，使該冠脈所供應的心肌缺血、壞死，從而引起模型動物心肌梗死。造模方法簡要的來說，-般冠狀動脈結扎術主要分為三步:首先，動物在麻醉后，在第四肋間行左胸開胸術;然后小心地將心包膜打開，在左心耳尖遠端結扎左冠狀動脈前降支(leftanteriordescending,LAD),如果結扎成功的話。心電圖(electrocardiogram,ECG測顯示典型的ST段抬高，而觀察左心室前壁也會變白;后關閉胸腔。如需制作心肌缺血再灌注損傷模型，可在結扎LAD后3

糖尿病模型2020/08/20

一、服務簡介動物:大小鼠，SPF級，健康，雄性造模方法:Streptozocin鏈脲佐菌素誘發糖尿病動物模型1，I型糖尿病模型造模前普通飼料喂養;II型糖尿病模型造模前高脂高糖飼料(含10%蔗糖，10%豬油，5%膽固醇)喂養1-2個月，誘發出胰島素抵抗2，STZ注射前禁食12小時以上，尾靜脈或者腹腔注射STZ溶液3，I型糖尿病模型STZ注射2次，--8-次，即成;II型糖尿病模型STZ注射--次后，高脂高糖詞料喂養12周二、技術流程1、制作動物模型2、根據客戶要求觀察記錄，給藥治療3、取材做后續

AD模型2020/08/20

一、服務簡介動物:大鼠，SPF級，健康，雄性造模方法:1,經腹腔注射麻醉大鼠;剃除頭頂部毛發后固定于腦立體定位以上，手術區皮膚消毒，切開皮膚，暴露顱骨。2,參照大鼠腦立體定位圖譜(國內多選用包新民的大鼠腦立體定向圖譜)，在前后囟2mm、中線外1mm處，用牙科鉆鑿開顱骨，切開硬腦殼膜,用雙刃刀置于上述部位的腦表面，降刀4.5mm,外移1mm,再降刀1mm，外移1.5mm,后上下抽動刀20次，以*切斷穹隆海馬傘。可行單側，也可行雙側穹隆海馬傘切除。術后連續應用頭孢唑啉鈉(50mg/kg體重，ip)或

誘發性高血壓動物模型2020/08/12

[造模機制]腎動脈狹窄或阻塞，腎臟血液灌注的減少,刺激腎素、血管緊張索合成和分泌增多，激活腎素-血管緊張素.醛固酮系統(renin-angiotensin-aldosteronesystem,RAAS),引起血管收縮,增加外周阻力而升高血壓。另外,醛固酮增高或者腎臟功能的降低.引起水鈉潴留,血容量增加，使血壓升高。同時引起的氧化應激、血流動力學改變以及炎癥反應,均可使多器官受到損害。主動脈縮窄法和腎裹法均引起交感神經興奮和內皮素釋放，包裹法還引起腎周炎癥，和肥胖引起的高血壓有類似機制。[造模方法

誘發性高脂血癥動物模型2020/08/12

[造模機制]長期喂飼高脂飲食，增加膽固醇和甘油三酯的攝入量，增加血漿富含膽固醇和富含甘油三酯脂蛋白，是高脂血癥模型的造模機制。還有一些特殊的高脂血癥模型，如:靜脈注射TritonWR-1339可以抑制IPL活性，形成-過性高甘油三酯血癥;橄欖油灌胃或脂肪乳靜脈注射,也能形成一過性高甘油三酯血癥。誘導糖尿病后，一般也伴有高甘油三酯血癥。[造模方法]1.高脂飲食喂飼法高脂飲食的組成和制作工藝，及喂飼方法在制備高脂血癥模型時起到了關鍵作用。目前主要有兩種飼料:合成飼料和混合飼料。因為天然物質混合飼料無

小鼠肝纖維化模型2020/08/07

乙醇與肝纖維化發生關系密切。乙醇自從胃腸道被吸收后，經機體酶系氧化生成乙I醛，并可繼續被氧化成乙酸鹽。乙醇轉變成乙醛及乙醛轉變成乙酸鹽或乙酰輔酶iA(NAD)的過程中還可產生還原性煙酰胺腺嘌呤二核甘酸(NADH)，而NAD/NADH1比例下降使肝內三羥酸循環受抑、糖異生作用減弱以及脂防酸合成增加，當其增多超過1肝臟的處理能力就形成脂肪肝，終形成肝纖維化，根據人類酒精性肝病的病因和發病!機制，采用在飼喂固體飼料的同時給大鼠胃內連續24周灌入乙醇的方法，復制了可在不.同時期觀察動物一般行為活動、血清

腦缺血模型2020/08/07

造模機制人的腦血管阻塞以大腦中動脈比較常見，在阻斷大鼠大腦中動脈后，可引起大腦半球皮層和基底核缺血性損傷，以海馬CA1研究。和人的病理改變相似。實驗方法1.大鼠大腦中動脈栓塞不同品種大鼠在阻斷大腦中動脈(middlecerebralarteryocclusion,MCAO)后腦梗死面積(體積的大小和恒定性不同，Sprague-Dawley大鼠比較常見。MCAO引起的腦梗死范圍與年齡無關，-般用250~350g體重的大鼠，雌雄均可，但以雄性為宜。目前比較標準方法是:以12%水合三氯氣vy醛麻醉(3

NIH裸小鼠感染模型2019/09/27

NIH裸小鼠感染模型(1)復制方法取4周齡NIH裸小鼠，腹腔接種100TCID10的-4次方/0.5ml病毒0.2ml，毒株為EHFVLN-84L。病毒檢查：肺上皮細胞、毛細血管內皮細胞、大腦皮質神經細胞、腎小管上皮細胞、心肌細胞和部分肝細胞胞漿內均檢測到病毒抗原。病毒分布以肺、大腦、腎為主，心和肝臟次之，且病毒抗原主要分布于相應組織細胞胞漿內。電鏡檢查：腦、肺、腎等組織中發現大量的布尼亞樣病毒顆粒和病毒包涵體。(2)模型特點模型動物的腦、心、肝、脾、肺、腎均有特異抗原，腦內抗原熒光亮。從該模型