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化工儀器網(wǎng)>產(chǎn)品展廳>試劑標物>行業(yè)專用試劑>生物試劑> PC-12(低分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞

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PC-12(低分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞

具體成交價以合同協(xié)議為準
  • 公司名稱 上海琛藝實業(yè)有限公司
  • 品牌 其他品牌
  • 型號
  • 產(chǎn)地 上海
  • 廠商性質 生產(chǎn)廠家
  • 更新時間 2023/5/8 13:05:20
  • 訪問次數(shù) 908

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!


上海琛藝實業(yè)有限公司經(jīng)過數(shù)年的努力發(fā)展已迅速成為集產(chǎn)品研發(fā)、生產(chǎn)、經(jīng)營為一體的專業(yè)化生物工程公司。公司酶科品牌ELISA試劑盒研發(fā)的種屬涵蓋:人,大鼠,小鼠,豬,牛,羊,兔,植物,農(nóng)殘類,魚類等。代理全進口gibco胎牛血清、BI胎牛血清、PAN胎牛血清等品牌胎牛血清,及其上千株細胞,幾百株細胞帶STR鑒定,具有完善的實驗技術開發(fā)平臺,成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術,結合公司的研發(fā)團隊,可以有效的保證公司產(chǎn)品強的穩(wěn)定性和高的準確性,同時又具有競爭力的價格。公司目前主要提供生化試劑、分子生物學試劑及試劑盒,各種抗體及免疫學試劑盒、實驗耗材等多門類上萬種產(chǎn)品,產(chǎn)品涉及分子生物學、細胞生物學、免疫學等生命科學的各個領域。

 

ELISA試劑盒、細胞株、gibco胎牛血清、BI胎牛血清、日本三菱厭氧培養(yǎng)罐、sigma試劑等生物試劑

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 T25
貨號 PC-12(低分化) 應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油
主要用途 醫(yī)院、學校科研實驗

 

PC-12(低分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞訂購流程
根據(jù)自己需要向我司說明來意;
簽訂協(xié)議并支付貨款下單;
廠家下單并包郵送貨上門;訂購流程:
根據(jù)自己需要向我司說明來意;
簽訂協(xié)議并支付貨款下單;
廠家下單并包郵送貨上門;

PC-12(低分化)大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞功能:
(1)       血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)       表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應。
(3)       與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。
 生理變化:
(1)       主動脈硬化。
(2)       主動脈瘤
(3)       主動脈鈣化。
基本特性:
(1)       組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)       鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)       原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)       每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)       肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)       不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線

 

細胞系使用說明書

種屬

細胞來源

ATCC/中科院/協(xié)和醫(yī)院等地引進

生長特性

貼壁  上皮樣

培養(yǎng)條件

培養(yǎng)基:DMEM+10%FBS (推薦HAKATA優(yōu)等胎牛血清,貨號:HN-FBS-50)

溫度:37℃     氣相:95%空氣,5% CO2

傳代

1. 用75%酒精噴灑整個培養(yǎng)瓶消毒,將其平躺置于培養(yǎng)箱中進行1-3小時的緩沖,.然后置于無菌操作臺,打開瓶口,將其中的培養(yǎng)液去掉,再往其中加入5-6mL新鮮培養(yǎng)基(以T25培養(yǎng)瓶為例)并置于細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng),根據(jù)細胞生長狀況及培養(yǎng)基顏色變化對其進行換液以及傳代,一般2到3天換一次液;

2.待細胞長至80-90%時,需要對其進行傳代,推薦傳代比例為1:3至1:5 ;

3傳代步驟:將0.25%胰酶-0.53 mM EDA消化液置于37°預熱,倒掉培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,往培養(yǎng)瓶中加入3-5 ml PBS,輕晃洗滌后棄去。往瓶中加1-2 ml預熱好的胰酶,置于37°孵育消化(*次消化需時常取出置于顯微鏡下觀察,以顯微鏡下細胞觸角回收變圓、輕拍瓶壁見細胞脫落為*消化時間,記錄*消化時間,以便于下次消化),消化好后加入3ml*培養(yǎng)基終止消化。用移液槍輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后收集細胞懸液,1200rpm離心5min,棄上清,加入*培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代。

保存

凍存條件:80%*培養(yǎng)基+10%FBS+10%DMSO

(備注:建議使用本公司的冷凍液(H-W-100),用4度保存的冷凍液直接重懸細胞,不能預熱后使用。)

保存條件:液氮存儲

供應限制

僅供研究之用

常見問題及解決方案

1.培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細胞極大可能會污染,所以我們會及時安排幫老師解決。

2.收到細胞后盡快更換為含 10%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加 10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間長不宜超過 72 小時)

3.細胞漂浮:培養(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。1-2小時后觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以去掉,留8-10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。

 



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