詳細介紹
人子宮內膜干原代細胞
人子宮內膜干細胞細胞分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的內層,位于子宮腔面,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時期的中胚層組織,具有很強的自我復制和多向分化潛能,具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,運用 MSCs來修復軟骨損傷具有很好的應用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質干細胞。體外培養的子宮內膜干細胞細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
英文名稱 | Human Endometrial Stem Cells | 組織來源 | 子宮組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7666 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:人子宮內膜干細胞
組織來源:子宮組織
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人子宮內膜干采用膠原酶消化法、低密度稀釋克隆制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人子宮內膜干經CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小鼠誘導性多潛能干細胞;PUMC-mips-A2 | Nogo R: 軸索過度生長抑制因子受體/Nogo受體抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh MCK10/CD167a/DDR1 上皮酪激酶抗體(癌激酶10) 規格 0.1ml | Anti-TSARG7/FITC 熒光素標記發生相關的新基因抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
SSTR5 (somatostatin receptor 5) 受體5抗原 0.5mg | Anti-Osterix 成骨相關轉錄因子抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml |
Anti-Galectin /FITC 熒光素標記半乳糖凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | Rhesus antibody Rh SLC25A13 線粒體內鈣結合天冬/谷載體蛋白抗體 規格 0.2ml |
Anti-PHD3 /FITC 熒光素標記羥化酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml | Anti-AT2R/FITC 熒光素標記血管緊張素Ⅱ-2型受體抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人癌細胞;MDA-MB-435S 人視網膜微血管內皮細胞培養基 100mL |
人結腸平滑肌細胞總RNAHCSMC NA | PVRL2 Others Rat 大鼠 CD112 / Nectin-2 / PVRL2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
hCD34+-CB-c single donor 從臍帶血提取的人類CD34+祖細胞(hCD34+-CB),單一來源 100000 人卵巢成纖維細胞HOF | LTBR Others Rat 大鼠 LTBR / TNFRSF3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Neuro-2a/N2a(小鼠腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | ACY1 Others Human 人 ACY1 / Aminoacylase-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
MN-h, 小鼠海馬元 | 人子宮內膜干原代細胞Anti-Osterix 成骨相關轉錄因子抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml |
KDR Others Human 人 VEGFR2 / Flk-1 / CD309 / KDR 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人少突膠質細胞 |
破骨細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) | GFRA1 Others Human 人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 人細胞裂解液 (陽性對照) |
J-1111細胞,白血病單核細胞 人肺支氣管癌細胞,NCI-H1650細胞 CL-0436SF17(人腦瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | GTPBP9: 核苷酸結合蛋白9抗體 0.2ml |
Human leukemia inhibitory factor receptor,LIFR ELISA Kit 人白血病抑制因子受體Multi-class antibodies規格: 48T | ACVR1B Others Cynomolgus 食蟹猴 ACVR1B / ALK-4 人細胞裂解液 (陽性對照) |
細胞毒性受體NK-p46抗體 Anti-CD335/NKp46/NCR1 0.1ml | T4 ELISA Kit 大鼠甲狀腺素 96T |
ASGPR1: 唾液酸糖蛋白受體1抗體 0.1ml | IL17RA Others Rat 大鼠 IL17RA / IL17R 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。