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詳細介紹
人腦成纖維原代細胞
人腦成纖維細胞分離自腦組織；大腦分左右兩個半球，大腦皮質（灰質）覆蓋著每個大腦半球的大部分，它是元胞體集中的地方。內部則是由纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面，即外側面（約占整個皮質面積的1/3）、內側面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分，由胚胎時期的間充質細胞分化而來；成纖維細胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構，其細胞核呈規則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質嗜弱堿性，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現跟纖維細胞的互相轉化；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的腦成纖維細胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養基中。30min細胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現為小的突起；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態，細胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細胞質透明，細胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細胞融合，并彼此連接成網狀；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
英文名稱 | Human Brain Fibroblast Cells | 組織來源 | 腦組織 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7399 |
細胞形態 | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱：人腦成纖維細胞
組織來源：腦組織
產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人腦成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人腦成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
原代表皮角化細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝：500/100ml | Bcl-2 ELISA Kit 大鼠B細胞淋巴瘤因子2Multi-class antibodies規格： 48T |
phospho-alpha B Crystallin (Ser53)： 0酸化熱休克蛋白β5/α晶狀體球蛋白B/αB-crystallin抗體 0.1ml | GM-CSFR alpha： 粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體α抗體 0.1ml |
Rhesus antibody Rh CEP128 中心體蛋白128抗體 規格 0.2ml | PRSS10： 絲酸蛋白酶10抗體 0.1ml |
Anti-NMP22/FITC 熒光素標記核基質蛋白22抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml | GDNF (Glial cell line-derived neurotrphic factor) 膠質細胞源性營養因子抗原 0.5mg |
rec Protein G/FITC 熒光素標記重組化蛋白GMulti-class antibodies規格： 0.3ml | Myf6： 生肌調節因子6抗體 0.2ml |
MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) | Promocell C-21070 Small Airway Epithelial CellGrowth Medium, 小呼吸道上皮細胞生長培養基(即用型) 500ml |
人腦膜細胞裂解物HMCL | CCL21 Others Human 人 CCL21 / 6Ckine 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
IL34 Others Mouse 小鼠 IL-34 人細胞裂解液 (陽性對照) | JAM3 Others Human 人 JAM3 / JAM-C 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HUVEC-c Growth Medium 2single donor 500,000cells 肺成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | 牛腎細胞;MDBK(BVDV-free) 鼠胚胎成纖維細胞，PA317細胞 MLA-144細胞，長臂猿淋巴瘤 |
U-2 OS, 人骨肉瘤細胞 | 人腦成纖維原代細胞PRSS10： 絲酸蛋白酶10抗體 0.1ml |
Tca8113-P160細胞，人舌癌細胞系 大腸埃希氏菌O157：H7 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化) | 人急性淋巴母細胞性白血病細胞;MOLT-4 |
腎系膜細胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml) | B18R Others Vaccinia Virus 牛痘病毒 B18R / B19R 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
hMo-PB-c single donor 人類外周血細胞來源的單核細胞， 10 million 人心臟成纖維細胞-心室HCF-av | Anti-IL-5R Alpha/CD125/FITC 熒光素標記白介素-5受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Anti-Phospho-RIP2 (Ser176) 0酸化受體結合絲蘇激酶2抗體Multi-class antibodies規格： 0.1ml | 9811C11細胞，人胃癌細胞 人骨肉瘤細胞,SW1353細胞 人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2 |
Rhesus antibody Rh Phospho-PDGFRA(Tyr754) 0酸化血小板源性生長因子受體-α抗體 規格 0.1ml | Rhesus antibody Rh KLHL21 Kelch樣蛋白21抗體 規格 0.2ml |
HBsAg(立可讀) 乙型肝炎表面抗原 96T | MMP8 Others Mouse 小鼠 MMP8 / CLG1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
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