大鼠支氣管上皮原代細胞

大鼠支氣管上皮細胞分離自支氣管組織；支氣管（Bronchi），是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經氣管墮入的異物多進入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環境接觸的第一道防線，不僅是各種病原體、炎癥介質作用的靶細胞，還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質和細胞因子，從而參與氣道炎癥及免疫反應。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發病機制中均起著重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態結構和功能活動上存在很大的相似性，因此，在基礎及臨床研究中極為重要。

產品名稱：大鼠支氣管上皮細胞

組織來源：支氣管組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮采用蛋白酶-蛋白酶混合消化法結合機械刮刷并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠支氣管上皮經PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

大鼠血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)試劑盒 ，英文名： ANGPTL1 ELISA Kit

Mouse prostaglandin F (PGF) ELISA Kit 小鼠前列腺素F(PGF)試劑盒

MouseStemCellFactorReceptor,SCFRELISAkit 小鼠干細胞因子受體(SCFR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanBeta-Thromboglobulin,Beta-TGELISAKit人β血小板球蛋白/β血栓環蛋白

細胞DNA損傷彗星熒光試劑盒20次

ELISAKitAZT大鼠

小鼠核因子kb(NF-kb)試劑盒 96T/48T

Rat ovalbumin specific IgE (OVA sIgE) ELISA Kit 大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)試劑盒

humanAi-ThyroidMicrosomeAibody,ATMA/TMABELISAKIT 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanAi-OvaryAibody,AOAb試劑盒人抗卵巢抗體(AOAb)試劑盒規格：96T/48T

植物高效液相色譜法定量試劑盒20次

Humayrosinekinase2,Tyk-2ELISAKit人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒規格：96T/48T

小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒   96T/48T

小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒   96T/48T

小鼠抗受體(A)試劑盒   96T/48T

小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)試劑盒   96T/48T

ERAP2重組人 LRAP / ERAP2 蛋白 Protein

血紅素氧合酶1(HO1)重組蛋白 Recombinant Heme Oxygenase 1, Decycling (HO1)

HA重組甲型流感 H5N1 (A/Vietnam/1194/2004) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

CD7 Protein Human 重組人 CD7 蛋白

GP120 Protein HIV 重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp120 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC)

GBC-SD(人膽囊癌細胞)   SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-7  小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3  Hela/DDP細胞，Hela細胞耐藥亞株 人急性T淋巴母細胞白血病細胞,MOLT-4細胞 小鼠肺腺癌低轉移細胞(VAP33- 小鼠原代骨髓單核細胞 人原代口腔黏膜上皮細胞

大鼠支氣管上皮原代細胞Bursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽 100mgBursin 囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽

CTNNB1 Protein Human 重組人 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標簽)

CD36重組小鼠 CD36 / SCARB3 蛋白 Protein

NTRK1 Protein Rat 重組大鼠 TrkA / NTRK1 蛋白 (Fc 標簽)

CCL15重組人 CCL15 / MIP-5 / MIP-1 delta 蛋白 (aa 46-113, His 標簽) Protein