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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
實驗室分離的兔腸巨噬采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
實驗室分離的兔腸巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 兔腸巨噬原代細胞 | 組織來源 | 腸 |
英文名稱 | Rabbit Intestinal Macrophage Cells | 貨號 | YS-01X8328 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
兔腸巨噬細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中長的一段，也是功能重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養(yǎng)分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內(nèi)大的微生態(tài)系統(tǒng)。巨噬細胞屬于免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：巨噬細胞樣
傳代特性：屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群
消化液：（12mM）
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腸巨噬細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
公司產(chǎn)品：
小鼠小膠質(zhì)細胞MM | Anti-Tuberin/TSC2 馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介素1β轉(zhuǎn)換酶 96T | Anti-MMP-15/FITC 熒光素標記基質(zhì)金屬蛋白酶-15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Thymosin Alpha-1/PTMA α1抗體 規(guī)格 0.1ml | AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
HSD17B4： 羥基類固醇(17β)脫氫酶4/17β-HSD4抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathepsin E 組織蛋白酶E抗體 規(guī)格 0.1ml |
FRAT1： 原癌基因FRAT1抗體 0.2ml | Big ET ELISA Kit 大鼠大內(nèi)皮素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細胞裂解液 (陽性對照) | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1036 人小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基 100mL |
人角膜上皮細胞cDNAHCEpiC cDNA | THOP1 Others Mouse 小鼠 THOP1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H2170(人肺鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 WI-38(胚肺細胞) | GAD2 Others Mouse 小鼠 GAD65 / GAD2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
IL13RA1 Others Human 人 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) | SPI2 Others Mouse 小鼠 SPI2 / HAI2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
lovo, 人結(jié)腸癌細胞 | 兔腸巨噬原代細胞AMBP(Human alpha-1-microglobulin/bikunin precursor) ELISA Kit 人α1微球蛋白/bikunin前體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
BxPC-3(人原位胰腺腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M116小鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞培養(yǎng)基100mL 人胰腺腺泡上皮癌;HPAC | KMB 人胚肺成纖維樣細胞 |
人胚肺成纖維細胞;MRC-5 | GC-2spd細胞，小鼠精母細胞 人癌細胞,ZR75-30細胞 前體細胞分化培養(yǎng)基NPCM |
TNFRSF1A Others Rat 大鼠 TNFR1 / CD120a / TNFRSF1A 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PTTG/FITC 熒光素標記垂體轉(zhuǎn)化基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
1-Oct： 陽離子轉(zhuǎn)運器1抗體 0.1ml | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY1002 人元細胞培養(yǎng)基 100mL |
SOX2： 胚胎干細胞關(guān)鍵蛋白抗體 0.1ml | CD42b： 血小板糖蛋白GPIb抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.1ml | FAM19A2 Others Human 人 FAM19A2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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