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免疫共沉淀實驗的應用檢測技術服務詳情介紹
免疫共沉淀實驗(Co-Immunoprecipitation, Co-IP)基本原理是通過特異性抗體與目標蛋白結合,從復雜的生物樣品中富集并分離出與目標蛋白相互作用的其他dànbáizhì。該技術利用抗體與目標蛋白的特異性結合,將整個dànbáizhì復合物沉淀下來,進而揭示細胞內dànbáizhì之間的相互作用關系。這項技術不僅能夠幫助研究人員識別和鑒定dànbáizhì相互作用的伴侶,還能夠為深入理解生物學過程、疾病機制及藥物靶點的開發提供支持。因此,這項技術在細胞生物學、分子生物學以及藥物研發中具有廣泛的應用。這項技術的作用主要體現在以下幾個方面:首先,它是研究dànbáizhì-dànbáizhì相互作用的基礎方法之一;通過這項技術,研究人員可以深入探索細胞內復雜的信號轉導通路、細胞周期調控、轉錄調控等過程中的關鍵dànbáizhì相互作用網絡。其次,免疫共沉淀實驗在藥物開發中也具有重要意義,特別是在尋找新的藥物靶點或篩選與疾病相關的dànbáizhì復合物方面;通過識別與目標蛋白相互作用的dànbáizhì,研究人員可以發現潛在的藥物靶點或生物標志物。此外,它還可用于dànbáizhì復合物的純化、抗體的篩選以及新的抗體的開發等。
一、技術原理與關鍵步驟</p>
免疫共沉淀實驗的核心在于其對“共沉淀”現象的利用。首先,實驗需要從細胞或組織中提取dànbáizhì;此步驟通常使用含有合適離子強度和蛋白酶抑制劑的裂解緩沖液,確保dànbáizhì不會降解并保持其原有的功能。然后,利用特異性抗體與目標蛋白結合,該抗體可以直接結合目標蛋白或通過與蛋白A/G珠子等固相支持物結合來形成免疫復合物。緊接著通過離心等方法將免疫復合物從溶液中沉淀,去除非特異性結合的dànbáizhì和其他雜質;zuì后沉淀下來的復合物可以通過Western Blot、質譜分析等方法進行檢測,確認目標蛋白及其相互作用的dànbáizhì。
在免疫共沉淀實驗中,選擇合適的抗體和優化實驗條件是關鍵,抗體的特異性直接影響到實驗結果的準確性和可靠性。實驗設計時,研究人員需要選擇合適的抗體以及確定適當的裂解緩沖液和沉淀條件,以保證目標蛋白及其相互作用蛋白能夠有效地被捕獲和富集。
二、分析方法與技術應用
免疫共沉淀實驗后,如何對捕獲到的dànbáizhì進行進一步分析是研究的重點之一。傳統的Western Blot技術常用于檢測目標蛋白以及可能的相互作用伙伴,通過使用特異性抗體進行二次檢測,Western Blot可以有效驗證目標蛋白與其他dànbáizhì的結合情況。隨著質譜技術的發展,越來越多的研究者選擇通過質譜分析對免疫共沉淀獲得的dànbáizhì進行鑒定和定量。質譜不僅能夠高效地鑒定大量dànbáizhì,還能提供dànbáizhì間相互作用的定量數據,為構建更為復雜的dànbáizhì相互作用網絡提供支持。
免疫共沉淀實驗廣泛應用于多個研究領域。在細胞生物學和分子生物學中,研究人員利用該技術揭示細胞信號通路、基因轉錄調控以及細胞周期等生物學過程中的關鍵dànbáizhì相互作用。特別是在癌癥、神經退行性疾病等領域,這項技術有助于揭示疾病相關的dànbáizhì復合物及其功能。例如,研究人員可以通過免疫共沉淀技術研究腫瘤抑制因子與其他相關dànbáizhì的相互作用,從而為癌癥的早期診斷和治療提供新的思路。此外,在藥物開發中,它被用于篩選藥物靶點以及研究靶向藥物的機制。
三、持續優化與高通量技術發展
免疫共沉淀實驗的有效性和靈敏度受多種因素的影響,包括抗體的質量、實驗條件的優化以及后續分析的jīngquè度。為了提高實驗的準確性和數據的可靠性,許多研究者開始將免疫共沉淀技術與高通量質譜技術結合。高通量技術的出現使得研究人員能夠在單次實驗中識別和分析更多的dànbáizhì,極大地提高了實驗的效率與分辨率。免疫共沉淀實驗與質譜分析的結合,已成為dànbáizhì組學和系統生物學研究中的一種手段。
百泰派克生物科技公司為廣大科研人員提供zhuānyè的免疫共沉淀實驗服務,我們擁有豐富的實驗經驗和高效的技術平臺,能夠為客戶提供定制化的實驗方案,從樣品準備到數據分析,我們的團隊都能夠為您提供quánfāngwèi的技術支持。
百泰派克生物科技--生物制品表征,多組學生物質譜檢測優質服務商
相關服務:
CO-IP免疫共沉淀法蛋白互作分析
百泰派克生物科技特色項目
一、蛋白測序
百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析,提供基于質譜的蛋白測序分析服務,包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析,Nduāncèxù,Cduāncèxù和全序列分析,以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì,提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務,對蛋白序列進行分析。
※服務優勢:
1.采用目前世界上*的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;
2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;
3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;
4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;
5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug,即可完成檢測;
6.測序不受N端封閉,PEC和和糖基化等N端修飾的影響。
二、dànbáizhì組學
百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC,提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外,百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務,助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。
※服務優勢:
1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析,發現新的生物標記物;
2.體內體外多種dànbáizhì標記方法,適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;
3.質譜分析靈敏度高,實驗結果重復度高;
4.可檢測較低豐度蛋白,線性范圍廣;
5.zhuānyè生物信息學分析,分析更系統準確。
三、單細胞質譜流式技術分析
百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析,采用金屬元素標記物(通常是金屬元素標記的特異抗體)標記細胞表面和內部的分子,然后用流式細胞原理分離單個細胞,再用電感耦合等離子體質譜(ICP-MS)分析單個細胞的原子質量譜,zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。
※服務優勢:
1.技術*,*技術空白
采用金屬標記抗體技術,避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征,百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。
2.分析數量大,成本較低
單細胞RNAseq受成本等因素限制,所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右,而流式質譜技術一次(單樣本)就可分析至少10^5的細胞,實現了數量級的提高,且成本不高于單細胞RNAseq。
3.應用前景大
①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化,在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景;
②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外,質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾;
③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。
四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現
百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析,可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究,旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案,深入挖掘未知的靶標。
五、生物藥物表征
百泰派克基于高分辨率質譜技術,MALDI TOF,高效色譜分離技術,提供一系列完善的生物藥物分析方案,從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析,到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務,幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。
百泰派克生物科技七大檢測平臺
百泰派克生物科技-生物制品表征,生物質譜多組學優質服務商
北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則,通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證,建立了完備的質量體系,數據冷熱/異地備份,設備定期計量/期間核查,軟件審計追蹤,為客戶提供一體化解決方案和技術服務,支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。
1.公司采用ISO9001質量控制體系,zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務;
2.獲國家CNAS實驗室認可,為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務;
3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等;
4.七大質量控制檢測平臺,滿足您一站式服務需求;
5.服務3000+企業,10000+客戶的選擇;
6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!