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雙向凝膠電泳檢測技術服務詳情介紹
雙向凝膠電泳是一種經典的dànbáizhì分離技術,它在dànbáizhì組學研究中具有bùkětìdài的地位。它通過兩種正交的分離機制——等電聚焦(Isoelectric Focusing, IEF)和SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳)——在二維平面上分離蛋白,使得復雜樣本中的上千種蛋白可以被清晰解析。自20世紀70年代發展至今,它憑借高分辨率和直觀的dànbáizhì表達模式分析,仍然是dànbáizhì組學研究中bùkěhuòquē的核心技術之一。在生命科學研究中,雙向凝膠電泳被廣泛應用于疾病生物標志物篩選、藥物靶點發現、環境毒理學和食品科學等多個領域。例如,在癌癥研究中,雙向凝膠電泳已被用于解析乳腺癌、胃癌、肝癌等多種癌癥的蛋白組變化,為早期診斷和jīngzhǔn治療提供了新的思路。在神經退行性疾病如阿爾茨海默病的研究中,雙向凝膠電泳可用于探索神經元凋亡、突觸蛋白異常等關鍵分子事件。此外,在環境科學中,該技術被用于研究環境污染物(如重金屬、農藥等)對生物體蛋白表達的影響,從而評估污染對生態系統的潛在危害。在食品科學和農業研究方面,該技術可用于研究食品加工過程中的dànbáizhì變化,如奶制品發酵、谷物加工等,幫助優化食品品質;同時它還可用于研究植物在不同環境條件下的dànbáizhì表達模式,以揭示作物的抗逆機制,為農業育種和農作物改良提供科學依據。
雙向凝膠電泳的原理基于兩步分離。dìyī向分離是等電聚焦(IEF),dànbáizhì樣本在帶有pH梯度的凝膠條帶(IPG條)中遷移,直至達到其等電點(pI,即蛋白的凈電荷為零的pH值)而停止運動。不同等電點的蛋白因此可以在IPG條帶上形成獨立的聚焦條帶。完成IEF后,IPG條帶會被放入SDS-PAGE凝膠中進行第二向分離,即根據dànbáizhì的分子量進行區分。由于SDS是一種強陰離子去污劑,它可以使所有dànbáizhì獲得相同的電荷密度,確保dànbáizhì僅按照分子量大小進行遷移和分離。zuì終,經過染色處理(如考馬斯亮藍染色、銀染或熒光染色),dànbáizhì會在凝膠上形成一個個獨立的蛋白斑點(spots),研究人員可以直觀地觀察蛋白表達變化,并進一步結合質譜技術進行蛋白鑒定。
雙向凝膠電泳的優勢在于其高分辨率和可視化能力,使研究人員能夠清晰地看到dànbáizhì表達的全局變化,尤其適用于比較不同實驗條件下的dànbáizhì差異表達。此外,該技術相較于某些gāoduāndànbáizhì組學分析方法而言成本較低,因此仍然是許多實驗室開展dànbáizhì組學研究的shǒuxuǎn。但是雙向凝膠電泳也存在一些局限性,例如它對高分子量蛋白(>150 kDa)和低分子量蛋白(<10 kDa)的分離能力較弱,同時對于疏水性較強的膜蛋白,往往由于溶解度問題而難以有效檢測。此外,該技術的動態范圍相對較窄,對于極低豐度的蛋白檢測靈敏度不足,可能會導致部分關鍵調控蛋白被忽略。盡管如此,隨著凝膠電泳技術的不斷優化,結合更先進的質譜分析和生物信息學工具,這項技術仍然具有研究價值。
百泰派克生物科技憑借多年的dànbáizhì組學研究經驗,為廣大科研人員提供高質量的雙向凝膠電泳服務。我們優化了樣本制備、凝膠分離、蛋白染色及數據分析流程,確保實驗數據的高重復性和可靠性。
百泰派克生物科技特色項目
一、蛋白測序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上先進的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、dànbáizhì組學
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
三、單細胞質譜流式技術分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術先進,填補技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技七大檢測平臺
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!