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詳細介紹
兔腹腔巨噬原代細胞
兔腹腔巨噬細胞分離自腹腔；腹腔，即軀干腹部的腔，內(nèi)襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。巨噬細胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一；腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。
英文名稱 | Rabbit Peritoneal Macrophage Cells | 組織來源 | 腹腔液 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7058 |
細胞形態(tài) | 巨噬細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：兔腹腔巨噬細胞
組織來源：腹腔液
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液 （12mM）
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的兔腹腔巨噬采用反復往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結合差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的兔腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 [RAW264.7 小鼠淋巴管內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基 100mL | OX-B(Human Orexin B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B 96T |
RELM alpha： 抵抗素樣分子α抗體 0.2ml | Rhesus antibody Rh PTPN11 蛋白酪0酸酶2抗體 規(guī)格 0.1ml |
Anti-Phospho-HER2(Tyr1112) /FITC 熒光素標記0酸化HER2受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | CCDC63： 卷曲螺旋結構域蛋白63抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BORIS/CT27 /抗原27抗體(高遷移率族蛋白) 規(guī)格 0.2ml | Anti-CXCL15/Lungkine/FITC 熒光素標記趨化因子CXCL15體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
成纖維細胞生長因子-8/纖維母細胞生長因子-8抗體 Anti-FGF-8/HBGF-8 0.1ml | ACCN1： 腦通道蛋白1抗體 0.2ml |
人腦血管平滑肌細胞 Human | ACTE1 非洲爪蟾胚胎細胞 |
CL-0206SGC7901(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 | MLF, 小鼠淋巴成纖維細胞 |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T | 人胚胎，皮膚，肌肉;M-7 |
CM-M003小鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞培養(yǎng)基100mL | CL-0120HuH-7(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×2 |
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL3 中國倉鼠肺細胞，CHL/IU[CHL-11]細胞 C3H 10T1/2 2A6細胞，小鼠成纖維細胞 | 兔腹腔巨噬原代細胞CCDC63： 卷曲螺旋結構域蛋白63抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;VERO | rCF, 大鼠心臟成纖維細胞 A4細胞 HL-7702(肝細胞) |
ACVR2A Others Mouse 小鼠 ACVR2A / AcIIa 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人癌細胞;MDA-MB-435S |
大鼠小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基 100mL | IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗大鼠IgG 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRK2/BARK1/ADRBK1 G蛋白偶合受體激酶2抗體 規(guī)格 0.1ml | 人上皮細胞;Ca Ski |
ER81： 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白抗體 0.2ml | Anti-Phospho-Lyn (Tyr396) 0酸化膜相關蛋白酪激酶Lyn抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml |
GP- II b III a/CD41+CD61(Mouse platelet membrane glycoprotein II b III a) ELISA Kit 小鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢaMulti-class antibodies規(guī)格： 48T | 人腦血管平滑肌細胞 Human |
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