植物類黃酮（Flavonoid）試劑盒說明書
微量法 100T/96S
正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定測定意義：
類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物，對(duì)人體具有消炎，抗菌，降血脂，清除體內(nèi)羥自由基，預(yù)防癌癥等作用。
測定原理：
在堿性亞硝酸鹽溶液中，類黃酮與鋁離子形成在 510nm 處有特征吸收峰的紅色絡(luò)合物，測定樣品提取液在 510nm 處的吸光值，即可計(jì)算樣品類黃酮含量。
組成：
產(chǎn)品名稱 | BD6004-100T/48S | Storage |
提取液： | 60%乙醇，自備 | 4℃ |
試劑一：液體 | 1ml | 4℃ |
試劑二：液體 | 1ml | 4℃ |
試劑三：液體 | 10ml | 4℃ |
說明書 | 一份 |
自備儀器和用品：
天平、烘箱、粉碎儀、篩子、超聲破碎儀、60%乙醇、離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96 孔板、蒸餾水。
類黃酮提取：
將樣本烘干至恒重，粉碎，過 40 目篩之后，稱取約 0.02g，加入 2ml 提取液，60℃振蕩提取 2h，10000g， 25℃，離心 10min，取上清待測。
測定操作表
1、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min，調(diào)節(jié)波長至 500nm，蒸餾水調(diào)零。
2、操作表
| 蒸餾水（µl） | 108 |
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試劑一（µl） | 6 | 6 |
混勻，25℃靜置 6min |
試劑二（µl） | 6 | 6 |
混勻，25℃靜置 6min |
試劑三（µl） | 80 | 80 |
混勻，25℃靜置 15 min，測定 510nm 處吸光值。ΔA=A 測定-A 空白，空白管只要做一 管。 |
類黃酮含量計(jì)算公式
a. 用微量石英比色皿測定的計(jì)算公式如下標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 5.02x+0.0007，R2 = 0.9996
類黃酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷5.02÷(W÷V 樣總)= 0.398×（ΔA -0.0007）÷W V 樣總：加入提取液體積，2.5ml； V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.108ml； W：樣品質(zhì)量，g b.用 96 孔板測定的計(jì)算公式如下
標(biāo)準(zhǔn)曲線：y = 2.51x+0.0007，R2 = 0.9996
類黃酮含量（mg/g 干重）=（ΔA -0.0007）÷2.51÷(W÷V 樣總)= 0.797×（ΔA -0.0007）÷W V 樣總：加入提取液體積，2ml；V 樣：反應(yīng)中樣品體積，0.108ml；W：樣品質(zhì)量，g
*低檢出限為 10µg/g。
