大鼠陰道平滑肌原代細胞

大鼠陰道平滑肌細胞分離自陰道組織；陰道位于膀胱、尿道和直腸之間，是一個富有彈性的管狀器官。它在人類生殖過程中具有多種生理功能，是連接子宮與外陰的通道，是排出月經血、娩出嬰兒的必經之路，也是一個重要的性交器官。陰道壁按組織學由外到內分三層，即黏膜層、肌層和外膜。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。陰道平滑肌分離自陰道壁肌層組織，平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

產品名稱：大鼠陰道平滑肌細胞

組織來源：陰道組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態佳

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠陰道平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠陰道平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

大鼠血小板反應蛋白解整合素金屬肽酶1(ADAMTS1)試劑盒 ，英文名： ADAMTS1 ELISA Kit

Mouse embryonic stem cell line MESPU30 (M30) ELISA Kit 小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)試劑盒

MouseVascularEndothelialcellGrowthFactorC,VEGF-CELISAkit 小鼠血管內皮細胞生長因子C(VEGF-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforHumanc-junELISAKit人c-jun

細胞CDK7/CYCLINH激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitCAMK2大鼠鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶2

小鼠腦腸肽(BGP/Gehrelin)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat basic fibroblast growth factor (bFGF) ELISA Kit 大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)試劑盒

HumaeplicationproteinA,RPA-70ELISAKit 人復制蛋白A(RPA-70)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human5-Nucleotidase,5-試劑盒人5核苷酸酶(5-)試劑盒規格：96T/48T

真菌天青曙紅(Azure-eosinate)染色試劑盒50次

Mouseai-oligodendrocyte-myelinglycoproteinaibody,OMgp-AbELISAKit小鼠少突膠質細胞髓鞘糖蛋白抗體(OMgp-Ab)試劑盒規格：96T/48T

豚鼠P物質   英文名稱：   Guinea pig Substance P   規格：      英文縮寫：   SP

豚鼠睪激素   英文名稱：   Guinea pig Testosterone   規格：      英文縮寫：   TESTO

豚鼠免疫球蛋白E   英文名稱：   Immunoglobulin E   規格：      英文縮寫：   IgE

豚鼠粘多糖   英文名稱：   Mucopolysaccharide   規格：      英文縮寫：   MLC

SELL重組食蟹猴 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein

MBP (Myelin Basic Protein, Rat 0.5mgMBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide 髓鞘堿性蛋白(多肽)大鼠

IFNL1重組人 IL-29 / Interleukin-29 蛋白 Protein

ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977)

APOA1 Protein Mouse 重組小鼠 ApoA1 蛋白

FGF18 Protein Human 重組人 FGF18 / FGF-18 蛋白 (His 標簽)  倉鼠卵巢細胞;Lec1 高轉移卵巢癌細胞，HO-8910PM細胞 SCF細胞，白鰱尾鰭細胞  人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C  CNE1細胞，人鼻咽癌細胞(高分化) 小鼠原代鼓膜上皮干細胞 兔原代下丘腦元細胞

大鼠陰道平滑肌原代細胞NF2/merlin(neurofibromatosis type 2 0.5mgNF2/merlin(neurofibromatosis type 2) 2型纖維瘤抗原

GADD45G Protein Human 重組人 GADD45G / CR6 蛋白

LGMN重組野豬 Legumain / LGMN / AEP 蛋白 Protein

CCNE1 Protein Mouse 重組小鼠 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白 (His & GST 標簽)

TNFRSF8重組人 CD30 / TNFRSF8 蛋白 Protein

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。