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1.背景

苯并（a）芘（benzo（a）pyrene，BaP），又名3,4-苯并芘，結構式如下圖1所示，屬于多環芳烴中的一種。苯并（a）芘是強致癌物，被世衛組織定為1類致癌物。

食品中的苯并（a）芘來源比較復雜，主要有熏烤、高溫油炸、包裝材料污染和食品加工過程污染等。食用油中的苯并（a）芘主要來源有原材料帶入和加工過程產生。原材料帶入主要包含原材料種植區受到工業污染，在柏油馬路上晾曬油料作物，以及長途運輸過程環境污染物浸入和包裝容器遷移等。加工過程產生主要包含油料高溫烘烤等工藝處理過程和浸出工藝中溶劑殘留等。

將實施的《GB 2762-2022 食品安全國家標準 食品中污染物限。量》中規定，食用油中苯并（a）芘限。量為10 µg/kg。 本實驗參考《GB 5009.27-2016食品安全國家標準 食品中苯并(a)芘的測定》，采用青島盛瀚的高效液相色譜L-3000系列，對食用油中苯并（a）芘的液相色譜測定法進行方法驗證。

2.  儀器和設備

表1 食品中苯并（a）芘的檢測所需液相色譜儀器配置

圖2 盛瀚L-3000液相色譜儀

表2 食品中苯并（a）芘的檢測所需前處理設備

3. 實驗方法

3.1試劑和材料

除非另有說明，所用試劑均為優級純。

乙腈、甲醇、正己烷：色譜純。

水：超純水（18.2 MΩ•cm）。

凈化柱：中性氧化鋁柱22g/60mL

3.2標準溶液

苯并（a）芘標準儲備液（100 mg/L）：自購100 mg/L苯并（a）芘乙腈標準溶液。

苯并（a）芘標準中間液（1.0 mg/L）：吸取0.1 mL苯并（a）芘標準儲備液（100 mg/L）于10 mL容量瓶，乙腈定容混勻備用。

苯并（a）芘標準工作液：把苯并（a）芘標準中間液（1.0 mg/L）用乙腈稀釋得到0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL標準曲線，現用現配。

3.3樣品的制備

提取：稱取0.4 g（A：0.4032 g，B：0.4014 g），加入5 mL正己烷，渦旋30 s，待過柱。

凈化：中性氧化鋁柱用30 mL正己烷活化，棄去不要。然后加入提取液，并用茄形瓶收集，再用50 mL正己烷洗脫，繼續收集凈化液。

濃縮：將凈化液40℃旋蒸至1-2 mL，轉移至離心管，用正己烷洗滌茄形瓶2次，洗滌液同樣轉移至離心管，40℃氮吹近干，0.4 mL乙腈渦旋復溶，過0.45 μm濾膜，上機檢測。

4. 色譜條件

流動相：水：乙腈=12：88；

流速：1.0 mL/min；

色譜柱：Shinesil-C18 4.6×250，5μm；

柱溫：35℃；

檢測波長：激發波長384 nm，發射波長406 nm；

進樣量：20 μL。

5. 實驗結果

5.1典型譜圖

圖3  1.0 ng/mL苯并（a）芘標準溶液

5.2校準曲線

0.5 ng/mL、1.0 ng/mL、5.0 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL的苯并（a）芘標準工作液線性方程：Y=216.17653X-5.92576。相關因子：R=0.9999934。

圖4 苯并（a）芘標準曲線

5.3重復性測試

苯并（a）芘標準溶液（1 ng/mL）系統適應性測試（SST）結果如下圖，保留時間RSD=0.08%，峰面積RSD=0.95%。

圖5 苯并（a）芘標準溶液（1 ng/mL）系統適應性測試（SST）結果

5.4實際樣品測定

花生油樣品苯并（a）芘測試色譜圖及上機檢測結果如下所示。

表3 食品中苯并芘的檢測所需前處理設備

圖6 實際樣品苯并（a）芘測試譜圖

平行樣品的絕對差值為0.022 μg/kg，與平行樣品算數平均值的比值為2.74%，小于20%，符合《GB 5009.27-2016食品安全國家標準 食品中苯并（a）芘的測定》的要求。

6. 結論

上述實驗結果表明，采用盛瀚L-3000高效液相色譜儀，苯并（a）芘標準溶液濃度范圍在0.5 ng/mL~20.0 ng/mL內，具有很好的線性，線性相關系數為0.9999934，定性定量重復性良好，可滿足《GB 5009.27-2016食品安全國家標準 食品中苯并（a）芘的測定》要求。