化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
人胸腺上皮原代細胞
人胸腺上皮細胞分離自胸腺組織；胸腺是機體重要的淋巴器官，其功能與免疫緊密相關，是T細胞分化、發(fā)育、成熟的場所，還可以分泌胸腺激素及激素類物質，具有內分泌技能的器官。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分，其外，胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發(fā)育階段的三維結構，根據(jù)其在胸腺中位置不同，可分為皮質胸腺上皮細胞和髓質胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質和髓質上皮細胞的遷移過程中相互作用完成的。此外，胸腺細胞通過皮質胸腺上皮細胞介導的陽性選擇和髓質胸腺上皮細胞介導的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構成胸腺微環(huán)境的主要成份，其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質性，與胸腺細胞結合成不同類型復合體，部分胸腺上皮細胞相互排列構成囊泡樣結構。電鏡觀察，可把胸腺上皮細胞分為3-6型，用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類型。
英文名稱 | Human Thymic Epithelial Cells | 組織來源 | 胸腺組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7654 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人胸腺上皮細胞
組織來源：胸腺組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人胸腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人胸腺上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
小型豬腎細胞;MPK | OLAb ELISA Kit 大鼠氧化低密度脂蛋白抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 48T |
C1orf162： 1號染色體開放閱讀框162抗體 0.2ml | GPR18： G蛋白偶聯(lián)受體18抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh CECR6 貓眼綜合征染色體候選基因6抗體 規(guī)格 0.2ml | PRRSV： 豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病病毒抗體 0.2ml |
Anti-Notch3/FITC 熒光素標記跨膜受體蛋白Notch-3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | FoxP1(Forkhead box P1) FoxP1(T細胞轉錄因子)抗原 0.5mg |
IgG/Gold 金標記小鼠抗人IgG (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 2ml | MMP2： 基質金屬蛋白酶2抗體 0.1ml |
CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | IL17F Others Human 人 IL-17F / Ierleukin-17F 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE) | SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
NCI-H205(人腎上腺腺瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 3T3-Swiss albino(胚胎成纖維細胞) | CD300LG Others Rat 大鼠 CLM-9 / EM4 / CD300LG 人細胞裂解液 (陽性對照) |
G-401(人腎癌Wilms細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠腦膜細胞MMenC | Caov-3細胞，人卵巢癌細胞 大鼠胰島素細胞,INS-1細胞 元細胞Many types of cells包裝：5 ×105次方(1ml) |
Sars結構蛋白表達株;293 001B | 人胸腺上皮原代細胞PRRSV： 豬繁殖與呼吸綜合征/豬藍耳病病毒抗體 0.2ml |
Jurkat77細胞，人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系 615小鼠癌瘤株,Ca761細胞 牛腦垂體提取物BPE | 人角膜上皮細胞HCEpiC |
轉化細胞 | TNFRSF10D Others Cynomolgus 食蟹猴 AIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Malaysia/2506/2004) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-IL-12R Beta2/FITC 熒光素標記白細胞介素-12受體β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RSK2 (Ser227) 0酸化核糖體S6激酶RSK2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml | PC-12細胞，大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化) HCT 116(結腸癌細胞) 人母細胞瘤細胞;BE(2)-M17 |
Rhesus antibody Rh Phospho-MSK1 (Ser360) 0酸化有絲分裂原和應激活化型蛋白激酶1抗體 規(guī)格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF13/RFLAT-1 腸道內富含的Kruppel樣因子13 規(guī)格 0.1ml |
Fc AlphaR I /CD89(Human Receptor I for the Fc region of immunoglobulin A,Fc AlphaR I ) ELISA Kit 球蛋白A Fc段受體Ⅰ 96T | CCNE1 Others Mouse 小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
化工儀器網(wǎng)