N端序列分析檢測技術服務詳情介紹

Edman降解（埃德曼降解）法，是由菲爾•埃德曼（Pehr Edman）首先創立用于肽鏈或dànbáizhì中N-端氨基酸序列分析的方法。Edman降解法檢測的原理非常簡單，在堿性條件下反應，用異硫氰酸苯酯（Phenylisothiocyanate, PITC）與待檢測的dànbáizhì（多肽）的N-端氨基生成苯氨基硫甲酰（PTC）的衍生物，然后處理-關環-選擇性切斷肽鏈N-端，得到N-端氨基酸殘基的噻唑啉酮苯胺衍生物。接著用有機溶劑萃取衍生物，在酸的作用下，不穩定的衍生物轉變為穩定的的乙內苯酰硫脲（PTH）衍生物，余下肽鏈中的酰胺鍵不受影響。通過用HPLC或電泳法分析生成的乙內酰苯硫脲氨基酸（PTH-氨基酸），可以鑒定出氨基酸類別。重復氨基酸鑒定反應可以達到對N端氨基酸按照從N端到C端的方向依次對氨基酸序列進行分析。對于序列較長的dànbáizhì（多肽），還可以將樣品先切成小的肽段，先對肽段序列分析，再將肽段信息進行拼接即可獲得完整dànbáizhì的序列信息。

Edman降解法用于Nduāncèxù的優點：

• PITC與所有氨基酸殘基的反應產率和回收率高，因此副產物少，可通過色譜進行準確鑒定； 2. 反應時間快，對于大多數氨基酸殘基來說，30min耦合時間，5min切割反應時間即可； 3. 反應后的肽鏈仍然是完整的，可用Edman降解法重復測定新生的N末端氨基酸。

Edman降解法用于Nduāncèxù需要注意的問題：

• 樣品純度需>90%，鹽離子含量在50 mmol/L之內，不含SDS等變性劑，N端必須是均一的高純樣品； 2. 10 Pmol 樣品可以測定20 aa； 3. 液體樣品不能含有蛋白酶，建議盡早測試，防止時間太長容易降解； 4. 轉膜樣品在轉膜前不宜放置太久以防樣品擴散，轉膜后可密封保存3-6個月，建議使用Coomassie R-250進行染色，電泳緩存液建議使用CAPS buffer； 5. 樣品無信號峰是，建議蛋白進行N-端封閉； 6. 建議整個反應過程中盡可能使用高純buffer。

案例分析：

百泰派克生物科技采用島津公司推出的PPSQ系列儀器實現對蛋白或者多肽樣品N端氨基酸序列的分析，可以分析N端30個以上的氨基酸。以下是我們對某一蛋白藥物進行分析的實際色譜結果，該項目對樣品中蛋白藥物的前15個氨基酸進行了分析。從下圖（第15個氨基酸的色譜圖）可以看出，色譜峰值仍然非常高，可以得到非常準確的結果。

中/英文項目報告

在技術報告中，百泰派克會為您提供詳細的中英文雙語版技術報告，報告包括： 1. 實驗步驟（中英文） 2. 相關的質譜參數（中英文） 3. 質譜圖片 4. 原始數據 5. 生物藥物N端序列信息

生物藥物N端序列測定一站式服務

您只需下單-寄送樣品 百泰派克一站式服務完成：樣品處理-上機分析-數據分析-項目報告

百泰派克生物科技特色項目

一、蛋白測序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos質譜儀及島津公司埃德曼降解測序系統對dànbáizhì序列進行分析，提供基于質譜的蛋白測序分析服務，包括對dànbáizhì的氨基酸組成分析，Nduāncèxù，Cduāncèxù和全序列分析，以及基于埃德曼降解的dànbáizhìN端序列分析服務。對于未知理論序列的dànbáizhì，提供基于從頭測序法的dànbáizhì從頭測序服務，對蛋白序列進行分析。

※服務優勢：

1.采用目前世界上優良的質譜儀器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可實現對所測定靶蛋白序列 100% 的覆蓋;

3.可測定蛋白N端多達 70個氨基酸序列;

4.可測定多種形式的樣品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白條帶;

5.樣品用量低: 蛋白樣品僅需 5-10ug，即可完成檢測;

6.測序不受N端封閉，PEC和和糖基化等N端修飾的影響。

二、dànbáizhì組學

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos質譜平臺結合Nano-LC，提供定量dànbáizhì組學、靶向dànbáizhì組學、多肽組學、翻譯后修飾蛋白組學等多種dànbáizhì組學分析服務。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4Ddànbáizhì組學服務，助力微量樣本蛋白組學、大樣本群醫學及高通量修飾組學等研究工作。

※服務優勢：

1 .高通量定量蛋白分析:多對照組大規模實驗分析，發現新的生物標記物;

2.體內體外多種dànbáizhì標記方法，適用于分析組織、細胞、血液等多種樣品;

3.質譜分析靈敏度高，實驗結果重復度高;

4.可檢測較低豐度蛋白，線性范圍廣;

5.zhuānyè生物信息學分析，分析更系統準確。

三、單細胞質譜流式技術分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm質譜流式系統進行單細胞質譜流式技術分析，采用金屬元素標記物（通常是金屬元素標記的特異抗體）標記細胞表面和內部的分子，然后用流式細胞原理分離單個細胞，再用電感耦合等離子體質譜（ICP-MS）分析單個細胞的原子質量譜，zuì后將原子質量譜數據轉換為細胞表面和內部的信號分子表達量。

※服務優勢：

1.技術優良，*技術空白

采用金屬標記抗體技術，避免了傳統流式熒光通道少且易相互影響的問題。可在單細胞層面上對多種指標同時進行表征，百泰派克生物科技可做到同時檢測51個目標蛋白。

2.分析數量大，成本較低

單細胞RNAseq受成本等因素限制，所有樣本細胞匯總的分析數目一般在2x10^4個左右，而流式質譜技術一次（單樣本）就可分析至少10^5的細胞，實現了數量級的提高，且成本不高于單細胞RNAseq。

3.應用前景大

①流式質譜結果可以給出細胞亞群的變化，在臨床診斷、疾病機制研究等方面具有極大的研究前景；

②將金屬標簽技術與其他技術結合會有新應用方向。除常規蛋白外，質譜流式細胞技術還可用于蛋白翻譯后修飾；

③可檢測細胞存活率、細胞大小、mRNA轉錄子表達量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現

百泰派克生物科技的基于高精度質譜的免疫多肽組學分析及新抗原發現一站式解決方案包括我們專有的、高度敏感的免疫肽富集和鑒定方案。我們能夠幫助您實現10,000個以上I型多肽和10,000個以上II型多肽的鑒定和識別。通過我們優化的高通量免疫多肽組學分析平臺進行免疫肽組學分析，可從zuì小的樣品材料中進行可重復的識別和定量。該服務可以應用于大規模的研究，旨在助力科研工作者尋找癌癥、免疫疾病及傳染病的解決方案，深入挖掘未知的靶標。

五、生物藥物表征

百泰派克基于高分辨率質譜技術，MALDI TOF，高效色譜分離技術，提供一系列完善的生物藥物分析方案，從dànbáizhì、多肽、抗體、疫苗等生物制品的氨基酸組成和一級結構分析，到產品變異性和純度分析。旨在提供優質生物藥物分析服務，幫助生物醫藥生產商提高生物藥物品質。

百泰派克生物科技七大檢測平臺

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物質譜多組學優質服務商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于為生物/制藥和醫療器械行業提供質量控制檢測和項目驗證等zhuānyè服務。公司實驗室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法規和指導原則，通過CNAS/ISO9001雙重質量體系認證，建立了完備的質量體系，數據冷熱/異地備份，設備定期計量/期間核查，軟件審計追蹤，為客戶提供一體化解決方案和技術服務，支持新藥研發、藥物申報注冊和生產放行。

1.公司采用ISO9001質量控制體系，zhuānyè提供以質譜為基礎的CRO檢測分析服務；

2.獲國家CNAS實驗室認可，為客戶提供符合全球藥政法規的藥物質量研究服務；

3.業務范圍覆蓋dànbáizhì組學、多肽組學、代謝組學、生物藥物表征、單細胞分析、單細胞質譜流式、生信云分析以及多組學生物質譜整合分析等；

4.七大質量控制檢測平臺，滿足您一站式服務需求；

5.服務3000+企業，10000+客戶的選擇；

6.致力于為您提供優質的生物質譜分析服務!

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