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Elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)之前我們應(yīng)該準(zhǔn)備什么呢?2021/03/11: 在一項(xiàng)完整的實(shí)驗(yàn)中，前期的準(zhǔn)備是萬(wàn)不能馬虎的。上海恒遠(yuǎn)技術(shù)員根據(jù)自身經(jīng)驗(yàn)對(duì)實(shí)驗(yàn)操作技巧做出整理：1.各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料，如微量移液器，吸頭，醫(yī)用蒸餾水等。2.上海恒遠(yuǎn)提醒您應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。3.應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品，按照1：100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中，充分混勻待用。4.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1：19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液；5.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1：4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液。6.使用之前仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，按說(shuō)明書確定所有試

如何驗(yàn)證ELISA酶標(biāo)板可靠性2021/03/10: 有操作員反應(yīng)：做了很多次ELISA實(shí)驗(yàn)，每次都能夠得到線性比較好的標(biāo)準(zhǔn)曲線，但是同樣濃度的標(biāo)準(zhǔn)品每次的OD值都不一致，猜可能是酶標(biāo)板的問(wèn)題，有什么方法可以快速驗(yàn)證酶標(biāo)板的可靠性嗎？我公司實(shí)驗(yàn)技術(shù)專員解讀【ELISA酶標(biāo)板可靠性】的驗(yàn)證原理：ELISA本身靈敏性很高，每次做出來(lái)的值不一樣很正常，特別是od值比較大的時(shí)候更是差別很大，但是只要不要偏差太大就好，一般偏差要求10%內(nèi)吧，好的數(shù)據(jù)是3%內(nèi)。首先要穩(wěn)定所有的條件，不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子，如果測(cè)定不一樣

關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)黑點(diǎn)的問(wèn)題2021/03/09: 上周，在一生物行業(yè)交流群里，看見一位實(shí)驗(yàn)新手提出疑問(wèn)：細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)黑點(diǎn)是什么情況？是不是被污染了？此問(wèn)題也是細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的常見問(wèn)題之一，我公司技術(shù)員針對(duì)此問(wèn)題解析道：一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)，首先，要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁，然后，在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)，黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染，微生物則會(huì)大量繁殖，培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁。污染包括細(xì)菌污染、支原體污染等。而如果在鏡下觀察細(xì)胞，生長(zhǎng)狀態(tài)良好，與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比，沒(méi)有任何變化，那么，黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān)：1.細(xì)胞

ELISA實(shí)驗(yàn)常見問(wèn)題解析2021/03/05: ELISA實(shí)驗(yàn)因靈敏度高，特異性強(qiáng)在生物科研上得到了廣泛的認(rèn)可，但對(duì)初學(xué)者而言，如不注意實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的各個(gè)環(huán)節(jié)，可能會(huì)對(duì)終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生比較大的影響，比如實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)白板，顯色弱靈敏度低，花板無(wú)梯度背景高等現(xiàn)象。下面對(duì)以上實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行一一解析。1.白板現(xiàn)象在完成所有實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行底物TMB溶液顯色后，酶標(biāo)板中所有孔的顏色均為無(wú)色，即無(wú)信號(hào)呈現(xiàn)。出現(xiàn)該現(xiàn)象的可能原因：試劑已過(guò)保質(zhì)期，不同批次稀釋液交叉使用。錯(cuò)加漏加檢測(cè)A，檢測(cè)B或者底物溶液TMB。洗板或者加樣過(guò)程中，酶標(biāo)記物被污染失活，稀釋液中含有酶

上海恒遠(yuǎn)為您簡(jiǎn)述繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的要點(diǎn)2021/03/05: 標(biāo)準(zhǔn)曲線法也稱為外標(biāo)法或直接比較法，是一種簡(jiǎn)便、快速的定量方法，在ELISA實(shí)驗(yàn)中比較常用的一種分析方法。一、做標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品檢測(cè)時(shí)有幾個(gè)問(wèn)題需要注意ELISA試劑盒1、樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi)，人ELISA試劑盒包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣

豬β-羥基丁酸ELISA試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明書2021/03/04: 一、參數(shù)規(guī)格【產(chǎn)品名稱】：豬β-羥基丁酸ELISA試劑盒產(chǎn)品使用說(shuō)明書【供貨期】：1-3天(現(xiàn)貨供應(yīng))【產(chǎn)品用途】：被測(cè)樣品定性定量分析【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/48T(兩種規(guī)格)【檢測(cè)方法】：酶免法/酶聯(lián)免疫法(ELISA)【保存條件】：2-8℃【產(chǎn)品性狀】：液體盒裝【產(chǎn)品價(jià)格】：(含稅含運(yùn)費(fèi)，我們?nèi)烫峁〦LISA實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)和ELISA試劑盒免費(fèi)代測(cè))【銷售優(yōu)勢(shì)】：價(jià)格行業(yè)優(yōu)勢(shì)、質(zhì)量可靠、如果出現(xiàn)客觀質(zhì)量問(wèn)題包換退【待檢樣本】：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等二、

ELISA實(shí)驗(yàn)中空白孔如何設(shè)置?2021/03/04: 今天上海恒遠(yuǎn)為大家講解ELISA實(shí)驗(yàn)技巧中的空白孔對(duì)照。ELISA試劑盒ELISA空白對(duì)照有幾種：1.空氣空白水空白：一般是用于儀器調(diào)零的,所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值。2.底物空白：一般是用于防止底物弱顯色所造成的讀數(shù)偏高，同樣所有孔數(shù)值減掉該孔數(shù)值（只加底物和終止液）3.酶空白：一般在2步法實(shí)驗(yàn)中使用，主要是看酶是否和板有非特異性結(jié)合的，一般不做這個(gè)。ELISA空白孔一般設(shè)一個(gè)，這是為了減除顯色液的OD值。而陰性和陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品設(shè)2個(gè)復(fù)孔，雖然有點(diǎn)浪費(fèi)，但為了確保實(shí)驗(yàn)的可靠性，我認(rèn)為還是很有必要的。E

關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)你不得不知的一些基本知識(shí)2021/03/02: 一.細(xì)胞培養(yǎng)的基本概念體外培養(yǎng)（invitroculture）包括所有結(jié)構(gòu)層次的培養(yǎng)，即：組織培養(yǎng)（tissueculture）、細(xì)胞培養(yǎng)（cellculture）和器官培養(yǎng)（organculture）。細(xì)胞培養(yǎng)(Cellculture)指從生物機(jī)體取出部分組織分散成單個(gè)細(xì)胞或直接從機(jī)體取出單個(gè)細(xì)胞，也可把體外培養(yǎng)細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞在體外條件下培養(yǎng)，細(xì)胞能繼續(xù)存活與增殖。二細(xì)胞培養(yǎng)目的與用途1、科學(xué)研究（1）藥物研究開發(fā)，如新藥篩選，疫苗、基因工程藥物、細(xì)胞工程藥物研究與開發(fā)、單克隆抗體制備等。

ELISA常用的幾個(gè)方法優(yōu)缺點(diǎn)你都知道嗎?2021/03/02: ELISA是一種廣泛應(yīng)用在測(cè)定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術(shù)。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)程序，通常是把蛋白、抗體、或激素等（即抗原）直接或是以捕捉抗體（captureAb）固定在固相載體上，再加入一級(jí)檢測(cè)抗體（primarydetectionAb），形成一個(gè)抗原抗體的復(fù)合物。如果該抗體已經(jīng)用酶（enzyme）標(biāo)記了，即可用來(lái)直接測(cè)定抗原的量，若無(wú)，則可利用另一個(gè)酶標(biāo)記的二級(jí)抗體來(lái)測(cè)定抗原的量。測(cè)定抗原量的方法是加入該酶的底質(zhì)（substrate），作用后產(chǎn)生出現(xiàn)的顏色深淺和樣本中的抗原

你們知道血清的血源來(lái)自于哪里嗎?2021/03/01: 血清，指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋白已被除去的血漿。其主要作用是提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、提供激素和各種生長(zhǎng)因子、提供結(jié)合蛋白、提供促接觸和伸展因子使細(xì)胞貼壁免受機(jī)械損傷、對(duì)培養(yǎng)中的細(xì)胞起到某些保護(hù)作用。市場(chǎng)上的血清血源主要分為中國(guó)、北美、南美和澳洲。1、國(guó)產(chǎn)血清質(zhì)量差，這是*的，主要原因并不是生產(chǎn)廠家的責(zé)任，而是天然環(huán)境差和抗生素的大量使用。國(guó)內(nèi)環(huán)境污染嚴(yán)重，同時(shí)飼養(yǎng)過(guò)程中抗生素極其濫用，有毒有害物質(zhì)會(huì)大量殘留在血清中，終不利于細(xì)胞的生長(zhǎng)。2、南美血清，來(lái)源很多，

ELISA加樣時(shí)如何避免氣泡的產(chǎn)生?2021/03/01: 相信大家在很多說(shuō)明書或教科書上都看到過(guò)這樣的一條提示，就是加樣時(shí)要避免出現(xiàn)氣泡，這到底是什么原因呢？因?yàn)樵谧鰧?shí)驗(yàn)的過(guò)程中，有時(shí)為了打干凈槍頭里面的液體，很容易產(chǎn)生氣泡，這樣對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果會(huì)產(chǎn)生什么影響呢?1.通常氣泡都是聚集在酶標(biāo)板的孔周圍，導(dǎo)致孔中液體不能與孔壁有效接觸，使2.孔內(nèi)反應(yīng)不均一。3.包被時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致包被不*實(shí)際包被量下降--弱陽(yáng)性甚至假陰性。4.封閉時(shí)有氣泡的話，將導(dǎo)致大量未結(jié)合位點(diǎn)的存在，引起非特異性結(jié)合--本底增高，假陽(yáng)性。5.加樣時(shí)有氣泡的話，抗原抗體不能有效的結(jié)合--

恒遠(yuǎn)技術(shù)分享:細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇2021/02/26: 適度地保存一定量的細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種，起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外，還可以利用細(xì)胞凍存的形式來(lái)購(gòu)買、寄贈(zèng)、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。今天的技術(shù)文章中就為大家講解一下細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇操作方法！操作步驟（一）細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；2.取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，用胰蛋白酶把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)，懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞則直接將細(xì)胞移至15ml離心管中；3.離心1000rpm，5min；4.去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入適量配

如何做出完美ELISA實(shí)驗(yàn)?2021/02/26: 每一位科研人員都希望自己做的實(shí)驗(yàn)?zāi)艿玫揭粋€(gè)完美的結(jié)果，但是在操作過(guò)程中難免出現(xiàn)一些或大或小的問(wèn)題。今天上海恒遠(yuǎn)為您總結(jié)7步ELISA檢測(cè)實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)，希望對(duì)ELISA新手們有所幫助。1、包被原的性質(zhì)很重要，蛋白濃度，是否降解，這關(guān)系到你做出的抗體可不可以被其識(shí)別，所以保存抗原很重要，我做重組蛋白時(shí)，師兄都嚴(yán)格警告我一定要在冰浴下緩慢融化就是這個(gè)道理。還有有的包被原可能不是蛋白，對(duì)于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對(duì)其改造再加以包被，方法簡(jiǎn)要的列出如下:①親和素生物素:先親和素先包被載體，加入生

ELISA實(shí)驗(yàn)誤差?恒遠(yuǎn)幫你減小誤差!2021/02/25: 細(xì)節(jié)決定成敗，在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中，誤差分有系統(tǒng)誤差、偶然誤差、過(guò)失誤差，而一個(gè)小小的誤差主意能夠影響到實(shí)驗(yàn)，那么實(shí)驗(yàn)誤差概率如何縮小？①：檢驗(yàn)技師應(yīng)具備從事實(shí)驗(yàn)室操作的基本素質(zhì)和實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。能熟練操作實(shí)驗(yàn)儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問(wèn)題的能力，對(duì)實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的意外情況能及時(shí)妥善解決。②：使用校對(duì)過(guò)的微量移液器，排除自然誤差。移液器準(zhǔn)確與否對(duì)定量檢測(cè)尤為重要。③：仔細(xì)閱讀說(shuō)明書，嚴(yán)格按照說(shuō)明書要求進(jìn)行規(guī)范化操作。不同批號(hào)的試劑不可混用。值得改進(jìn)的地方，反復(fù)試驗(yàn)確定成立后才能改進(jìn)。④：洗滌*

恒遠(yuǎn)教您如何避免血清中產(chǎn)生沉淀物！2021/02/25: 說(shuō)到血清，相信大家都不會(huì)陌生，血清就是指血液凝固后，在血漿中除去纖維蛋白原分離出的淡黃色透明液體或指纖維蛋原白已被除去的血漿。血清的作用非常多，所以在科學(xué)研究中時(shí)常會(huì)用到。今天的文章中，將為大家講解血清的作用以及怎么避免血清中沉淀物的產(chǎn)生！主要作用1提供基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：氨基酸、維生素、無(wú)機(jī)物、脂類物質(zhì)、核酸衍生物等，是細(xì)胞生長(zhǎng)必須的物質(zhì)。2提供激素和各種生長(zhǎng)因子：胰島素、腎上腺皮質(zhì)激素（地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長(zhǎng)因子如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮生長(zhǎng)因子、血小板生長(zhǎng)因子等。3

ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果不滿意?你可能沒(méi)有做好這幾點(diǎn)!2021/02/24: 做任何實(shí)驗(yàn)，其實(shí)驗(yàn)結(jié)果多多少少都會(huì)有一些偏差，ELISA試劑盒因?yàn)閮?yōu)點(diǎn)多，受到很多科研工作者的喜歡，雖說(shuō)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)單，但是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)稍微不注意也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，今天上海恒遠(yuǎn)將為大家分享：影響ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素有哪些?1、ELISA試劑盒顯色液量不可過(guò)多加樣的工作環(huán)境不能處于陽(yáng)光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng)，顯色液量不能過(guò)多，以免顯色過(guò)強(qiáng)。2、ELISA試劑盒操作前應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時(shí)間、洗滌的

技術(shù)分享:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)小技巧2021/02/24: 對(duì)于ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)新手們來(lái)說(shuō)，一場(chǎng)實(shí)驗(yàn)下來(lái)還是有一定難度的，那是因?yàn)樗麄冞€沒(méi)有掌握一些實(shí)驗(yàn)中的小技巧，掌握了實(shí)驗(yàn)技巧之后，用ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)會(huì)容易很多。今天為大家分享的文章中包含了ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的要求、方法等技術(shù)。新手小白們還不趕快收藏起來(lái)！1.加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。2.合理安排檢測(cè)量，以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。3.吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。4.要盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，又能反映出試劑盒的精密度。5.樣品稀釋

關(guān)于免疫組化,這里或許有您想問(wèn)的2021/02/23: 免疫組化，是應(yīng)用免疫學(xué)基本原理——抗原抗體反應(yīng)，即抗原與抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來(lái)確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原（多肽和蛋白質(zhì)），對(duì)其進(jìn)行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)或免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)(immunocytochemistry)。今天上海恒遠(yuǎn)為大家整理了一些一些免疫組化的常見問(wèn)題，下面我們來(lái)看看吧！1.在什么情況下使用TritonX-100？(1)TritonX-100化學(xué)名稱為聚乙二醇

上海恒遠(yuǎn)為您分享ELISA試劑盒的洗滌參數(shù)2021/02/23: 優(yōu)化ELISA的重點(diǎn)之一在于洗滌。洗滌步驟可降低未結(jié)合抗體所引起的背景信號(hào)，從而增加分析的信噪比。而不充分的洗滌會(huì)導(dǎo)致差異和高背景，從而帶來(lái)不理想的結(jié)果。今天上海恒遠(yuǎn)將為大家分享：ELISA試劑盒的洗滌參數(shù)。第yi、洗滌量自動(dòng)洗板機(jī)會(huì)分配洗滌液。如果你之前遭遇過(guò)高背景，那么不要猶豫，將洗滌量調(diào)為高，比包被體積更高。太少的洗滌液會(huì)讓一部分分析表面洗滌不到，從而明顯增加背景。所有反應(yīng)孔的洗滌量必須相同。ELISA板的商通常會(huì)在試劑盒的使用手冊(cè)中列出包被量。行業(yè)中通常使用的包被量是200μl。如果你的

檢測(cè)蛋白用WB實(shí)驗(yàn)還是ELISA實(shí)驗(yàn)好?它們有什么區(qū)別?2021/02/22: 檢測(cè)蛋白的實(shí)驗(yàn)有很多種,WB實(shí)驗(yàn)和ELISA實(shí)驗(yàn)是比較常用的兩種實(shí)驗(yàn)方法,這兩種方法哪一種的實(shí)驗(yàn)結(jié)果更為可靠呢?有些人說(shuō)ELISA自己包被抗體的話會(huì)比較麻煩，WB相比更加科學(xué)，容易被雜志接納。但是血清中沒(méi)有內(nèi)參可以選擇。是不是ELISA實(shí)驗(yàn)操作要簡(jiǎn)單很多，那么又如何來(lái)解決這樣的一個(gè)問(wèn)題呢？今天上海恒遠(yuǎn)來(lái)為您解答這個(gè)疑惑。一、WB和ELISA的敏感性有所區(qū)別。雖然前者用ECL顯色敏感度可達(dá)pg級(jí)，但不同的樣品來(lái)源和抗體的質(zhì)量，不能保證每次都到這個(gè)級(jí)別;而ELISA可以達(dá)到ng級(jí)。也就是說(shuō)ELISA

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