c端氨基酸測(cè)序檢測(cè)技術(shù)服務(wù)詳情介紹

C端氨基酸測(cè)序是確定dànbáizhì或多肽鏈 C 末端氨基酸順序的分析技術(shù)，主要用于確定dànbáizhì分子鏈末端的氨基酸順序。在dànbáizhì結(jié)構(gòu)中，C端（羧基末端）是指dànbáizhì多肽鏈中含有游離羧基的末端。了解C端氨基酸的序列信息對(duì)于研究dànbáizhì的功能、活性、穩(wěn)定性等方面具有意義。C 端氨基酸測(cè)序在新藥研發(fā)里，用于剖析重組蛋白藥物的 C 端完整性；在基礎(chǔ)科研中，輔助解析蛋白折疊起始位點(diǎn)，眾多領(lǐng)域都離不開它jīngzhǔn的分析結(jié)果。在生物制藥領(lǐng)域，C端氨基酸測(cè)序能夠幫助科學(xué)家們了解藥物蛋白的結(jié)構(gòu)完整性和突變情況，這對(duì)于保證藥物的安全性和有效性至關(guān)重要。在疾病診斷中，C端氨基酸測(cè)序可以用于鑒定與特定疾病相關(guān)的dànbáizhì標(biāo)記物，更jīngquè地指導(dǎo)疾病的檢測(cè)和治療。此外，C端氨基酸測(cè)序在基礎(chǔ)生命科學(xué)研究中也是bùkěhuòquē的。通過揭示dànbáizhì序列信息，研究人員可以更深入地了解dànbáizhì的功能機(jī)制以及它們?cè)诩?xì)胞內(nèi)的作用。

C端氨基酸測(cè)序方法及原理解析

1、傳統(tǒng)化學(xué)法

以羧肽酶法為典型，羧肽酶是一類可從肽鏈 C 端逐一水解氨基酸的酶。不同的羧肽酶，像羧肽酶 A、B 等 ，各有偏好的氨基酸水解類型。把dànbáizhì樣本與羧肽酶一同孵育，按既定時(shí)間間隔取樣，用色譜或電泳手段分離鑒定釋放出的氨基酸，依照氨基酸出現(xiàn)先后順序，推導(dǎo) C 端序列。

（1）優(yōu)勢(shì)：操作相對(duì)簡(jiǎn)便，無(wú)需繁雜儀器，成本較為低廉；還能動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)氨基酸釋放過程，獲取酶解動(dòng)力學(xué)信息。

（2）局限：難以確定多個(gè)連續(xù)相同氨基酸的排列，一旦遇上這類情況，釋放的氨基酸無(wú)法jīngzhǔn對(duì)應(yīng)鏈上的位置；而且酶解速度不好掌控，太快易丟失中間數(shù)據(jù)，太慢則耗時(shí)漫長(zhǎng)。

2、現(xiàn)代質(zhì)譜法

常采用液相色譜 - 串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS ）技術(shù)。先是蛋白樣品經(jīng)酶切生成肽段，經(jīng)液相色譜依疏水性、電荷等特性分離，再進(jìn)入質(zhì)譜儀。在質(zhì)譜里，肽段離子化后先測(cè)分子量，接著特定肽段選作母離子，經(jīng)碰撞誘導(dǎo)解離產(chǎn)生碎片，從碎片離子質(zhì)量差值推算氨基酸序列，聚焦于 C 端肽段就能解析 C 端序列。

（1）優(yōu)勢(shì)：靈敏度超高，微量樣品也能分析，對(duì)珍貴稀少的蛋白樣本極為友好；分辨率出色，能清晰區(qū)分結(jié)構(gòu)相似的氨基酸；并且可同步獲取修飾信息，察覺 C 端的糖基化、磷酸化修飾。

（2）局限：儀器價(jià)格高昂，運(yùn)維成本高，需要zhuānyè操作人員；數(shù)據(jù)解析復(fù)雜，要借助專門軟件與數(shù)據(jù)庫(kù)匹配，新手入門有難度。

3、Edman 降解衍生法

Edman 試劑（異硫氰酸苯酯 ）和蛋白 C 端氨基酸反應(yīng)，生成的衍生物經(jīng)裂解、轉(zhuǎn)化步驟，產(chǎn)生穩(wěn)定的 PTH - 氨基酸，可通過高效液相色譜鑒定。每輪反應(yīng)僅讓 C 端shǒugè氨基酸脫落，循環(huán)操作，就能逐個(gè)測(cè)定氨基酸。

（1）優(yōu)勢(shì)：測(cè)序結(jié)果jīngzhǔn，一次反應(yīng)只切下一個(gè)氨基酸，定位清晰；能與自動(dòng)化測(cè)序儀聯(lián)用，實(shí)現(xiàn)高通量測(cè)序。

（2）局限：遇上修飾氨基酸，反應(yīng)會(huì)受干擾，無(wú)法正常測(cè)序；隨著肽鏈增長(zhǎng)，后續(xù)循環(huán)的測(cè)序效率與準(zhǔn)確性會(huì)降低。

不同的dànbáizhì由于其結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性和多樣性，可能具有不同的C端修飾和變體，這給C端氨基酸測(cè)序帶來了挑戰(zhàn)。為此，科學(xué)家們不斷優(yōu)化測(cè)序技術(shù)，提高其準(zhǔn)確性和效率。例如，通過引入新的化學(xué)試劑和改進(jìn)酶切技術(shù)，研究人員能夠更有效地識(shí)別和分析dànbáizhì的C端序列。在實(shí)際應(yīng)用中，C端氨基酸測(cè)序常常與其他dànbáizhì分析技術(shù)結(jié)合使用，如N端氨基酸測(cè)序、全dànbáizhì質(zhì)譜分析等，以提供更全面的dànbáizhì結(jié)構(gòu)信息。這種組合技術(shù)的應(yīng)用，為復(fù)雜dànbáizhì的研究提供了強(qiáng)有力的工具。百泰派克生物科技在C端氨基酸測(cè)序領(lǐng)域積累了豐富的經(jīng)驗(yàn)。我們擁有一支由zhuānyè研究人員和技術(shù)專家組成的團(tuán)隊(duì)，致力于為客戶提供高質(zhì)量的C端序列分析服務(wù)。我們的服務(wù)涵蓋從樣品制備、測(cè)序分析到數(shù)據(jù)解析的全過程，確保為客戶提供準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。通過與我們合作，客戶可以獲得定制化的解決方案，以滿足其特定的研究需求。

百泰派克生物科技特色項(xiàng)目

一、蛋白測(cè)序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質(zhì)譜儀及島津公司埃德曼降解測(cè)序系統(tǒng)對(duì)dànbáizhì序列進(jìn)行分析，提供基于質(zhì)譜的蛋白測(cè)序分析服務(wù)，包括對(duì)dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務(wù)。對(duì)于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測(cè)序法的dànbáizhì從頭測(cè)序服務(wù)，對(duì)蛋白序列進(jìn)行分析。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.采用目前世界上*的質(zhì)譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測(cè)定蛋白N端多達(dá) 70個(gè)氨基酸序列;

4.可測(cè)定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測(cè);

6.測(cè)序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學(xué)

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質(zhì)譜平臺(tái)結(jié)合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學(xué)、靶向dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、翻譯后修飾蛋白組學(xué)等多種dànbáizhì組學(xué)分析服務(wù)。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學(xué)服務(wù)，助力微量樣本蛋白組學(xué)、大樣本群醫(yī)學(xué)及高通量修飾組學(xué)等研究工作。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1 .高通量定量蛋白分析:多對(duì)照組大規(guī)模實(shí)驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)新的生物標(biāo)記物;

2.體內(nèi)體外多種dànbáizhì標(biāo)記方法，適用于分析組織、細(xì)胞、血液等多種樣品;

3.質(zhì)譜分析靈敏度高，實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)度高;

4.可檢測(cè)較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學(xué)分析，分析更系統(tǒng)準(zhǔn)確。

三、單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質(zhì)譜流式系統(tǒng)進(jìn)行單細(xì)胞質(zhì)譜流式技術(shù)分析，采用金屬元素標(biāo)記物（通常是金屬元素標(biāo)記的特異抗體）標(biāo)記細(xì)胞表面和內(nèi)部的分子，然后用流式細(xì)胞原理分離單個(gè)細(xì)胞，再用電感耦合等離子體質(zhì)譜（ICP-MS）分析單個(gè)細(xì)胞的原子質(zhì)量譜，zuì后將原子質(zhì)量譜數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換為細(xì)胞表面和內(nèi)部的信號(hào)分子表達(dá)量。

※服務(wù)優(yōu)勢(shì)：

1.技術(shù)*，*技術(shù)空白

采用金屬標(biāo)記抗體技術(shù)，避免了傳統(tǒng)流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細(xì)胞層面上對(duì)多種指標(biāo)同時(shí)進(jìn)行表征，百泰派克生物科技可做到同時(shí)檢測(cè)51個(gè)目標(biāo)蛋白。

2.分析數(shù)量大，成本較低

單細(xì)胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細(xì)胞匯總的分析數(shù)目一般在2x10^4個(gè)左右，而流式質(zhì)譜技術(shù)一次（單樣本）就可分析至少10^5的細(xì)胞，實(shí)現(xiàn)了數(shù)量級(jí)的提高，且成本不高于單細(xì)胞RNAseq。

3.應(yīng)用前景大

①流式質(zhì)譜結(jié)果可以給出細(xì)胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機(jī)制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標(biāo)簽技術(shù)與其他技術(shù)結(jié)合會(huì)有新應(yīng)用方向。除常規(guī)蛋白外，質(zhì)譜流式細(xì)胞技術(shù)還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測(cè)細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小、mRNA轉(zhuǎn)錄子表達(dá)量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)

百泰派克生物科技的基于高精度質(zhì)譜的免疫多肽組學(xué)分析及新抗原發(fā)現(xiàn)一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實(shí)現(xiàn)10,000個(gè)以上I型多肽和10,000個(gè)以上II型多肽的鑒定和識(shí)別。通過我們優(yōu)化的高通量免疫多肽組學(xué)分析平臺(tái)進(jìn)行免疫肽組學(xué)分析，可從zuì小的樣品材料中進(jìn)行可重復(fù)的識(shí)別和定量。該服務(wù)可以應(yīng)用于大規(guī)模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標(biāo)。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質(zhì)譜技術(shù)，MALDI TOF，高效色譜分離技術(shù)，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級(jí)結(jié)構(gòu)分析，到產(chǎn)品變異性和純度分析。旨在提供優(yōu)質(zhì)生物藥物分析服務(wù)，幫助生物醫(yī)藥生產(chǎn)商提高生物藥物品質(zhì)。

百泰派克生物科技七大檢測(cè)平臺(tái)

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質(zhì)譜多組學(xué)優(yōu)質(zhì)服務(wù)商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫(yī)療器械行業(yè)提供質(zhì)量控制檢測(cè)和項(xiàng)目驗(yàn)證等zhuānyè服務(wù)。公司實(shí)驗(yàn)室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規(guī)和指導(dǎo)原則，通過CNAS/ISO9001雙重質(zhì)量體系認(rèn)證，建立了完備的質(zhì)量體系，數(shù)據(jù)冷熱/異地備份，設(shè)備定期計(jì)量/期間核查，軟件審計(jì)追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術(shù)服務(wù)，支持新藥研發(fā)、藥物申報(bào)注冊(cè)和生產(chǎn)放行。

1.公司采用ISO9001質(zhì)量控制體系，zhuānyè提供以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的CRO檢測(cè)分析服務(wù)；

2.獲國(guó)家CNAS實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，為客戶提供符合全球藥政法規(guī)的藥物質(zhì)量研究服務(wù)；

3.業(yè)務(wù)范圍覆蓋dànbáizhì組學(xué)、多肽組學(xué)、代謝組學(xué)、生物藥物表征、單細(xì)胞分析、單細(xì)胞質(zhì)譜流式、生信云分析以及多組學(xué)生物質(zhì)譜整合分析等；

4.七大質(zhì)量控制檢測(cè)平臺(tái)，滿足您一站式服務(wù)需求；

5.服務(wù)3000+企業(yè)，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優(yōu)質(zhì)的生物質(zhì)譜分析服務(wù)!

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