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人肝癌細胞簡單引見2016/07/29
ELISA試劑盒人肝癌細胞的肝癌組織。該細胞表達甲胎蛋白、白蛋白、α-2-巨球蛋白、α-1-抗胰蛋白酶、轉(zhuǎn)鐵蛋白、α-1-抗凝乳蛋白酶、分離珠蛋白、銅藍蛋白、纖溶酶原、補體C4、C3激活物、纖維蛋白原、α-1酸性糖蛋白、α-2-HS-糖蛋白、β-脂蛋白、視黃醇分離蛋白;表達胰島素受體和胰島素樣生長因子IGFⅡ的受體;該細胞具有3-羥基-3-甲酰輔酶A復(fù)原酶和肝甘油三酯脂肪酶的活性。目前尚未證明該細胞中有HBV基因組。ELISA試劑盒1.人肝癌細胞協(xié)和細胞資源中心為科學(xué)研討提供實驗細胞技術(shù)效勞。所
ELISA試劑盒即免疫吸附劑2016/07/27
ELISA試劑盒今日我們就談ELISA試劑盒中陰性本底的構(gòu)成因素。酶聯(lián)固相免疫試驗中,尤其在簡介ELISA試劑盒法中,經(jīng)常會碰到陰性本底的疑問。主要是本底過高和不一樣標(biāo)本的本底值區(qū)別較大。本底或稱布景,是ELISA試劑盒中的非特異性顯色。底物未通過酶效果而呈現(xiàn)的色彩稱為空白。底物液如不妥會呈現(xiàn)一定的空白值。這個空白值只需不太高(A<0.05),可從個測定值中減除,并不影響試驗成果。這兒研討的是不含待測抗原或抗體的陰性標(biāo)本在ELISA試劑盒中呈現(xiàn)的本底。從理論上講,只有陽性標(biāo)本終究才干引出顯色反響
T細胞研討獲新進展2016/07/25
ELISA試劑盒這一過程的生理學(xué)相關(guān)經(jīng)過搬運抗原特定野生型或CCR4缺點CD4+T細胞被展現(xiàn)出來,而這些CD4+T細胞則是被來自被流感病毒傳染的小鼠的不一樣安排位點的DC所激活的。與接收了被肺DC激活的CCR4-缺點T細胞的小鼠,或接收了被并非來自肺的DC激活的野生型T細胞的小鼠對比,接收了被肺DC激活的野生型T細胞的小鼠體現(xiàn)出了體重的削減以及更迅速地鏟除它們的傳染。因而,DC調(diào)理的T細胞銘記歸巢到肺關(guān)于驅(qū)動對于氣道中的病原體的更有用的免疫呼應(yīng)是至關(guān)重要的。效應(yīng)物和回憶T細胞體現(xiàn)出了交換回它們z
ELISA試劑盒檢查辦法2016/07/22
ELISA試劑盒檢查辦法簡述:1)間接法測抗體:將特異性抗原包被在固相載體上,構(gòu)成固相抗原,參加待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗體),其間抗體與固相抗原構(gòu)成抗原-抗體復(fù)合物,再參加酶符號的抗抗體(抗人免疫球蛋白抗體,亦稱二抗),與上述抗原-抗體復(fù)合物。此刻參加底物,復(fù)合物上的酶則催化底物而顯色。雙抗體夾心法測抗原:將已知的特異性抗體包被在固相載體上,構(gòu)成固相抗體,參加待檢標(biāo)本(含相應(yīng)抗原),抗原與固相抗體成復(fù)合物,再參加特異性酶標(biāo)抗體,使之與已構(gòu)成的抗原-抗體復(fù)合物,當(dāng)參加與酶相應(yīng)的底物時,酶催化底而顯色,依
大腸桿菌與操縱子學(xué)說2016/07/20
ELISA試劑盒法國科學(xué)家莫諾(J·L·Monod,1910-1976)與雅可布(F·Jacob)宣布“蛋白質(zhì)構(gòu)成中的遺傳調(diào)節(jié)機制”一文,提出操縱子學(xué)說,開創(chuàng)了基因調(diào)控的研討。四年后的1965年,莫諾與雅可布即榮獲諾貝爾生理學(xué)與醫(yī)學(xué)獎。莫諾與雅可布開始發(fā)現(xiàn)的是大腸桿菌的乳糖操縱子。這是一個非常奇妙的主動控制系統(tǒng),這個主動控制系統(tǒng)擔(dān)任調(diào)控大腸桿菌的乳糖代謝。乳糖可作為培育大腸桿菌的動力。大腸桿菌能發(fā)生一種酶(叫做“半乳糖苷酶”),能夠催化乳糖分化為半乳糖和葡萄糖,以便作進一步的代謝使用。編碼半乳糖
細致引見細胞培育基2016/07/18
ELISA試劑盒細胞培育基是人工模仿細胞在體內(nèi)生長的營養(yǎng)環(huán)境,是供應(yīng)細胞營養(yǎng)和促進細胞生長增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。培育液或培育基的意義幾乎相同,英文都是medium。當(dāng)它是粉劑時,傾向性地稱為培育基,而將粉劑配成液體后,多稱為培育液。培育液中常常補加血清、抗生素等成分。培育基首要包含自然細胞培育基、組成細胞培育基和無血清細胞培育基等。自然細胞培育基是大家早期采用的細胞培育基,直接取自于動物布置提取液或體液,如血漿凝塊、血清、淋巴液、胚胎浸出液等。營養(yǎng)價值高,但成分雜亂,區(qū)別大、不安穩(wěn),來歷也遭到限制。水
ELISA試劑原位雜交防止污染2016/07/13
ELISA試劑盒防止污染:由于在手指皮膚及實驗室用玻璃器皿上均可能含有RNA酶,為防止其污染影響實驗結(jié)果,在整個雜交前處理過程中都需要戴消毒手套,實驗所用玻璃器皿及鑷子都應(yīng)于實驗前一日置高溫烘烤(180℃)以達到消除RNA酶的目的。雜交前及雜交時所用的溶液均需經(jīng)高壓消毒處理。雙鏈DNA探針和靶DNA的變性:雜交反應(yīng)進行時,探針和靶核酸都必須是單鏈的。如果用雙鏈DNA探針進行雜交(包括檢測RNA時),雙鏈DNA探針在雜交前必須進行變性。探針變性后要立即進行雜交反應(yīng),不然解鏈的探針又會重新復(fù)性。雜交
ELISA常用方法優(yōu)勢劣勢對比2016/07/11
一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標(biāo)記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。ELISA試劑盒優(yōu)勢:操作手續(xù)簡短,因無須使用二抗可避免交互反應(yīng)。劣勢:試驗中的一抗都得用酶標(biāo)記,但不是每種抗體都適合做標(biāo)記,費用相對提高。二、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標(biāo)記,改用酶標(biāo)記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。優(yōu)勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標(biāo)記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應(yīng)性。劣勢:交互反應(yīng)發(fā)生的機率較高。
elisa試劑盒實驗條件的選擇2016/07/08
ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到*科研工作者的認可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。ELISA檢測試劑盒適用于體外定性檢測人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測。在ELISA中,進行各項實驗條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載
ELISA原理實驗條件和技術(shù)要點2016/07/06
ELISA原理實驗條件和技術(shù)要點在應(yīng)用ELISA時,首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測抗體還是抗原?2,檢測的結(jié)果是定性還是定量?3,是否需要檢測特異抗體的類型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?(1)檢測抗原zui常用于檢測抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法。但競爭法在具體實驗中有些困難,特別是檢測微生物的抗原,因為需要標(biāo)記抗原,這對于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競爭法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)
細胞感染方法2016/07/01
(一)細胞準(zhǔn)備將狀態(tài)良好的目的細胞接種到24孔板,使細胞濃度為1×105/ml細胞,接種細胞數(shù)量因細胞的生長速度而略有不同,一般是保證第二天進行病毒感染的時候細胞匯合率介于50%至70%之間。ELISA試劑盒(二)病毒感染1.感染細胞*佳MOI的測定MOI(MultiplicityofInfection,感染復(fù)數(shù))是指每個細胞感染的病毒數(shù),通常MOI越高,病毒整合到染色體的數(shù)量以及目的蛋白的表達量越高。對于分裂活躍的細胞,比如Hela、293細胞,MOI=1~3時,80%以上的細胞均表達目的基因
流式細胞術(shù)的發(fā)展2016/06/29
ELISA試劑盒流式細胞術(shù)(FlowCytometry,簡稱FCM)是對細胞貨細胞器快讀測量的高技術(shù)。依賴測量的參數(shù),還可以用物理的方法將一個群體中的亞群分選出來,這就是流式細胞分選術(shù)。上述的“流式”,指的是在測量過程中細胞是流動的,不是靜止的,這是與在此前對細胞測量技術(shù)的zui大差異之處。流式細胞書目前在國外的一些有關(guān)實驗室、醫(yī)院已發(fā)展成常規(guī)技術(shù),在我國經(jīng)過十年的推廣也逐漸普及。經(jīng)過數(shù)十年的努力,流式細胞術(shù)從一個只能計數(shù),稍后可測粒子大小的一起,發(fā)展到今天可快速測定同一個細胞的多種化學(xué)和物理的
細胞共性的原理2016/06/27
ELISA試劑盒細胞并沒有統(tǒng)一的定義,比較普遍的提法是:細胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。已知除病毒之外的所有生物均由細胞所組成,但病毒生命活動也必須在細胞中才能體現(xiàn)。細胞體形極微,在顯微鏡下始能窺見,形狀多種多樣。主要由細胞核與細胞質(zhì)構(gòu)成,表面有細胞膜。高等植物細胞膜外有細胞壁,細胞質(zhì)中常有質(zhì)體,體內(nèi)有葉綠體和液泡,還有線粒體。動物細胞無細胞壁,細胞質(zhì)中常有中心體,而高等植物細胞中則無。細胞有運動、營養(yǎng)和繁殖等機能。一般來說,細菌等絕大部分微生物以及原生動物由一個細胞組成,即單細胞生物,高等植
抗菌肽對痤瘡具有抗菌活性2016/06/24
ELISA試劑盒抗菌肽是生物體內(nèi)經(jīng)誘導(dǎo)產(chǎn)生的一種具有生物活性的小分子多肽,分子量在2000~7000左右,由20~60個氨基酸殘基組成。這類活性多肽多數(shù)具有強堿性、熱穩(wěn)定性以及廣譜抗菌等特點。抗菌肽的來源分類可將其分為6類:昆蟲抗菌肽,哺乳動物抗菌肽,兩棲動物抗菌肽,魚類、軟體動物、甲殼類動物來源的抗菌肽,植物抗菌肽,細菌抗菌肽。抗菌肽具有不易導(dǎo)致微生物耐藥、殺菌時間快、不誘發(fā)微生物產(chǎn)生內(nèi)毒素且可以中和內(nèi)毒素因而不導(dǎo)致膿毒癥的產(chǎn)生(傳統(tǒng)抗生素可誘發(fā)膿毒癥)等優(yōu)點。所以抗菌肽作為新型抗感染候選藥物
解析凋亡細胞的吞噬降解過程2016/06/22
ELISA試劑盒研究組主要的研究方向是運用特異的正向遺傳學(xué)及反向遺傳學(xué)篩選手段尋找參與凋亡細胞清除過程的新基因,并對所鑒定的相關(guān)基因展開凋亡細胞吞噬,降解過程調(diào)節(jié)機制的研究,包括凋亡細胞信號的展示,識別,凋亡細胞的吞噬和降解。來自生命科學(xué)研究所NIBS的研究人員報道了線蟲RAB-2,RAB-7和RAB-14在凋亡細胞降解過程中的順序作用,解析了吞噬小體的形成和成熟以及凋亡細胞的降解過程。在細胞凋亡后,凋亡細胞會被臨近細胞或?qū)iT的吞噬細胞識別并吞噬降解。目前,關(guān)于已被吞噬的凋亡細胞如何被降解的分子
藥物敏感試驗方法2016/06/20
藥物敏感試驗簡稱藥敏試驗(或耐藥試驗)。旨在了解病原微生物對各種抗生素的敏感(或耐受)程度,以指導(dǎo)臨床合理選用抗生素藥物的微生物學(xué)試驗。目前濫用抗生素,致使抗藥菌增加,甚至因長期大量使用廣譜抗生素,殺傷體內(nèi)正常微生物,失去微生物的相互制約作用,從而使一些少見的或一般情況下的非致病菌大量繁殖,引起所謂“二次感染”的情況屢有發(fā)生,給治療造成人為的困難。因此,提倡使用藥敏試驗,堅持合理用藥十分重要。目前常用的藥敏試驗方法有:1.從瓊脂平板挑取形態(tài)相似的純培養(yǎng)菌落接種肉湯培養(yǎng)基,并于35度培養(yǎng)至濁度達到
厭氧菌的培養(yǎng)方法2016/06/17
ELISA試劑盒厭氧菌在有氧的情況下不能生長。要培養(yǎng)厭氧菌,必須創(chuàng)造一個無氧的環(huán)境。通常用培養(yǎng)基中加入還原劑,或用物理、化學(xué)方法去除環(huán)境中的游離氧,以降低氧化還原電勢。如皰肉培養(yǎng)基、硫基乙酸鈉培養(yǎng)基,牛心腦浸液培養(yǎng)基等。常用的厭氧培養(yǎng)方法有許多,可根據(jù)實際情況選用。1.厭氧缸法接種好標(biāo)本的平板或液體培養(yǎng)基試管,可放入?yún)捬醺變?nèi)培養(yǎng),厭氧缸是普通的干燥缸,用物理化學(xué)的方法使缸內(nèi)造成厭氧環(huán)境,從而將厭氧菌培養(yǎng)出來。2.厭氧袋(Bio-bag)即在塑料袋內(nèi)造成厭氧環(huán)境來培養(yǎng)厭氧菌。塑料袋透明而不透氣,內(nèi)
細胞因子分類及應(yīng)用敘述2016/06/15
ELISA試劑盒細胞因子(cytokine)是由機體多種細胞分泌的小分子蛋白質(zhì),通過結(jié)合細胞表面的相應(yīng)受體發(fā)揮以調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答為主的生物學(xué)作用。細胞因子具有非常廣泛的生物學(xué)活性,包括促進靶細胞的增殖和分化,增強抗感染和細胞殺傷效應(yīng),促進或抑制其它細胞因子和膜表面分子的表達,促進炎癥過程,影響細胞代謝等。細胞因子的命名細胞因子按其來源可分為:由單個核吞噬細胞產(chǎn)生的細胞因子稱為單核因子(monokine);由淋巴細胞產(chǎn)生的細胞因子稱為淋巴因子(lymphokine)等。按其作用可分為干擾素、集落刺激因
氨基酸的分離與鑒定2016/06/13
ELISA試劑盒紙層析是以濾紙作支持物,用一定的溶劑系統(tǒng)展開,使混合樣品達到分析的層析方法。其一般操作是將樣品溶解在適當(dāng)溶劑中,點樣在濾紙的一端,再選用適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng),從點樣的一端通過毛細現(xiàn)象向另一端展開,展開完畢,取出濾紙晾干或烘干,再以適當(dāng)?shù)娘@色劑或紫外燈、熒光燈下觀察其圖譜。樣品經(jīng)展開后某一物質(zhì)在紙層析譜上的位置常用比移植Rf來表示。Rf=原點至紙層析斑點中心點的距離→原點至溶劑前沿的距離紙層析可看作是溶質(zhì)(樣品)在固定相與流動相之間的連續(xù)抽提,由于溶質(zhì)在兩相之間的分配系數(shù)不同而達到分離。
細胞表觀基因原理2016/06/08
ELISA試劑盒研究方向則主要圍繞哺乳動物早期胚胎發(fā)育,研究胚胎干細胞和上胚層干細胞的自我更新能力和多能性調(diào)控的分子機理,特別是表觀遺傳學(xué)調(diào)控機理,以及相關(guān)的原始細胞發(fā)育過程中的表觀遺傳學(xué)重編程機理。相比于ChIP-on-Chip,ChIP-Seq是對目標(biāo)DNA片段進行深度測序,以較高的分辨率生成高度全面的數(shù)據(jù)的一種技術(shù)。其具有較少的人為假象(artifact),具有更大的覆蓋度和更廣的動態(tài)范圍。盡管,近期開發(fā)出一些方法可利用少至1萬或甚至只5千個細胞來完成ChIP-Seq。所有這些方法都依賴于
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