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詳細介紹
本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業應用，不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療！
細胞屬性：
方法簡介
公司實驗室分離的人脈絡膜血管內皮采用膠原酶-蛋白酶混合消化法并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人脈絡膜血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 人脈絡膜血管內皮原代細胞 | 組織來源 | 脈絡膜組織 |
英文名稱 | Human Choroidal Vascular Endothelial Cells | 貨號 | YS-01X7317 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細胞簡介：
人脈絡膜血管內皮細胞分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養方法：
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
操作步驟：
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產品：
原代成纖維細胞培養特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml | Anti-TRPM2 瞬時受體電位離子通道蛋白抗體(M亞家族)Multi-class antibodies規格： 0.2ml |
PAMY(Human Pancreatic Amylase) ELISA Kit 人胰 96T | Anti-MKP-2/DUSP4/FITC 熒光素標記原活化蛋白激酶0酸酶-2抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Tissue factor/CD142/F3 組織因子抗體 規格 0.1ml | HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血紅素氧合酶1Multi-class antibodies規格： 48T |
phospho-HDAC2 (Ser394)： 0酸化組蛋白去乙酰化酶2抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC112/MBC1 膀胱癌突變蛋白1抗體 規格 0.2ml |
factor VIII： 8/第八/第八因子相關抗原抗體 0.1ml | sEPCR ELISA Kit 大鼠可溶性血管內皮細胞蛋白C受體Multi-class antibodies規格： 48T |
CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) | NCI-H2452(人間皮瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 L1210(白血病細胞) |
人腦膜細胞總RNAHMC NA | CN1 Others Mouse 小鼠 Coactin 1 / CN1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Daudi(人淋巴瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0206SGC7901(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×2 中國倉鼠卵巢細胞;CHO | CSNK1G1 Others Human 人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
CD200R1L Others Cynomolgus 食蟹猴 CD200RLa 人細胞裂解液 (陽性對照) | ELANE Others Mouse 小鼠 Neuophil Elastase / ELANE / ELA2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌 | 人脈絡膜血管內皮原代細胞HO-1(Human heme oxygenase 1) ELISA Kit 人血紅素氧合酶1Multi-class antibodies規格： 48T |
Molt-4(人急性淋巴母細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 IFNA5 / IFNaG 人細胞裂解液 (陽性對照) | EJ 人膀胱癌細胞 |
NCI-H524(人非小細胞肺癌細胞) 5×106cells/瓶×2 | 非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B 人肝癌細胞，SK-HEP-1細胞 95-D(高轉移肺癌細胞) |
CA4 Others Human 人 Carbonic Anhydrase IV / CA4 CHO細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-PS-1/FITC 熒光素標記早老素蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies規格： 0.2ml |
mu Opioid receptor： μ-型受體抗體 0.1ml | C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人細胞裂解液 (陽性對照) |
Spindly： 亞砷鹽相關蛋白抗體 0.2ml | C7orf63： 7號染色體開放閱讀框63抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG/PE PE標記的驢抗人IgG 規格 0.1ml | CD38 Others Rabbit 兔 SCARB3 人細胞裂解液 (陽性對照) |
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