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詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜間質(zhì)采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 人子宮內(nèi)膜間質(zhì)原代細胞 | 組織來源 | 子宮組織 |
英文名稱 | Human Endometrial Mesenchymal Cells | 貨號 | YS-01X7674 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持，這些結構受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結締組織構成，其內(nèi)有大量的星形細胞，稱為基質(zhì)細胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品：
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2 | Anti-Tumstatin 抑素抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
TdT(Human terminal deoxynucleotidyl transferase) ELISA Kit 人末端脫氧核苷酸轉移酶 96T | Anti-MMP-12/FITC 熒光素標記基質(zhì)金屬蛋白酶-12/巨噬細胞金屬彈力蛋白酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh THYN1 胸腺細胞核蛋白1抗體 規(guī)格 0.2ml | Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪激酶3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
Hemoglobin alpha： 血紅蛋白α抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Cathepsin K 組織蛋白酶K抗體 規(guī)格 0.1ml |
Factor XII light chain： 12輕鏈抗體 0.2ml | FSH ELISA Kit 大鼠促卵泡素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
GM2A Others Human 人 GM2A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | U-937(人組織細胞淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠淋巴瘤細胞;EL4 |
人結腸平滑肌細胞裂解物HCSMCL | AMTN Others Human 人 AMTN / Amelotin 人細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 Pt K1 (NBL-3)(長鼻袋鼠腎細胞) | TF Others Sus scrofa (Pig) 野豬 ansferrin / TF 人細胞裂解液 (陽性對照) |
FZD5 Others Human 人 Frizzled-5 人細胞裂解液 (陽性對照) | EPHA4 Others Human 人 EPHA4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
MN-c, 小鼠皮質(zhì)元 | 人子宮內(nèi)膜間質(zhì)原代細胞Flt3(Human FMS-like tyrosine kinase 3) ELISA Kit 人FMS樣酪激酶3Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
人淋巴成纖維細胞 (HLF)( 5×105 ) 細胞名稱 種屬 | GIST 人胃腸道間質(zhì)瘤細胞 |
人胚肺二倍體細胞;2BS | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1 人肺腺癌細胞，A549細胞 QG-56(肺扁平上皮癌細胞) |
USP7 Others Human 人 USP7 / HAUSP (aa 208-560) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-CD150/SLAM/FITC 熒光素標記CD150抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Optineurin： 視變誘導蛋白抗體 0.1ml | YAC-1(小鼠淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠肺腺癌細胞系;LA795 |
SOX4： 核轉錄因子SOX4抗體 0.2ml | phospho-CDK6 (Tyr13)： 0酸化周期素依賴性激酶6抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh IgG/Gold 膠體金標記的驢抗豚鼠IgG 規(guī)格 0.5ml | GM2A Others Human 人 GM2A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
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