檢測原理

線粒體膜電位下降是細胞凋亡早期的標志性事件，發生在細胞核凋亡特征（染色質濃縮、DNA斷裂）出現之前，一旦線粒體膜電位崩潰，細胞凋亡便不可逆轉。 JC-1是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位 Ψm的理想熒光探針，可以檢測細胞、組織或純化的線粒體膜電位。JC-1有單體和多聚體兩種存在形式，兩者發射光譜不同。在正常細胞內，線粒體膜電位較高，JC-1聚集在線粒體的基質中，形成聚合物，可產生紅色熒光；凋亡早期，線粒體膜電位降低，JC-1不能聚集在線粒體基質中，此時JC-1為單體，可產生綠色熒光。 通過JC-1從紅色熒光到綠色熒光的轉變可檢測到細胞膜電位的下降，可將JC-1熒光顏色的轉變作為細胞凋亡早期的檢測指標。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。 JC-1單體的最大激發波長為514 nm，最大發射波長為529 nm；JC-1聚合物的最大激發波長為585 nm，最大發射波長為590 nm。實際觀察時，常規設置紅色熒光和綠色熒光即可。

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