大鼠腸道干原代細胞

大鼠腸道干細胞分離自腸道組織；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長的一段，也是功能最重要的一段。哺乳動物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產物的吸收都是在小腸內進行的，大腸主要濃縮食物殘渣，形成糞便，再通過直腸經排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物，以提供足夠的養分，其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態系統。腸道干細胞（ISC）也稱腸道上皮干細胞，主要位于腸黏膜隱窩內，其與腸道黏膜上皮的更新和修復密切相關。正常情況下，位于隱窩基底部的腸道干細胞不斷向隱窩頂部（腸腔方向）遷移，整個遷移過程大約3-5d，在遷移過程中腸道干細胞分化形成不同的腸黏膜細胞。當受到外界生理或病理信號作用時，ISC可持續增殖、分化為成熟腸上皮細胞，如腸型細胞、杯狀細胞、內分泌細胞和潘氏細胞等，從而維持腸道黏膜結構和功能的穩定性。

產品名稱：大鼠腸道干細胞

組織來源：腸組織

產品規格：5×10?Cells/T25培養瓶

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 懸浮

細胞形態 球形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠腸道干采用-膠原酶聯合消化后，用腸道干細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠腸道干經MSI-1免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養箱繼續消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養基重懸后加入培養瓶或皿中，T25培養瓶加6-8ml培養基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養基吹勻，將細胞懸液加入培養瓶中，補加適量培養基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

1）復蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培 養過夜（或將 細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養基，培養過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于 37℃培 養箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養 瓶后加少量培養基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數。

小鼠血栓調節蛋白(TM)ELISA 試劑盒

Human tyrosine kinase 2 (Tyk-2) ELISA Kit 人酪激酶2(Tyk-2)試劑盒

Humanβ-galactosidase,βGALELISAKit 人β半乳糖苷酶(βGAL)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitfor(DC-SIGN/CD209)ELISAKit大鼠樹突狀細胞表面特異性C型凝集素-細胞間黏附分子3結合非整合素分子

熒光定量分析20樣本

MouseIerleukin1α,IL-1αELISAKit小鼠白介素1α(IL-1α)試劑盒規格：96T/48T

小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角質素(KS)試劑盒

Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA試劑盒雞分泌型免疫球蛋白A(SIgA)試劑盒規格：96T/48T

載玻片細胞PARP蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次

MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纖連蛋白(FN)試劑盒規格：96T/48T

魚類狀腺原酸(T3)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類(Coisol)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類甲狀腺素(T4)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類超敏C反應蛋白(hs-CRP)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

IL18R1重組小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一種原癌基因)抗原

CSF2重組人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

IL36B Protein Human 重組人 IL36B / IL1F8 蛋白

FSTL3 Protein Mouse 重組小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

6T-CEM人T細胞白血病細胞 The 6T-CEM of human T cell leukemia cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS  Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經瘤細胞)  中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 豬原代心肌成纖維細胞 大鼠原代角質形成細胞

大鼠腸道干原代細胞ER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原 0.5mgER-Alpha peptide 雌激素受體(多肽抗原)

ADAM15 Protein Human 重組人 ADAM15 蛋白 (His 標簽)

CD164重組大鼠 CD164 / Endolyn 蛋白  Protein

ADIPOQ Protein Mouse 重組小鼠 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (His 標簽)

PRSS27重組人 Pancreasin / Marapsin / PRSS27 蛋白 (His 標簽) Protein