大鼠胰腺上皮原代細胞

大鼠胰腺上皮細胞分離自胰腺組織；胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成，腺泡分泌胰液，腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過胰腺管排入十二指腸，有消化蛋白質、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成，胰島主要由4種細胞組成：α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素，升高血糖；β細胞分泌胰島素，降低血糖；γ細胞分泌，以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌；PP細胞分泌胰多肽，抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發育上被認為分離自內胚層胰腺上皮，在隨后的胰腺發育過程中，胰腺干細胞分化為胰島細胞（α、β、δ、PP細胞）、導管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質來源的細胞，包括成纖維細胞、血管內皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞，其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質來源的細胞，尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等，胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發生具有重大意義。

產品名稱：大鼠胰腺上皮細胞

組織來源：胰腺組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠胰腺上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

大鼠血小板因子4(PF4)試劑盒 ，英文名： PF4 ELISA Kit

Mouse coagulation factor VIII related aigen (F VIII -Ag) ELISA Kit 小鼠Ⅷ相關抗原(FⅧ-Ag)試劑盒

Mousebasicfibroblastgrowthfactor9,bFGF-9ELISAKit 小鼠堿性成纖維細胞生長因子9(bFGF-9)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforHumanCollagenaseIELISAKit人膠原酶I

細胞CDK2/CYCLINE激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitHGF大鼠肝細胞生長因子

小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat prostaglandin E1 (PGE1) ELISA Kit 大鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒

Humancirculatingimmunecomplex,CICELISAKit 人循環免疫復合物(CIC)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanbeta-siteAPP-cleavingenzyme2,BACE2試劑盒人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)試劑盒規格：96T/48T

植物總RNA化試劑盒(高多糖/酚)20次

HumanSurfactaProteinA，SP-AELISAKit人表面活性蛋白A(SP-A)試劑盒規格：96T/48T

兔子脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子組織因子(TF)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子骨膠原交聯(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子組織多肽抗原(TPA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

DDR1重組小鼠 DDR1 Kinase / MCK10 / CD167 蛋白 Protein

C-型凝集素域家族11成員A(CLEC11A)重組蛋白 Recombinant C-Type Lectin Domain Family 11, Member A (CLEC11A)

BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 Protein

FABP1 Protein Human 重組人 L-FABP / FABP1 蛋白

FCGR3A Protein Rat 重組大鼠 CD16a / FCGR3A 蛋白

FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 人細胞裂解液   AML-12小鼠正常肝細胞 Normal liver cells of AML-12 mice DMEM+10%FBS  CHIT1 Others Human 人 CHIT1 / Chitinase-1 人細胞裂解液 小鼠原代海馬元細胞 小鼠原代內皮祖細胞

大鼠胰腺上皮原代細胞天冬轉氨酶(AST)重組蛋白 Recombinant Aspartate Aminotransferase (AST)

CPM Protein Human 重組人 Carboxypeptidase M / CPM 蛋白

MCAM重組人 CD146 / MCAM 蛋白 (Fc 標簽) Protein

HA Protein H5N2 重組甲型流感 H5N2 (A/American green-winged teal/California/HKWF609/07) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

PEBP1重組人 PEBP1 / Phosphatidylethanolamine binding protein 1 蛋白 Protein