iTRAQ簡述-輝駿生物

iTRAQ (Isobaric tag for relative and absolute quantitation，iTRAQ）是由AB SCIEX公司研發(fā)的一種體外同重同位素標記的相對與定量技術。該技術利用同位素試劑可同時標記8個多肽樣品，標記的多肽樣品等量混勻后，經(jīng)液相色譜分離及串聯(lián)質譜（MS/MS）分析，可得到各肽段的一、二級質譜信息。一級質譜中，不同樣品來源的同一肽段表現(xiàn)出相同的質荷比；二級質譜中，肽段碎片離子的質荷比及8種iTRAQ報告離子的信號強度，包含了肽段的序列信息及該肽段在不同樣品中的相對表達量信息，通過生物信息學分析即可鑒定出所測蛋白及其在各樣品中的表達差異。

iTRAQ技術在微生物抗協(xié)迫機制和動植物發(fā)育分化機理研究及醫(yī)學生物標記物篩選領域都有廣泛應用。

iTRAQ技術原理-輝駿生物    

iTRAQ試劑由三部分組成：報告基團、平衡基團和肽反應基團。

報告基團有8種分子量，范圍從113到121（無120）；平衡基團也8有種不同的分子量，與不同的報告基團搭配，能保證被標記的不同來源的同一肽段在一級質譜中具有相同的質荷比；肽反應基團能與肽段N端及賴氨酸側鏈氨基發(fā)生共價連接使肽段連上標記。

一級質譜中，任何一種iTRAQ試劑標記的不同樣品中的同一肽段表現(xiàn)出相同的質荷比；二級質譜中，化學鍵斷裂釋放出iTRAQ報告離子，在質譜低質量區(qū)產生了8個報告離子峰，其強度反應了該肽段在不同樣品中的相對表達量信息，另外二級質譜中的肽段碎片離子峰質荷比反應了該肽段的序列信息；這些質譜原始數(shù)據(jù)經(jīng)過數(shù)據(jù)庫檢索，可得到蛋白質的定性和相對定量信息。

iTRAQ技術優(yōu)勢-輝駿生物

1.靈敏度高：低豐度蛋白也能檢測出；

2. 適用范圍廣：幾乎可對任何物種的各類蛋白質進行分離鑒定；

3. 高通量：能同時對10組樣本中包含的蛋白進行鑒定及表達差異分析；

4. 高效：液相色譜與串聯(lián)質譜連用，自動化操作，分析速度快，分離效果好。

iTRAQ技術服務流程-輝駿生物

iTRAQ服務信息-輝駿生物

方案咨詢與送樣須知-輝駿生物

1、方案咨詢：我司將根據(jù)您的研究目為您設計合理的iTRAQ實驗方案，具體請聯(lián)系我司。

2、送樣須知：樣本應避免污染和反復凍融，需用液氮或干冰保存寄送；廣州的客戶可上門收樣。

注：iTRAQ試劑可以標記任何類型的蛋白樣本，如組織、細胞、細菌等材料。因此我司接受多種類型的樣本，但對于不同類型的樣本需要量有所不同，具體請咨詢我司。

iTRAQ實驗服務報告內容-輝駿生物

1、蛋白定鑒定和定量分析結果；

2、顧客蛋白質對應的質譜峰圖；

3、實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。

iTRAQ實驗服務案例-輝駿生物