化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔陰道壁成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的tu陰道壁成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 兔陰道壁成纖維原代細胞 | 組織來源 | 陰道 |
英文名稱 | Rabbit Vaginal Wall Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X8474 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔陰道壁成纖維細胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路，也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層，即黏膜層、肌層和外膜。1）黏膜層由上皮和固有膜組成。上皮較厚，為復層鱗狀上皮，從基底層到表層由基底層、旁基底層、中間層和表層組成。沒有角化層。陰道粘膜的基底層呈細波紋狀起伏。2）肌層由平滑肌組織構成，肌束排列不規則，縱行和環形互相交錯。肌束間有較多的結締組織和彈性纖維。陰道外口有環形的橫紋肌稱括約肌。3）外膜層為纖維膜，由結締組織構成，內含豐富的彈性纖維、靜脈叢、淋巴管和。大鼠陰道壁成纖維細胞主要分離自外膜層，成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。
培養信息：
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內狀態佳
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔陰道壁成纖維細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
公司產品：
胃癌組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)/1ml | 白介素13抗體 |
蛋白質精亞型2抗體 | 腦海綿狀血管畸形蛋白2抗體 |
鹽多谷合成酶抗體 | 錯配修復蛋白2抗體 |
7型膠原抗體 | 胎盤和前列腺相關蛋白DLG5抗體 |
20號染色體開放閱讀框166抗體 | 熱休克蛋白B2抗體 |
IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人正常上皮細胞;MCF 10A 人胰腺星狀細胞培養基 100mL |
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞;NK-92 [NK92] | TEK Others Mouse 小鼠 Tie2 / TEK (aa 770-1122) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
769-P(人腎細胞腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H083人臍動脈內皮細胞培養基100mL 人間充質干細胞-骨髓RNAHMSC-bm miRNA5 μg | KEAP1 Others Human 人 KEAP1 / INRF2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
黑人Butt淋巴瘤細胞;RAJI 大鼠氣管和支氣管上皮細胞培養基 100mL | AGO2 Others Human 人 AGO2 / Argonaute 2 / EIF2C2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CM-R055大鼠卵巢成纖維細胞培養基100mL | 兔陰道壁成纖維原代細胞錯配修復蛋白2抗體 |
IB2 Others Human 人 IB2 / B2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | 魚源細胞 |
人T淋巴細胞白血病細胞;HuT 78 | PDGFRA Others Human 人 PDGFRa / CD140a 人細胞裂解液 (陽性對照) |
大額牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-1 正常肝細胞，L-02細胞 T24(膀胱移行細胞癌細胞) | 12號染色體開放閱讀框63抗體 |
層粘連蛋白β2抗體 | LAMP3 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP3 / DC-LAMP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
BCL2相關X蛋白抗體 | 富含亮重復結構域蛋白10抗體 |
葡萄糖轉運蛋白1抗體 | IZUMO4 Others Human 人 IZUMO4 / C19orf36 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
化工儀器網