大鼠滋養層干原代細胞

大鼠滋養層干細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯合長成的母子間交換物質的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發育，依靠胎盤從母體取得營養，而雙方保持相當的獨立性。胎盤還產生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合，以達到母子間物質的交換，這樣的結構稱假胎盤。滋養層干細胞是胎盤組織細胞的祖細胞，與胚胎著床和胎盤的形成密切相關。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯系的關鍵時期，此時期滋養層細胞增殖速度快，滋養層干細胞自我更新和分化旺盛，與多種妊娠相關疾病的發生、發展及其增殖、功能調節的失常有密切關系。在哺乳動物胚胎發育過程中，胚胎細胞第一次分化形成內細胞團和滋養外胚層。滋養層干細胞是胎盤細胞的前體細胞，在胎盤發育中有重要作用。

產品名稱：大鼠滋養層干細胞

組織來源：胎盤組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠滋養層干采用囊胚組織貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠滋養層干經HLA-E（白細胞抗原）免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠雄激素受體(AR)試劑盒 ，英文名： AR ELISA Kit

Mouse heat shock protein 20 (Hsp-20) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)試劑盒

MouseTissuefactor,IFELISAKit 小鼠組織因子(TF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanai-typhusaibodyELISAKit人抗斑疹傷寒抗體

細胞ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitMCP-1/CCL2/MCAF大鼠單核細胞趨化蛋白1

小鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human growth hormone releasing factor (GH-RF) ELISA Kit 人生長激素釋放因子(GH-RF)試劑盒

Humahymopein,TP-5ELISAKit 人五肽(TP-5)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-rubellavirusIgGaibody,ai-RVIgG試劑盒人抗風疹病毒IgG抗體(ai-RVIgG)試劑盒規格：96T/48T

植物細胞周期G1期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次

Humaubularbasememembraneaibogy,TBMELISAKit人抗腎小管基底膜抗體(TBM)試劑盒規格：96T/48T

小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠干擾素誘導蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠上皮粒細胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISAKit   ELISA. 

NTRK3重組人 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein

性別決定區Y框蛋白2(SOX2)重組蛋白 Recombinant Sex Determining Region Y Box Protein 2 (SOX2)

ICAM5重組人 ICAM 5 / Intercellular adhesion molecule 5 蛋白 (ECD, His 標簽) Protein

CD5 Protein Human 重組人 CD5 蛋白

Spike Protein SARS 重組SARS Spike 蛋白 (Receptor Binding Domain, Fc 標簽)

Gibco E071000 MesenPRO RS? Medium 含2%血清(New Zealand origin) 1 kit  LTEP-a-2(人肺腺癌細胞)     FOLR2 Others Human 人 FOLR2 / FBP 人細胞裂解液   人胚皮膚成纖維細胞;CCC-ESF-1  NCI-H716 小鼠原代睪丸支持細胞 大鼠原代睪丸支持細胞

大鼠滋養層干原代細胞HDAC1/HD1(histone deacetylase 1 0.5mgHDAC1/HD1(histone deacetylase 1) 組織蛋白去乙酰化酶1抗原

EPHA2 Protein Human 重組人 EphA2 蛋白 (aa 585-976, His & GST 標簽)

LCN2重組大鼠 LCN2 / NGAL 蛋白 Protein

CD79B Protein Mouse 重組小鼠 CD79B / B29 蛋白

DSC2重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。