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詳細介紹
兔食管上皮原代細胞
兔食管上皮細胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統發生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。在發育過程中，食管的上皮細胞增殖，由單層變為復層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復層扁平上皮，耐摩擦，有保護作用。在食管與胃賁門交界處，復層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復層扁平上皮細胞覆蓋，其頂端細胞膜和細胞間連接復合體聯合在一起產生有效滲透屏障，防止食管內容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細胞的基質外側細胞膜和深層細胞的全部細胞膜不暴露于食管腔內規律的大幅波動的滲透壓之下。從組織學上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發生和分化標記的依序表達。食管上皮細胞的培養是研究食管正常生理機制和食管癌變機制的非常好的體外模型。
英文名稱 | Rabbit Esophageal Epithelial Cells | 組織來源 | 食管 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X8115 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：兔食管上皮細胞
組織來源：食管
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔食管上皮細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的兔食管上皮采用蛋白酶-膠原酶聯合消化法，并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔食管上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9 | 肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體 |
谷氨轉移酶GMPS抗體 | 雄激素受體相關蛋白24抗體 |
抗利尿激素1A抗體 | 延伸突觸蛋白3抗體 |
自噬相關蛋白4A抗體 | 肌側索硬化癥相關蛋白FIG4抗體 |
延伸突觸蛋白3抗體 | 雄激素受體相關蛋白24抗體 |
TMED1 Others Human 人 TMED1 人細胞裂解液 (陽性對照) | SW620(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/4664T/2013) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
人肺泡上皮細胞HPAEpiC | HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Texas/05/2009) HA 人細胞裂解液 (陽性對照) |
PDCD1 Others Human 人 PD1 / PDCD1 人細胞裂解液 (陽性對照) | VTCN1 Others Mouse 小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Hacat(人永生化角質形成細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0352HFF-1(人成纖維細胞)5×106cells/瓶×2 白牦牛皮膚細胞;Yak-2 | 小耳豬肺細胞;SEP-L2 大細胞肺癌細胞，NCI-H661細胞 DSL-6A/C1細胞，大鼠胰腺癌細胞株 |
CM-R124大鼠脈絡膜血管細胞培養基100mL | 兔食管上皮原代細胞延伸突觸蛋白3抗體 |
293T細胞，SV40永生化的人胚腎上皮細胞 蚊子細胞,C6/36細胞 CL-0250801-D (人巨細胞性肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | 人類成纖維細胞系;CNLMG-B5538SKIN |
CL-0035BIU-87(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2 | NPDC1 Others Human 人 NPDC-1 / NPDC1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人毛發干細胞(HHDPC)( 5×105 ) MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 Mouse | 巖藻糖基轉移酶7抗體 |
自噬相關蛋白4A抗體 | HLF細胞，胚肺細胞 人前列腺上皮細胞,RWPE1細胞 人胚胎肌肉組織來源細胞;CCC-HSM-2 |
谷氨轉移酶GMPS抗體 | 抗利尿激素1A抗體 |
巖藻糖基轉移酶7抗體 | TMED1 Others Human 人 TMED1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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