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詳細介紹
人視網膜微血管內皮原代細胞
人視網膜微血管內皮細胞分離自視網膜組織；視網膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網膜由色素上皮層和視網膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、節細胞層、纖維層、內界膜。視網膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視乳頭。視網膜上的感覺層是由三個元組成。第一元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節細胞，約有10到數百個視細胞通過雙節細胞與一個節細胞相聯系，負責聯絡作用。第三層叫節細胞層，專管傳導。視網膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網膜感受器沖動的纖維跨越視網膜表面，經由視到達出口。視網膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。它是組成血管腔面單層扁平上皮樣細胞，它所產生和分泌的生物活性物質對維持血管張力、調節血壓、抗血栓形成等有重要作用，在視網膜血管疾病的發病機制中有重要病理生理學意義。由于從不同的組織和器官獲得的內皮細胞具有不同的特性，在腦和視網膜中，這些內皮細胞具有內屏障的功能，在調節血管生理狀態，釋放血管活性物質以及新生血管的形成中發揮著重要作用，體外分離培養RCEC對研究視網膜血管性疾病發生發展的病理生理機制以及疾病的早期防治具有重要臨床意義。
英文名稱 | Human Retinal Microvascular Endothelial Cells | 組織來源 | 視網膜組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7412 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人視網膜微血管內皮細胞
組織來源：視網膜組織
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人視網膜微血管內皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、后通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人視網膜微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
敘利亞倉鼠皮膚細胞;GH-S1 | PEDF ELISA Kit 大鼠色素上皮衍生因子Multi-class antibodies規格： 48T |
C1orf127： 1號染色體開放閱讀框127抗體 0.2ml | GRM1： 促代謝型谷酸受體1抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh Cellulase 纖維素酶 規格 1ml | PCDH11Y： 原鈣粘附蛋白11Y抗體 0.2ml |
Anti-Phospho-Numb (Ser276)/FITC 熒光素標記0酸化膜相關蛋白Numb抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | GABAB1(GABAb Receptor 1) g-基B1受體(多肽) 0.5mg |
IgM/Gold 金標記羊抗小鼠IgM(10nm/15nm)Multi-class antibodies規格： 0.5ml | MRP2： 多藥耐藥相關蛋白2抗體 0.1ml |
OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | AZU1 Others Human 人 AZU1 / Azurocidin 1 / HBP 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人淋巴內皮細胞RNAHLEC miRNA5 μg | 小鼠垂體細胞(MPC)(5×105) |
GFRA3 Others Human 人 GFRA3 / GFR-alpha-3 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人食道上皮細胞(HEEC)(5×105 ) |
HMGB1 Others Human 人 HMGB1 / HMG1 人細胞裂解液 (陽性對照) | LoVo細胞，人結腸癌細胞 HEK293,人胚腎上皮細胞,293A細胞 腎動脈平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) |
SV40轉染人成骨細胞;hFOB 1.19 | 人視網膜微血管內皮原代細胞PCDH11Y： 原鈣粘附蛋白11Y抗體 0.2ml |
HuH-7人肝癌細胞 HuH-7 human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS | 人間充質干細胞-骨髓裂解物HMSC-bm L |
人成骨肉瘤細胞;Saos-2 | DIRAS3 Others Human 人 ARHI / DIRAS3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
人肝細胞 (HH) (1×106 ) CHO, 中國倉鼠卵巢細胞系 其它 | Anti-IL-10R/CD210/FITC 熒光素標記白細胞介素-10受體抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Anti-Phospho-S6 Ribosomal Protein (Ser235/236) 0酸化S6核糖體蛋白抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml | 大鼠癌細胞;MADB106 胃腺癌細胞，AGS細胞 SDBMSC細胞，SD大鼠骨髓間充質干細胞 |
Rhesus antibody Rh phospho-MCK10/CD167a/DDR1(Tyr513) 0酸化上皮酪激酶抗體(癌激酶10) 規格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLF9/BTEB1 轉錄因子KLF9抗體 規格 0.1ml |
RBC(Rat anti-red cell antibody )ELISA Kit 大鼠抗紅細胞抗體 96T | OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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