化工儀器網
詳細介紹
兔海綿體平滑肌原代細胞
兔海綿體平滑肌細胞分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系，破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。
英文名稱 | Rabbit Corpora Cavernous Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 海綿體 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7954 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：兔海綿體平滑肌細胞
組織來源：海綿體
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態：成纖維細胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內狀態佳
消化液：0.25%
培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔海綿體平滑肌細胞體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。
方法簡介
實驗室分離的兔海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
實驗室分離的兔海綿體平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 人胰腺癌細胞，NCL-H548細胞 MDCK (NBL-2)(狗腎細胞) | Rhesus antibody Rh GDF8 生長分化因子8/肌肉抑制素抗體 規格 0.2ml |
I CTP(Human Cross-linked Carboxy-terminal telopeptide of type I collagen) ELISA Kit 人Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽Multi-class antibodies規格： 48T | IgG/Gold 膠體金標記的小鼠抗大鼠IgG 2ml |
IL-9： 白介素9抗體 0.1ml | Human anti-IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RENBP 腎素結合蛋白抗體 規格 0.2ml | Anti-Leptin receptor(long)/FITC 熒光素標記瘦素受體抗體(長)IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh phospho-STAT6(Tyr641) 0酸化信號轉導和轉錄激活因子6抗體 規格 0.1ml | sMHC-1(Mouse soluble myosin heavy chain 2) ELISA Kit 小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1 96T |
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375] | CL-0439SK-CO-1(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
人細胞;Hela P10s-11F 大鼠血管外膜成纖維細胞培養基 100mL | 4T1 小鼠癌細胞 |
小腸隱窩上皮細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞 | 人氣管上皮細胞裂解物HTEpiCL |
MEG-01細胞，人成巨核細胞白血病細胞 正常小鼠Leydig細胞,TM3細胞 間充質干細胞生長添加物MSCGS | 兔海綿體平滑肌原代細胞Human anti-IgA antibody ELISA Kit 人抗IgA抗體 96T |
III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL | ADAM12 Others Human 人 ADAM12 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FGFR2 Others Mouse 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H105人皮下脂肪細胞培養基100mL |
體細胞;HEL | Rhesus antibody Rh APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 規格 0.1ml |
BDP： 母細胞瘤相關蛋白ARID3B抗體 0.2ml | MHCC97-H 高轉移人肝癌細胞 |
Anti-VEGF-A/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子A抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | PRSS3： 腦酶3抗體 0.2ml |
Anti-CDK8/FITC 熒光素標記周期素依賴性激酶8抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | 人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375] |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
化工儀器網