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P74527 pU6-Hivep1(mouse)-shRNA1-EGFP-Neo

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
  • 公司名稱 上海禾午生物科技有限公司
  • 品牌 禾午生物
  • 型號(hào) P74527
  • 產(chǎn)地 上海
  • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間 2025/7/17 8:48:15
  • 訪問次數(shù) 18

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專注細(xì)胞,載體質(zhì)粒,耐藥株,慢病毒(過表達(dá),干擾)包裝、穩(wěn)轉(zhuǎn)株構(gòu)建,基因敲除、敲入等實(shí)驗(yàn)服務(wù) 

載體 細(xì)胞 載體構(gòu)建 穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株 病毒包裝

供貨周期 兩周 規(guī)格
貨號(hào) P74527 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè),制藥/生物制藥
主要用途 僅供科研

名稱pU6-Hivep1(mouse)-shRNA1-EGFP-Neo
別稱GCGTAGTGAAACCTTATCAAA
質(zhì)粒宿主哺乳細(xì)胞
質(zhì)粒用途干擾沉默
片段類型shRNA
片段物種小鼠
原核抗性Kan
篩選標(biāo)記Neo/G418
熒光標(biāo)記綠色
啟動(dòng)子U6
復(fù)制子pUC
感受態(tài)DH5a
溫度37度
背景載體pU6-MCS-shRNA-EGFP-Neo
正向引物U6-F

 


注意事項(xiàng):轉(zhuǎn)化前請準(zhǔn)確查找該質(zhì)粒相應(yīng)的抗生素名稱、抗生素使用濃度、感受態(tài)名稱和培養(yǎng)溫度。


1
、收到質(zhì)粒干粉后請先5000rpm離心1min,再加入20μl~50μl無菌水或 pH8.0  1*TE緩沖液來溶解質(zhì)粒,室溫放置1min

2
、從-80冰箱中取出相應(yīng)的感受態(tài),置于冰盒上解凍,并做好標(biāo)記;

3
、取2μl質(zhì)粒加至100μl感受態(tài)中,冰浴30min

4
42熱激90s,再冰浴2min

5
、加入900μl無抗的LB液體培養(yǎng)基,180rpm震蕩培養(yǎng)45min

6
6000rpm離心5min,僅留100ul上清混勻菌體沉淀;

7
、混勻后的菌液加至對應(yīng)抗性的LB平板上,倒入適量玻璃珠,涂勻液體;

8
、將平板正向培養(yǎng)1h,再倒置培養(yǎng)12h~16h

9
、挑取單克隆菌落至對應(yīng)抗性的LB液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)12h~16h,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要提取質(zhì)粒




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