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詳細介紹
人肺小動脈平滑肌原代細胞
人肺小動脈平滑肌細胞分離自肺小動脈組織；小動脈（smallartery），管徑在0.3～1mm之間，小動脈包括粗細不等的幾級分支，也屬肌性動脈。較大的小動脈，內(nèi)膜有明顯的內(nèi)彈性膜，中膜有幾層平滑肌，外膜厚度與中膜相近，一般沒有外彈性膜。小動脈是決定周圍循環(huán)阻力大小的主要因素，也是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“總開關(guān)"。典型的小動脈，其管壁的厚度與管徑相比約為1∶2。中膜的肌層相對比其他動脈為厚，當平滑肌在支配下強力收縮時，其管腔可以閉塞，而使血液不能流入它所分布的毛細血管內(nèi)，從而增加了周圍血液循環(huán)的阻力。如果有許多小動脈同時收縮，可使血壓顯著上升。反之，當小動脈的平滑肌舒張時，則可使大量的血液流入毛細血管，外周阻力明顯下降，血壓降低。終末小動脈（terminal arteri-ole）的口徑為20～30μm；后小動脈（metar-teriole），又稱毛細血管前小動脈（precapil-lary arteriole）的口徑為12～15μm。管壁內(nèi)均有較稀疏的平滑肌，在毛細血管前小動脈分支的起始部分，管壁平滑肌成分增厚，叫做毛細血管前括約?。?span>precapillary sphinc-ter），其收縮或舒張，可調(diào)節(jié)真毛細血管的血流量，是調(diào)節(jié)微循環(huán)灌注量的“分開關(guān)"。
英文名稱 | Human Pulmonary Arteriolar Smooth Muscle Cells | 組織來源 | 肺小動脈組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號 | YS-01X7683 |
細胞形態(tài) | 成纖維細胞樣 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱：人肺小動脈平滑肌細胞
組織來源：肺小動脈組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介
公司實驗室分離的人肺小動脈平滑肌采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的人肺小動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；
③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；
④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細胞復蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）
②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；
③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
HaCaT人永生化表皮細胞 HaCaT immortalized human epidermal cells DMEM+10% FBS | Rhesus antibody Rh GIMAP3 GTP酶IMAP家族成員3抗體 規(guī)格 0.2ml |
P-CK(Human pan-cytokeratin) ELISA Kit 人廣譜細胞角蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T | Cy3 Cy3標記的兔抗親和素 0.1ml |
IL-2(H2E4)： 白細胞介素-2單克隆抗體 0.2ml | TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antiy)ELISA Kit 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體 96T |
Rhesus antibody Rh RIP5/RIPK5 受體結(jié)合絲蘇激酶5抗體 規(guī)格 0.2ml | Anti-Lectin/FITC 熒光素標記抗凝集素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml |
Rhesus antibody Rh Phospho-Tie2 (Tyr992) 0酸化血管生成素受體2抗體 規(guī)格 0.1ml | ALP ELISA Kit 大鼠堿性0酸酶 96T |
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) | CL-0280HEL(人紅白細胞白血病細胞)5×106cells/瓶×2 |
L1細胞，卵巢癌細胞 急性T細胞白血病細胞),Jurkat細胞 人皮膚黑色素瘤細胞;SK-MEL-1 | 6T-CEM (人T細胞白血病細胞) 5×106cells/瓶×2 |
CL-0262BE(2)-M17(人母細胞瘤細胞)5×106cells/瓶×2 | 786-O(人腎透明細胞癌細胞) 5×106cells/瓶×2 |
大鼠胎兒表皮角質(zhì)形成層細胞培養(yǎng)基 100mL | 多聚賴 1 mg/mlPLL |
HCC細胞，子宮高分化鱗癌細胞 人T淋巴瘤細胞Jurkat亞系,Jurkat77細胞 人癌細胞;MDA-MB-157 | 人肺小動脈平滑肌原代細胞TRAb(Mouse thyroid stimulating hormone receptor antiy)ELISA Kit 小鼠抗促甲狀腺素受體抗體 96T |
CM-M119小鼠晶狀體上皮細胞培養(yǎng)基100mL | IL7R Others Human 人 IL7Rα / CD127 人細胞裂解液 (陽性對照) |
HA Others H1N1 甲型流感 H1N1 (A/Ohio/07/2009) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) | CM-H020人胰島β細胞培養(yǎng)基100mL |
EFNB1 Protein Human 重組人 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 (His & Fc 標簽) | Rhesus antibody Rh APP/ABPP 淀粉樣肽前體蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml |
BRD7： 鼻咽癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml | 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化);PC-12(低分化) |
Anti-TRAF2/TNF-R2 /FITC 熒光素標記壞死因子受體相關(guān)因子2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | Protein A： 重組葡萄球菌蛋白A抗體 0.1ml |
Anti-Syndecan-1/CD138/FITC 熒光素標記多配體聚糖抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml | IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Ierferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽) |
1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；
1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
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