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上海莼試生物技術有限公司
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捻轉毛細線蟲PCR檢測試劑盒TaqMan探針法2020/08/06
捻轉毛細線蟲PCR檢測試劑盒TaqMan探針法:探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監測系統可接收到熒光信號,即每擴增一條DNA鏈,就有一個熒光分子形成,實現了熒光信號的累積與PCR產物的形成*同步。取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分
人結蛋白ELISA試劑盒實驗的反應步驟2020/08/04
人結蛋白ELISA試劑盒實驗的反應步驟:(1)嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。(2)加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板"的出現。(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,E
犬生長抑素elisa檢測試劑盒實驗操作注意事項2020/07/29
犬生長抑素elisa檢測試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定
人ATP酶elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法2020/07/22
人ATP酶elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3.加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時
兔子透明質酸(HA)ELISA免費代測試劑盒間接法的步驟2020/07/15
兔子透明質酸(HA)ELISA免費代測試劑盒間接法的步驟1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:
殺蠣包拉米蟲PCR檢測試劑盒注意事項2020/07/09
殺蠣包拉米蟲PCR檢測試劑盒注意事項1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。好設立一個的PCR實驗室。2.純化模板所選用的方法對污染的風險有大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。4.PCR試劑配制應使用高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。6.試劑或樣品準備過程
捻轉毛細線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒檢測方法2020/07/08
捻轉毛細線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒檢測方法:1.Ⅰ法:在PCR反應體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后,發射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。定量PCR擴增熒光曲線圖PCR產物熔解曲線圖2.TaqMan探針法:探針完整時,報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收;PCR擴增時,Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,產品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離,從而熒光監
人抵抗素樣分子βELISA試劑盒實驗禁忌2020/07/07
人抵抗素樣分子βELISA試劑盒實驗禁忌:1、濃洗滌液可能會有結晶析出,ELISA試劑盒稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。2、如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先將樣本稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數(×5×n)。3、各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其正確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間好控制在5分鐘內,如標本數目多,推薦使用排槍加樣。4、封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5、嚴格按照說明書的操縱進行,ELISA試劑盒試驗結果判
MYO/MB elisa酶聯免疫試劑盒反應步驟2020/07/01
MYO/MBelisa酶聯免疫試劑盒反應步驟:(1)嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。(2)加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗*。(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板"的出現。(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異
結腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒實驗反應五要素2020/06/30
結腸彎曲桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒實驗反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C含
人前列腺素E2elisa檢測試劑盒檢測未知抗體的間接法2020/06/24
人前列腺素E2elisa檢測試劑盒檢測未知抗體的間接法:1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。2.次日洗滌3次。3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應:
天花病毒PCR檢測試劑盒操作流程2020/06/23
天花病毒PCR檢測試劑盒操作流程:1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,
獨活染料法PCR鑒定試劑盒反應的特異性決定因素2020/06/18
獨活染料法PCR鑒定試劑盒反應的特異性決定因素:1.引物與模板DNA特異正確的結合。2.堿基配對原則。3.TagDNA聚合酶合成反應的忠實性。4.靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TagDNA聚合醇耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大増加加,被擴増的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區,其特異性程度就更高。靈敏度高PCR
雞肌紅蛋白(MYO/MB) ELISA試劑盒的液體類標本2020/06/17
雞肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA試劑盒的液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3)尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分
牛可溶性白細胞分化抗原86ELISA試劑盒 樣本處理2020/06/10
牛可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒樣本處理及要求:1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。3.尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀
牛甘膽酸(CG)ELISA試劑盒操作步驟2020/06/09
牛甘膽酸(CG)ELISA試劑盒操作步驟:1,試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。2,實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3,不用的其它試劑應包裝好或蓋好。4,使用一次性的吸頭以免交叉污染,避免使用帶金屬部分的加樣器。5,使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6,洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。8,嚴格按照說明書的操作方法進行操作。說明書以英文說明
猴天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒液體類標本2020/06/04
猴天門冬氨酸氨基轉移酶(AST)ELISA試劑盒液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。1)血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。2)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。3)尿液:用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉
小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒注意事項2020/06/03
小鼠轉化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒注意事項:1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。5.如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
大鼠脂聯素(ADPN)ELISA試劑盒注意事項2020/06/02
大鼠脂聯素(ADPN)ELISA試劑盒注意事項:1.當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。2.洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。3.一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。5.如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請后乘以稀釋倍數。6.在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。7.底物請避光保存。8.不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
今天小編或將為你解開PCR反應體系中,熒光染料法2020/05/28
PCR的時候,你是否還在費心的準備冰盒,是否還在擔憂會否因為室溫太高導致酶活降低甚至失效,今天小編或將為你解開這些煩憂。在傳統PCR反應體系中,加入過量熒光染料,該染料只與雙鏈DNA小溝結合的染料,并不與單鏈DNA鏈結合,而且在游離狀態不發出熒光,只有摻入DNA雙鏈中才可以發光,因此,在PCR體系中,隨著特異性PCR產物的指數擴增,每個循環的延伸階段,染料摻入雙鏈DNA中,其熒光信號強度與PCR產物的數量呈正相關。下圖以SYBRGreenI染料為例:反轉錄PCR(ReverseTranscrip
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