化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
兔脂肪原代細(xì)胞
兔脂肪細(xì)胞分離自脂肪組織；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng)，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪細(xì)胞分為白色脂肪細(xì)胞和褐色（棕色）脂肪細(xì)胞，常呈白色，在嬰幼兒期大量增殖，到青春期數(shù)量達(dá)到巔，此后數(shù)量一般不再增加。細(xì)胞內(nèi)含有大量富含脂肪的小泡，稱為脂質(zhì)泡，富含光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。此外，還有一種褐色脂肪細(xì)胞，在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于肩胛骨間、頸背部、腋窩、縱隔及腎臟周圍，含有高度團(tuán)縮的褐色脂肪，作用是將脂質(zhì)分解產(chǎn)熱，調(diào)節(jié)體內(nèi)脂質(zhì)比例。
英文名稱 | Rabbit Adipocyte Cells | 組織來源 | 脂肪 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X8480 |
細(xì)胞形態(tài) | 梭形、多角形、圓形 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔脂肪細(xì)胞
組織來源：脂肪
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件：PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：梭形、多角形、圓形
傳代特性：屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔脂肪細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
方法簡介
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脂肪采用膠原酶-酶聯(lián)合消化法獲得前脂肪細(xì)胞，經(jīng)成脂誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實(shí)驗(yàn)室分離的兔脂肪經(jīng)油紅O染色檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞 人正常胚肺成纖維細(xì)胞，MRC-5細(xì)胞 SHZ-88(癌細(xì)胞) | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白11抗體 |
Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 | 細(xì)胞分裂周期蛋白14B抗體 |
酸肌醇酸酶蛋白I5抗體 | 蛋白S抗體 |
酶4抗體 | 皰疹病毒相關(guān)泛素特異7抗體 |
鋅指蛋白263抗體 | 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白FGGY抗體 |
人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16 | CoC2(懸浮) 卵巢癌 |
COLO 205人結(jié)腸癌細(xì)胞 COLO 205 human colon cancer cells 1640+10% FBS | TNFSF8 Protein Rat 重組大鼠 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC | 鼬肺上皮細(xì)胞;MV-1-Lu |
腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 人腦膜細(xì)胞cDNAHMC cDNA |
NCI-H226[H226]細(xì)胞，人肺癌細(xì)胞 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,T24細(xì)胞 人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞HVCEC | 兔脂肪原代細(xì)胞蛋白S抗體 |
人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞;LoVo | 人胚肺二倍體細(xì)胞;KMB-17 人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基 100mL |
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HVVEC)( 5×105 ) | CM-M034小鼠肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL |
IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白 (His 標(biāo)簽) | 死亡受體4抗體 |
非平滑肌肌球蛋白2A抗體 | CL-0457TT(人甲狀腺導(dǎo)管癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 |
異質(zhì)核糖核蛋白L抗體 | 白細(xì)胞介素19抗體 |
抗菌蛋白DCD抗體 | 人耐VP16絨癌細(xì)胞株;JEG-3/VP16 |
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
化工儀器網(wǎng)