BY-0075 RAMOS(RA.1)人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系
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- 公司名稱 上海乾思生物科技有限公司
- 品牌 其他品牌
- 型號 BY-0075
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- 更新時間 2025/7/16 16:54:01
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RAMOS(RA.1)人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系
RAMOS(RA.1)人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系作為 Ramos 細(xì)胞系的衍生亞克隆,因保留了穩(wěn)定的 B 淋巴細(xì)胞特性及du特的生物學(xué)表型,在非 EB 病毒相關(guān) B 淋巴瘤的精細(xì)化研究中具有不可替代的價值,為解析淋巴瘤的異質(zhì)性及精準(zhǔn)治療提供了更精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)工具。
來源與背景:該細(xì)胞系是從 Ramos 細(xì)胞系中經(jīng)克隆篩選獲得的亞株,保留了原代細(xì)胞系的核心特征,同時在免疫表型和藥物反應(yīng)性上呈現(xiàn)一定特異性。與親代 Ramos 細(xì)胞相比,其表面免疫球蛋白表達(dá)更穩(wěn)定,尤其適合研究 B 細(xì)胞受體信號通路的細(xì)微調(diào)控機(jī)制,為探索 “B 細(xì)胞受體異常激活 - 淋巴瘤進(jìn)展” 的分子差異提供了理想樣本,填bu了淋巴瘤亞克隆異質(zhì)性研究模型的空白。作為散發(fā)性 Burkitt 淋巴瘤的代表性亞株,其明確的克隆來源使其成為對比研究淋巴瘤細(xì)胞亞群差異的重要材料。
細(xì)胞特性:形態(tài)上與親代 Ramos 細(xì)胞類似,呈圓形或類圓形,懸浮生長,細(xì)胞體積略小,細(xì)胞質(zhì)中嗜堿性顆粒更明顯,細(xì)胞核染色質(zhì)分布更均勻,核仁清晰可見,保持 Burkitt 淋巴瘤細(xì)胞的典型形態(tài)。核心特性為穩(wěn)定的免疫球蛋白表達(dá),表面免疫球蛋白 M(sIgM)和免疫球蛋白 D(sIgD)的表達(dá)水平比親代細(xì)胞高 15%-20%,且表達(dá)穩(wěn)定性更強(qiáng),傳代過程中無顯著波動,是研究 B 細(xì)胞受體功能的理想模型;增強(qiáng)的信號傳導(dǎo)活性,B 細(xì)胞受體被激活后,下游 ERK、AKT 通路的磷酸化水平比親代細(xì)胞高,信號持續(xù)時間更長,為解析 B 細(xì)胞受體信號強(qiáng)度與淋巴瘤惡性程度的關(guān)聯(lián)提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ);相似的增殖能力,體外培養(yǎng)時細(xì)胞倍增時間約 30-34 小時,克隆形成率約 50%,略低于親代細(xì)胞,但成瘤性更穩(wěn)定,裸鼠接種成瘤率可達(dá) 95% 以上,腫瘤生長速度均一性更好,減少了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的個體差異。傳代時采用與親代相同的處理方式,傳代比例 1:5-1:7,連續(xù)傳代 40 次后仍能保持其特異性表型,無明顯表型漂移。
培養(yǎng)條件:與親代 Ramos 細(xì)胞系基本一致,適宜采用含 10% 胎牛血清的 RPMI-1640 培養(yǎng)基,添加 1% 非必需氨基酸和 2mM 谷an酰胺。培養(yǎng)環(huán)境需控制在 37℃、5% CO?飽和濕度,細(xì)胞密度維持在 1×10?-8×10?個 /ml 之間,比親代細(xì)胞的最適密度略低,密度過高更易出現(xiàn)細(xì)胞活力下降。對培養(yǎng)基中鈣離子濃度更敏感,需維持在 1.8mM 左右,鈣離子濃度波動會顯著影響其 B 細(xì)胞受體的信號傳導(dǎo),傳代時離心速度可適當(dāng)降低至 900rpm,5 分鐘,減少對細(xì)胞表面受體的損傷,凍存液配方與親代相同,復(fù)蘇后存活率可達(dá) 85% 以上,高于親代細(xì)胞。
檢測鑒定:經(jīng)微生物篩查,無支原體、細(xì)菌、真菌及外源病毒污染,符合實(shí)驗(yàn)細(xì)胞質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。免疫表型分析顯示,CD19、CD20 陽性率均超過 98%,顯著高于親代細(xì)胞,sIgM 和 sIgD 雙陽性表達(dá)穩(wěn)定,符合高純度 B 淋巴細(xì)胞亞群特征。分子遺傳學(xué)檢測證實(shí)存在標(biāo)志性 t (8;14) 染色體易位,c-MYC 基因表達(dá)水平與親代細(xì)胞一致,但下游靶基因 FOS 的表達(dá)量更高,反映其du特的信號傳導(dǎo)特性。功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)中,B 細(xì)胞受體激動劑刺激后,細(xì)胞增殖率比親代細(xì)胞高 10%-15%,證實(shí)其增強(qiáng)的信號響應(yīng)能力,裸鼠接種后腫瘤生長曲線更平緩,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性更好。
應(yīng)用領(lǐng)域:在信號通路研究中,該細(xì)胞系常用于解析 B 細(xì)胞受體信號強(qiáng)度的調(diào)控機(jī)制,研究發(fā)現(xiàn)其 CD79a/b 的磷酸化效率更高,導(dǎo)致信號放大效應(yīng)更顯著,為理解 B 細(xì)胞受體信號異常增強(qiáng)的分子基礎(chǔ)提供了關(guān)鍵線索。在藥物敏感性研究中,是評估 B 細(xì)胞受體靶向藥物療效的理想模型,由于其信號傳導(dǎo)活性更強(qiáng),對 BTK 抑制劑等藥物的敏感性比親代細(xì)胞高,半數(shù)抑制濃度(IC50)更低,為篩選高敏感性藥物提供了更精準(zhǔn)的模型。在亞克隆異質(zhì)性研究中,通過與親代 Ramos 細(xì)胞的對比實(shí)驗(yàn),可清晰識別淋巴瘤亞克隆在基因表達(dá)、信號傳導(dǎo)及藥物反應(yīng)上的差異,發(fā)現(xiàn)某些亞克隆特異性表達(dá)的基因與耐藥相關(guān),為理解淋巴瘤的克隆演化提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。此外,該細(xì)胞系可用于研究免疫球蛋白變異與淋巴瘤進(jìn)展的關(guān)系,其穩(wěn)定的免疫球蛋白表達(dá)使其成為抗體工程研究的合適靶細(xì)胞。
該細(xì)胞系的優(yōu)勢在于保留了親代細(xì)胞的核心特征,同時具備更穩(wěn)定的表型和更均一的生物學(xué)行為,為淋巴瘤研究提供了更高精度的實(shí)驗(yàn)?zāi)P汀Mㄟ^與親代細(xì)胞及其他亞克隆的對比,可深入探索淋巴瘤細(xì)胞亞群的異質(zhì)性及其臨床意義,為個性化治療方案的制定提供更細(xì)致的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
總之,RAMOS (RA.1) 人 B 淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞系憑借其du特的免疫表型、穩(wěn)定的生物學(xué)特性及與親代細(xì)胞的差異性,成為研究 B 細(xì)胞淋巴瘤亞克隆異質(zhì)性的重要工具,為解析淋巴瘤的精細(xì)分子機(jī)制、開發(fā)精準(zhǔn)靶向藥物提供了堅實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
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