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滬鼎生物|蛋白質糖基化位點檢測實驗步驟2024/02/28

蛋白質糖基化位點檢測：用酶或化學脫糖基化、通過選擇性標記或通過凝集素親和層析法是檢測蛋白糖基化常用方法。一、用PNGaseF（N-多糖酶）處理。1.以0.1mol/L磷酸鈉（或Tris-HCl，而不用檸檬酸）緩沖液，pH7.4(7.0~8.0)配制高達2mg/ml的蛋白溶液，并含50mmol/Lβ-巰基乙醇和0.1%SDS，在水浴中煮沸2分鐘。2.加1/10體積的10%NP-40溶液（或使SDS濃度少于或等于0.17%，NP-40：SDS的質量比在終反應中至少是7:1)。3.加PNGaseF到終

滬鼎生物|干燥箱和恒溫箱的使用方法及注意事項2024/02/22

干燥箱用于物品的干燥和干熱滅菌，恒溫箱用于微生物和生物材料的培養。這兩種儀器的結構和使用方法相似，干燥箱的使用溫度范圍為50~250℃，常用鼓風式電熱以加速升溫。恒溫箱的最高工作溫度為60℃。1．使用方法（1）將溫度計插入座內（在箱頂放氣調節器中部）。（2）把電源插頭插入電源插座。（3）將電熱絲分組開頭轉到1或2位置上（視所需溫度而定），此時可開啟鼓風機促使熱空氣對流。電熱絲分組開頭開啟后，紅色指示燈亮。（4）注意觀察溫度計。當溫度計溫度將要達到需要溫度時，調節自動控溫旋鈕，使綠色指示燈正好發亮

滬鼎生物| 小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA實驗說明2024/01/31

檢測范圍：25ng/L-800ng/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清，血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子α（TNF-α）含量。實驗原理：本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。用純化的小鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α（TNF-α），再與HRP標記的腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的

滬鼎生物|細胞污染是怎樣造成的2024/01/23

細胞培養中常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染，大多數較難處理。接下來讓我們一起來了解在哪些情況下會造成細胞污染一、違規操作：1.為節省時間，有人已經用超凈臺四個多小時，不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗。2.器材或者溶液很久沒用，未檢測是否污染而直接使用；離心管多次使用，槍頭為了方便交叉使用。3.超凈臺不點酒精燈；點了酒精燈放在右上角，而你在左下角做試驗。4.不帶手套，徒手操作。5.細胞培養間配備槍式移液器、手術器械、離心機、冰箱等儀器設備以及的實驗服和拖鞋，未定期消毒

滬鼎生物|試劑空白與樣品空白的區別2024/01/19

試劑空白是指由于測試試劑本身而帶來的測試結果的微小的正誤差。古朵努力使其生產的測試試劑的空白值為負，特別指出的是由于這個負的空白值非常小，從而不會影響測定的準確度。測試試劑的空白值對于一項測試尤為重要，當進行低濃度測定時應該從測試結果中扣除測試試劑的空白值。例如，如果從0.06mg/L的低濃度測試結果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，就會使zui終測定結果改變至少30%。而從1.23mg/L的高濃度測試結果中減掉0.02mg/L的試劑空白值，zui終測定結果只發生了2%的變化。測定試劑的空白值

小鼠皮下注射、皮內注射、肌肉注射和靜脈注射2024/01/11

皮下注射給藥將藥液推入皮下結締組織，經毛細血管、淋巴管吸收進入血液循環的過程。作皮下注射常選項背或大腿內側的皮膚。操作時，常規消毒注射部位皮膚，然后將皮膚提起，注射針頭取一鈍角角度刺入皮下，把針頭輕輕向左右擺動，易擺動則表示已刺入皮下，再輕輕抽吸，如無回血，可緩慢地將藥物注入皮下。拔針時左手拇、食指捏住進針部位片刻，以防止藥物外漏。注射量約為0.1～0.3ml/10g體重。皮內注射給藥將藥液注入皮膚的表皮河真皮之間，觀察皮膚血管的通透性變化或皮內反應，接種、過敏實驗等一般作皮內注射。先將注射部位

大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)ELISA試劑盒使用說明書2024/01/05

大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T0.2μg/ml-9μg/ml使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清血漿及相關液體樣本中載脂蛋白B48(Apo-B48)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)水平。用純化的大鼠載脂蛋白B48(Apo-B48)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入載脂蛋白B48(Apo-B48)，再與HRP標記的載脂蛋白B48(Apo-B48)抗體結合，形

細胞因子免疫學檢驗法之ELISA法2023/12/27

細胞因子多為多肽、蛋白或者糖蛋白，具備良好的抗原性，利用免疫學技術可以方便獲得不同細胞因子的抗血清、多克隆抗體或者單克隆抗體。細胞因子檢測無論是對免疫學、分子生物學的基礎研究，還是對闡明某些疾病的發病機理，指導臨床治療均具有重要的意義。免疫學檢測法是細胞因子檢測常用的方法之一。資料表明細胞因子與疾病的病理過程密切相關，細胞因子檢測及其基因表達狀況的測定正呈上升之勢。美迪西不僅可以為客戶提供基于Bio-Plex200、流式CBA、MSD、Luminex系統等全面進行各種singleplex或mul

ELISA中的抗原與抗體的反應2023/12/21

抗體的結構抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈（L）和兩個重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda）兩種型別。五類Ig的重鏈結構不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異，稱為可變區，分別用VH和VL表示。兩者構

人乙酰化組蛋白(A-STX17)ELISA試劑盒使用說明書2023/12/14

人乙酰化組蛋白(A-STX17)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1pg/ml-50pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中乙酰化組蛋白(A-STX17)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人乙酰化組蛋白(A-STX17)水平。用純化的人乙酰化組蛋白(A-STX17)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入乙酰化組蛋白(A-STX17)，再與HRP標記的乙酰化組蛋白(A-STX17)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗

細胞消化不下來？解決方案來了！2023/12/07

細胞消化不下來？小伙伴們在給貼壁細胞傳代的時候有沒有遇到細胞消化不下來的情況呢？有時候等了10分鐘甚至20分鐘細胞仍巋然不動，繼續等待怕消化過度，暴力吹下又怕對細胞造成機械損傷，可謂進退兩難。小尚為大家總結了細胞難消化的原因，以及對應的處理方式：（本文僅針對胰蛋白酶，若您使用其他類型的細胞解離試劑，可以在評論區留言）1.細胞貼壁緊不同種類的細胞貼壁的松緊程度是不一樣的，比如293系列細胞貼壁很松，是晃一晃就可能掉下來的程度。而MCF10A細胞卻貼壁很緊，可能需要消化5-10min甚至更久才能脫落

關于糖酵解的反應過程的介紹2023/12/01

糖酵解過程是從葡萄糖開始分解生成丙酮酸的過程，全過程共有10步酶催化反應。1.葡萄糖磷酸化糖酵解第一步反應是由己糖激酶催化葡萄糖的C6被磷酸化，形成6-磷酸葡萄糖。該激酶需要Mg2+離子作為輔助因子，同時消耗一分子ATP，該反應是不可逆反應。2.6-磷酸葡萄糖異構轉化為6-磷酸果糖這是一個醛糖-酮糖同分異構化反應，此反應由磷酸己糖異構酶催化醛糖和酮糖的異構轉變，需要Mg2+離子參與，該反應可逆。3.6-磷酸果糖磷酸化生成1，6-二磷酸果糖此反應是由磷酸果糖激酶催化6-磷酸果糖磷酸化生成1，6-二

小鼠皮質酮 (CORT)ELISA試劑盒使用說明書2023/11/23

小鼠皮質酮(CORT)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T2μg/L-80μg/L使用目的：本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關液體樣本中皮質酮(CORT)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠皮質酮(CORT)水平。用純化的小鼠皮質酮(CORT)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入皮質酮(CORT)，再與HRP標記的皮質酮(CORT)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化

ELISA技術中的抗原與抗體的反應2023/11/16

1.2.1抗體的結構抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類，即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測定有關的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個輕鏈（L）和兩個重鏈（H）的單體組成。Ig的輕鏈是相同的，有κ（kappa）和λ（Lambda）兩種型別。五類Ig的重鏈結構不同，這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ（gamma）鏈和μ（mu）鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異，稱為可變區，分別用VH和VL表

bca法制作的標準曲線點發生較大偏高的原因2023/11/10

BCA法是一種常用的蛋白質濃度檢測方法，它通過比色反應測定樣品中的蛋白質濃度。如果在BCA法制作標準曲線時出現了偏高的情況，可能有以下原因：標準品的配制不準確：在BCA法中，標準品的配制非常關鍵，如果標準品的濃度不準確，會導致標準曲線的點位偏高或者偏低。反應時間過長：在BCA法中，試劑的反應時間對結果有較大影響。如果反應時間過長，會導致反應過度，使得吸光度值偏高。樣品中含有干擾物質：某些樣品中可能含有干擾物質，如膽固醇、尿素等，這些物質可能被誤判為蛋白質，從而導致測量結果偏高。非特異性反應：BC

人表皮生長因子(EGF)ELISA試盒使用說明書2023/11/02

人表皮生長因子(EGF)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T25pg/ml-480pg/ml使用目的：本試劑盒用于測定樣本表皮生長因子(EGF)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人表皮生長因子(EGF)水平。用純化的人表皮生長因子(EGF)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入表皮生長因子(EGF)，再與HRP標記的表皮生長因子(EGF)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過CHE底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化

滬鼎生物｜高敏ELISA試劑盒使用注意事項須知2023/10/27

elisa試劑盒技術在60年代提出，因為具有靈敏度高、特異性強，酶免疫試劑的性質比較穩定，操作方法簡便快速、無放射性污染以及應用范圍廣等很多優點，ELISA試劑盒迅速在醫學基礎理論研究，臨床病毒學和生物化學檢驗等工作中獲得了廣泛的應用。但是在使用ELISA試劑盒的時候還是有很多問題需要我們注意一下的！ELISA試劑盒注意問題：1、封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。2、底物請避光保存。3、嚴格按照技術說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。4、所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染

ELISA分析優缺點2023/10/20

ELISA實驗所有方法的缺點很明顯：1、重復性不好；2、收自身抗體、嗜異性抗體等干擾，易出現假陽性；3、不論儀器和手工操作，干擾因素較多。影響最大的是溫度和時間。直接法（directELISA）將抗原直接固定在固相載體上，參加酶符號的一級抗體，即可測定抗原總量，此一級抗體的特異性非常重要。優勢：操作手續簡略，因無須運用二抗可防止交互反響。缺陷：實驗中的一抗都得用酶符號，但不是每種抗體都適合做符號，費用相對進步。間接法（indirectELISA）此測定辦法與直接法相似，不一樣在于一級抗體沒有酶符

植物氨基肽酶(AP)ELISA試劑盒使用說明書2023/10/13

植物氨基肽酶(AP)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T1.6U/L-60U/L使用目的：本試劑盒用于測定植物樣本中氨基肽酶(AP)活性。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中植物氨基肽酶(AP)水平。用純化的植物氨基肽酶(AP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入氨基肽酶(AP)，再與HRP標記的氨基肽酶(AP)抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過CHE底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化

根據不同條件分類趨化因子的類型2023/09/28

結構分類趨化性細胞因子根據其氨基端（N端）半胱氨酸的排列方式，可分為CXC、CC、XC和CX3C四個亞族：CC趨化因子亞族：CCL1、CCL2、CCL3、CCL4、CCL5、CCL6、CCL7、CCL8、CCL9、CCL10、CCL11、CCL12、CCL13、CCL14、CCL15、CCL16、CCL17、CCL18、CCL19、CCL20、CCL21、CCL22、CCL23、CCL24、CCL25、CCL26、CCL27、CCL28CXC趨化因子亞族：CXCL1、CXCL2、CXCL3、CX