詳細介紹
人骨髓來源內皮祖原代細胞
人骨髓來源內皮祖細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。內皮祖細胞是血管內皮細胞的前體細胞,亦稱為成血管細胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能進一步增殖分化的幼稚內皮細胞,缺乏成熟內皮細胞的特征性表型,不能形成管腔樣結構,其功能主要為參與了出生后缺血組織的血管發生和血管損傷后的修復。研究顯示,內皮祖細胞在心腦血管疾病、外周血管疾病、腫瘤血管形成及創傷愈合等方面均發揮重要作用,并為缺血性疾病的研究治療提供了新思路,EPCs生物學特性和治療作用的研究成為這一領域新的熱點。
英文名稱 | Human Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells | 組織來源 | 骨髓 |
產品規格 | 5×10?Cells/T25培養瓶 | 產品貨號 | YS-01X7496 |
細胞形態 | 內皮細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產品名稱:人骨髓來源內皮祖細胞
組織來源:骨髓
產品規格:5×10?Cells/T25培養瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代;不建議多次傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡介
公司實驗室分離的人骨髓來源內皮祖采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測
公司實驗室分離的人骨髓來源內皮祖經CD34免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中,T25培養瓶加6-8ml培養基;
⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。
2、細胞復蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養基吹勻,將細胞懸液加入培養瓶中,補加適量培養基。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化;
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。
原代上皮細胞特制基礎無血清培養基Many types of cells包裝:500/100ml | Anti-Trk B 酪激酶B抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml |
GOD(Human glucose oxidase) ELISA Kit 人葡萄糖氧化酶 96T | Anti-Phospho-MKK3 (Ser189)/MKK6 (Ser207) /FITC 熒光素標記0酸化原活化蛋白激酶MKK3/6抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
Rhesus antibody Rh TLR2/CD282 Toll樣受體2抗體 規格 0.1ml | PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人0酸肌醇3激酶Multi-class antibodies規格: 48T |
Phospho-HER4 (Tyr1162): 0酸化HER4抗體 0.1ml | Rhesus antibody Rh CCDC125 卷曲螺旋結構域蛋白125抗體 規格 0.2ml |
FGFBP1: 纖維細胞生長因子結合蛋白抗體 0.1ml | 1,3- BetaD-Glu ELISA Kit 大鼠1,3-βD葡葡糖苷酶Multi-class antibodies規格: 48T |
IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) | 人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2 人小氣道上皮細胞培養基 100mL |
人膀胱癌細胞;5637(HTB-9) | F3 Others Rat 大鼠 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 人細胞裂解液 (陽性對照) |
EPHA4 Others Mouse 小鼠 EPHA4 / HEK8 人細胞裂解液 (陽性對照) | DDR1 Others Human 人 DDR1 Kinase / CD167 (aa 444-913) 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) |
Dami(人巨核細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 人絨毛間充質成纖維細胞HVMF | HREpC Pellet 人類腎小管上皮細胞團塊 > 1 mio.cells 人心肌細胞cDNAHCM cDNA |
表達小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細胞;293KB | 人骨髓來源內皮祖原代細胞PI3K(Human Phosphotylinosital 3 kinase) ELISA Kit 人0酸肌醇3激酶Multi-class antibodies規格: 48T |
PCSK9 Others Mouse 小鼠 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) | 大鼠肝動脈內皮細胞培養基 100mL |
THP-1(人髓系白血病單核細胞) 5×106cells/瓶×2 | Daudi細胞,人白血病細胞 小鼠腎足細胞,Mouse podocyte細胞 骨骼肌細胞培養基SkMCM-prf |
CDK1 Others Human 人 CDC2 Kinase / CDK1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) | Anti-Profilin 1/FITC 熒光素標記前纖維蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml |
OXSR1: 氧化應激反應蛋白1抗體 0.2ml | IL13RA1 Others Mouse 小鼠 IL13Ra1 人細胞裂解液 (陽性對照) |
SPP24: 分泌性0蛋白24抗體 0.2ml | C1ORF111: 1號染色體開放閱讀框111抗體 0.2ml |
Rhesus antibody Rh IgG whole serum 驢抗兔IgG抗血清 規格 1ml | IL1R2 Others Rat 大鼠 IL1R2 / IL1RB / CD121b 人細胞裂解液 (陽性對照) |
1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養基,培養過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細胞凍存時,棄去培養基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養基終止消化,可使用血球計數板計數。