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黃頭病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素2020/10/29
黃頭病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)的特異性決定因素:1.引物與模板DNA特異正確的結(jié)合。2.堿基配對原則。3.TagDNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性。4.靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及TagDNA聚合醇耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大増加加,被擴増的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。靈敏度高PCR產(chǎn)
新孢子蟲(Ne)核酸檢測試劑反應(yīng)五要素2020/10/28
新孢子蟲(Ne)核酸檢測試劑反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含量以40-60%為
霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)反應(yīng)五要素2020/10/27
霍亂弧菌CTX基因核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)反應(yīng)五要素:參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:
哈達爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒TaqMan探針法2020/10/22
哈達爾沙門氏菌PCR檢測試劑盒TaqMan探針法:探針完整時,報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3
活化素Aelisa試劑盒實驗操作步驟2020/10/20
活化素Aelisa試劑盒實驗操作步驟:1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別
犬Ⅲ型膠原Col Ⅲ酶聯(lián)檢測試劑盒*注意事項2020/10/14
犬Ⅲ型膠原ColⅢ酶聯(lián)檢測試劑盒*注意事項:(1).實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。(2).試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。(3).使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。(4).不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。(5).洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。(6).使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份
氨基酸檢測試劑盒實驗禁忌2020/10/13
氨基酸檢測試劑盒實驗禁忌:1、濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。2、如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔一孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(shù)(×5×n)。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其正確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)目多,推薦使用排槍加樣。4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5、嚴(yán)格按照說明書的操縱進行,ELISA試劑盒試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀
小鼠心鈉肽(ANP)elisa試劑盒如何選擇zu適直的測量條件2020/10/10
小鼠心鈉肽(ANP)elisa試劑盒測定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度,如何選擇zu適直的測量條件一般從以下幾個方面來考慮①選擇適當(dāng)?shù)臏y量波長。一般根據(jù)待測組分的吸收光譜選擇z大吸收波長作為測量波長。如果干抗組分在大吸收波長也有吸收,則應(yīng)根據(jù):吸收大,干抗小“的原則來選擇測量波長②調(diào)價溶液的濃度,或選用不同厚度的吸收池,控制被測是呀的吸光度在0.2-0.8范圍內(nèi)。⑥選擇道當(dāng)?shù)膮⒈热芤骸T诜治鰪?fù)雜樣品時,如何消除干抗?消除干擾方法主要有加ロ入眼筆記,如加入配位拖蔽劑,使其與干抗高子生成測定波長物吸收的
西尼羅病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)液的配制2020/10/08
西尼羅病毒PCR檢測試劑盒反應(yīng)液的配制:PCR反應(yīng)體系的配置方式有時也會影響反應(yīng)的正常進行。常規(guī)方法與其它酶學(xué)反應(yīng)一樣,在后加入DNA聚合酶。早期的PCR儀沒有帶加熱的蓋子,要求在反應(yīng)液上覆蓋一層礦物油,防止水分蒸發(fā)。對于使用具3’-5’外切活性的高溫DNA聚合酶時,有時會擴增不出產(chǎn)物。在遇到這個問題時,如果將反應(yīng)成分分開配制,A管含模板、引物和dNTP,以及調(diào)整體積的H2O,B管含緩沖液、DNA聚合酶和水,然后再將兩管溶液混合起來,可較好地克服這個問題。據(jù)我司規(guī)定未開封的試劑盒:所有試劑均按試
駑巴貝斯蟲PCR試劑盒特點優(yōu)勢2020/09/29
駑巴貝斯蟲PCR試劑盒特點優(yōu)勢:1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。2.重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。3.靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當(dāng)樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。4.實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴(yán)重的
人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體ELISA試劑盒檢測方法的局限性2020/09/24
人蛋白脂質(zhì)蛋白抗體ELISA試劑盒檢測方法的局限性:①樣本檢測結(jié)果不樣本收集、處理、運送以及保存質(zhì)量有關(guān);②樣本提取過程中沒有控制好交叉污染,會出現(xiàn)假陽性結(jié)果;③陽性對照、擴增產(chǎn)物泄漏,會導(dǎo)致假陽性結(jié)果;④病原體在流行過程中基因突變、重組,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;⑤不同的提取方法存在提取效率差異,會導(dǎo)致假陰性結(jié)果;⑥試劑運輸,保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測效能下降,出現(xiàn)假陰性或定量檢測不準(zhǔn)確的結(jié)果樣本采集、存放及運輸:1、費用樣本采集:各類型樣本按照常規(guī)方法采集;2、存放:樣本在2~8℃條件下
活化素Aelisa試劑盒操作步驟2020/09/22
活化素Aelisa試劑盒操作步驟:1)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加
倉鼠丙二醛MDA酶聯(lián)檢測試劑盒標(biāo)本要求2020/09/15
倉鼠丙二醛MDA酶聯(lián)檢測試劑盒標(biāo)本要求:1.血清:溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。2.血漿:根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或其他作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。3.尿液:無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實
小鼠17-酮類固醇17-KS酶聯(lián)檢測試劑盒操作技巧2020/09/10
小鼠17-酮類固醇17-KS酶聯(lián)檢測試劑盒操作技巧1.操作前應(yīng)對試驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導(dǎo)致效果過錯,試驗重復(fù)性差。3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù),洗液在反
河流弧菌PCR檢測試劑盒實驗操作洗板方法2020/09/09
河流弧菌PCR檢測試劑盒實驗操作洗板方法1.手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過程數(shù)次。2.自動洗板:如果有自動洗板機,應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。說明1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。2.濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助
猴子熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒操作步驟2020/09/02
猴子熱休克蛋白糖蛋白96試劑盒操作步驟實驗開始前,請?zhí)崆芭渲坪盟性噭辉噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,均應(yīng)用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。建議各實驗室在操作前先進行預(yù)實驗以建立佳稀釋倍數(shù)。1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為
人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)放免試劑盒操作技巧2020/08/26
人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)放免試劑盒操作技巧:1.操作前應(yīng)對試驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗刷的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。2.正確使用加樣器加樣器應(yīng)筆直參加標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次第要與說明書一起,否則可導(dǎo)致效果過錯,試驗重復(fù)性差。3.手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要逾越說明書舉薦的洗刷次數(shù),洗液在
牛蛙生長激素 ELISA試劑盒樣本處理及要求2020/08/25
牛蛙生長激素ELISA試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。牛蛙生長激素ELISA試劑盒仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再
小鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒標(biāo)本要求2020/08/19
小鼠Ⅱ型膠原(COL2)elisa試劑盒標(biāo)本要求:1.標(biāo)本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。樣品收集、處理及保存方法:1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心3
苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒實驗操作步驟2020/08/12
苛養(yǎng)木桿菌PCR檢測試劑盒實驗步驟:①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙
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