化工儀器網
詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人牙齦成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人牙齦成纖維原代細胞 | 組織來源 | 牙齦組織 |
英文名稱 | Human Gingival Fibroblast Cells | 貨號 | YS-01X7695 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人牙齦成纖維細胞分離自牙齦組織；牙齦指緊貼于牙頸周圍及鄰近的牙槽骨上淡紅色的結構，由復層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分，血管豐富，呈淡紅色，堅韌而有彈性，因缺乏黏膜下層，直接與骨膜緊密相連，故牙齦不能移動。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
培養信息：
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
L129細胞，NCTC克隆929細胞 人Butt`s淋巴瘤細胞,Raji細胞 小鼠小膠質細胞;BV2 | LF/LTF ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白 96T |
Regucalcin/SMP30： 衰老標記蛋白30抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh Quiescin Q6/QSOX1 巰基氧化酶1抗體 規格 0.2ml |
Anti-HDAC7/FITC 熒光素標記組蛋白去乙酰化酶7抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | C17orf77： 17號染色體開放閱讀框77抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh BRD1 BRD1蛋白抗體 規格 0.2ml | Anti-CX36 /FITC 熒光素標記間隙連接蛋白36抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
脂肪酸結合蛋白2抗體 Anti-Fabp2 0.1ml | phospho-AKT1 (Ser473)： 0酸化蛋白激酶AKT1抗體 0.1ml |
AGS(人胃腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | CL-0319B16-F10(小鼠皮膚黑色素瘤細胞)5×106cells/瓶×2 |
RAW264.7細胞，單核細胞-巨噬細胞 人單核細胞白血病細胞,THP-1細胞 EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMY0923 | 293A (人胚腎細胞) 5×106cells/瓶×2 |
人臍帶間質干細胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells | TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0165NCI-H1299(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 | CL-0092HBZY-1(大鼠腎小球系膜細胞)5×106cells/瓶×2 |
3T3D細胞，人骨髓瘤細胞 嗜熱脂肪地芽孢桿菌 SV40T轉化的人胚腎細胞;293T | 人牙齦成纖維原代細胞C17orf77： 17號染色體開放閱讀框77抗體 0.2ml |
非洲綠猴腎細胞;BS-C-1 | SW116細胞，人大腸癌細胞 人葡萄膜黑色素細胞,UM細胞 人結直腸腺癌細胞;Caco-2 |
Promocell C-24305 Melanocyte Growth Medium M2 (prf), 黑色素細胞生長培養基M2型套裝，無酚紅 500ml | 其他白細胞介素 |
人正常前列腺上皮細胞;RWPE-1 | IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的兔抗大鼠IgM 0.1ml |
Rhesus antibody Rh GRP78/BIP/HSPA5 葡萄糖調節蛋白78抗體(熱休克蛋白70蛋白5) 規格 0.1ml | 人前脂肪細胞-皮下RNAHPA-s miRNA5 μg |
EGF： 表皮生長因子抗體 0.1ml | Anti-Phospho-LRP6 (Ser1490) 0酸化低密度脂蛋白受體相關蛋白6抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml |
MTL(Mouse Motilin) ELISA Kit 小鼠胃動素Multi-class antibodies規格： 48T | AGS(人胃腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
化工儀器網