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上海滬鼎生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第13年
ELISA實(shí)驗(yàn):血清、血漿、尿液、唾液和細(xì)胞的收集和處理方法2019/10/21
血清、血漿、尿液、唾液和細(xì)胞的收集和處理方法:1.血清:用無(wú)菌管收集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。2.血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分),仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。3.尿液:用無(wú)菌管收集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上
ELISA試劑臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)2019/10/16
一、ELISA臨床質(zhì)量評(píng)價(jià)要點(diǎn)從臨床應(yīng)用角度考核檢修試劑的可靠性,是以其能否區(qū)分健康與疾病的能力作為依據(jù)的。檢定內(nèi)容除包裝、標(biāo)簽、說明書等外,對(duì)試劑的機(jī)能,如特異性、敏捷度、精密度和線性等均需逐項(xiàng)檢定,通過對(duì)一系列參比品的檢測(cè),結(jié)果符合要求者才為合格。部臨檢中央對(duì)乙肝ELISA診斷試劑在這方面進(jìn)行了工作,通過質(zhì)量評(píng)價(jià),促進(jìn)了試劑質(zhì)量的進(jìn)步。進(jìn)行這種評(píng)價(jià),首先需要收集有關(guān)的病人血清,然后用*的檢測(cè)該項(xiàng)標(biāo)志物zui可靠的試劑進(jìn)行測(cè)定,以確定其為陽(yáng)性或陰性。目前還很難找到100%可靠的試驗(yàn),任何試驗(yàn)都
elisa試劑盒使用小知識(shí)2019/10/15
elisa試劑盒知識(shí)問答:1.elisa試劑盒檢測(cè)范圍什么意思?比如的試劑盒檢測(cè)蛋白質(zhì)的濃度范圍是10--100nmol/ml,而你的三個(gè)樣品濃度為100,200,和300.那么你檢測(cè)到的數(shù)值是一樣的,都是試劑盒檢測(cè)的zui大值100。2.一個(gè)elisa試劑盒檢測(cè)幾個(gè)樣品?48T可做42個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)96T可做90個(gè)樣本加6個(gè)標(biāo)準(zhǔn)點(diǎn)3.elisa試劑盒中48T和96T的區(qū)別是什么?48T和96T代表試劑盒的規(guī)格48T意思是48孔96T意思是96孔注意事項(xiàng):1.elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出
abccom一抗與二抗的區(qū)別2019/10/11
一、抗體原理:ELISA是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應(yīng)物,從而保證試驗(yàn)結(jié)果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)際應(yīng)用中,通過不同的設(shè)計(jì),具體的方法步驟可有多種。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。二、抗體的定義:指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)既可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行,也可以在機(jī)體外進(jìn)行???
標(biāo)準(zhǔn)品的日常管理事項(xiàng)2019/09/24
隨著標(biāo)準(zhǔn)品的著重發(fā)展,在使用的過程中也遇到了一些問題,若管理不善或超過使用期限極易導(dǎo)致其濃度降低。這樣有可能使含量偏低的藥品通過檢驗(yàn)成為合格藥品,也會(huì)影響到原料藥和中間體的質(zhì)量控制。我公司針對(duì)產(chǎn)品使用管理的問題進(jìn)行升級(jí)處理。下面我們一起來看看進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品的日常管理:一、管理要求1.要把握好標(biāo)準(zhǔn)品的來源,要使用國(guó)家認(rèn)可的標(biāo)準(zhǔn)品,并按要求對(duì)其進(jìn)行相關(guān)驗(yàn)證;2.應(yīng)按要求做好標(biāo)準(zhǔn)品的賬目管理、領(lǐng)用登記,并在規(guī)定條件下儲(chǔ)存;3.要對(duì)工作中的標(biāo)準(zhǔn)品、開封過的標(biāo)準(zhǔn)品以及標(biāo)準(zhǔn)品儲(chǔ)備液的儲(chǔ)存條件和使用期限進(jìn)行驗(yàn)證,
滬鼎文獻(xiàn):干細(xì)胞表面標(biāo)志CD133在肝癌中的表達(dá)及其陽(yáng)性亞群增殖特性2019/08/23
干細(xì)胞表面標(biāo)志CD133在肝癌中的表達(dá)及其陽(yáng)性亞群增殖特性張寶芹(北京大學(xué)濱海醫(yī)院、天津市第五中心醫(yī)院消化科,天津市300450)引用本文:張寶芹.干細(xì)胞表面標(biāo)志CD133在肝癌中的表達(dá)及其陽(yáng)性亞群增殖特性[J].中國(guó)組織工程研究,2017,21(9):1319-1323.DOI:10.3969/j.issn.2095-4344.2017.09.002ORCID:0000-0002-5015-9381(張寶芹)文章快速閱讀:文題釋義:CD133:是一種重要的表面標(biāo)志物,具有*的信號(hào)傳遞通路,可參
干貨-試劑盒好壞的鑒別方法2019/07/30
Elisa試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒是用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV)病毒IgM抗體ELISA檢測(cè)。但是試劑盒的好壞卻關(guān)系到整個(gè)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。那就看看滬鼎技術(shù)怎么講:鑒別方法:Ⅰ.利用干擾實(shí)驗(yàn)即可辨別ELISA試劑盒是否檢測(cè)目的抗原,方法如下:(1)將針對(duì)試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測(cè)抗體配置成antibody:antigen
跳孔?滬鼎為您解析關(guān)于Elisa跳孔相關(guān)問題2019/07/26
跳孔(Drift)在做科研實(shí)驗(yàn)時(shí)有沒有發(fā)現(xiàn),很多elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)因?yàn)樘锥霈F(xiàn)倒置現(xiàn)象。其實(shí)跳孔的定義是酶標(biāo)板從左側(cè)到右側(cè)的孔或從上到下的孔內(nèi)信號(hào)出現(xiàn)顯著的倒置現(xiàn)象,以下上海滬鼎根據(jù)售后指導(dǎo)列出幾個(gè)客戶常見問題給予解答。如您有類似情況發(fā)生,歡迎參考閱讀。我剛配置試劑的時(shí)候中斷了,這是否會(huì)影響我的實(shí)驗(yàn)結(jié)果?◆這可能會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生波動(dòng)的曲線。在移液之前確定所有的標(biāo)準(zhǔn)品或者樣品是否配制完好。請(qǐng)?jiān)谠噭┡渲仆甑?5-20分鐘內(nèi)滴加入板內(nèi)。(除非特別說明)我是否需要一個(gè)多道移液器?◆在配制諸如底物,酶結(jié)合物
夏季實(shí)驗(yàn)室里的相關(guān)事宜介紹2019/07/24
轉(zhuǎn)眼,已經(jīng)來到了七月底,在這個(gè)熱氣沖天的七月,用一個(gè)字形容它,是“熱”;用兩個(gè)字形容它,是“很熱”;用三個(gè)字形容它,是“非常熱”。在這個(gè)熱氣直逼的夏天,客戶遇到的一些常見問題。問題一:天氣這么熱,ELISA試劑盒開封后剩余試劑應(yīng)該如何保存?答:針對(duì)已開封的試劑盒,剩余試劑仍需按照試劑瓶標(biāo)簽所示的溫度保存,使用后的剩余試劑盒建議在實(shí)驗(yàn)后1個(gè)月內(nèi)使用完畢,產(chǎn)品過期時(shí)間以盒子上的標(biāo)簽為準(zhǔn),保質(zhì)期內(nèi)所有組分都確保是穩(wěn)定的。問題二:實(shí)驗(yàn)結(jié)果不顯色或顯色值低什么原因?答:1.底物配制問題或底物已失效。2.酶
蛋白酶k是如何做到消化蛋白質(zhì)的?2019/07/19
蛋白酶k是一種枯草蛋白酶類的高活性蛋白酶,用于生物樣品中蛋白質(zhì)的一般降解。從林伯氏白色念球菌中純化得到。該酶有兩個(gè)ca2+結(jié)合位點(diǎn),它們離酶的活性中心有一定距離,與催化機(jī)理并無(wú)直接關(guān)系。然而,如果從該酶中除去ca2+,由于出現(xiàn)遠(yuǎn)程的結(jié)構(gòu)變化,催化活性將喪失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情況下污染酸制品的蛋白質(zhì)。所以,蛋白酶k消化過程中通常加入edta(以抑制依賴于mg2+的核酸酶的作用)。但是,如果要消化對(duì)蛋白酶k具有較強(qiáng)耐性的蛋白,如角蛋白一類,則可能需要使用含有1mmol/lc
收到細(xì)胞株該如何處理?2019/07/15
1.收到細(xì)胞,時(shí)間要鏡檢:觀察細(xì)胞形態(tài)是否正常,對(duì)于貼壁細(xì)胞則要注意看貼壁情況是否很好,觀察細(xì)胞密度,有疑議及時(shí)咨提供細(xì)胞的技術(shù)人員。由于運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間或者溫度的變化,很多貼壁細(xì)胞在盛滿培養(yǎng)基的瓶子里生長(zhǎng)的狀態(tài)和平時(shí)會(huì)有點(diǎn)不一樣,主要是貼壁牢固問題。比如293T,平時(shí)貼壁就不是很牢,在裝滿的培養(yǎng)基瓶子里面,會(huì)發(fā)生大片的脫落,細(xì)胞聚集在一起,但是細(xì)胞生長(zhǎng)還是正常的,通過離心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的貼壁生長(zhǎng)。2.當(dāng)通過上一步的觀察,細(xì)胞初步?jīng)]有任何問題時(shí),進(jìn)行下一步操作。當(dāng)收到的細(xì)胞
雙刃之劍--LPS內(nèi)毒素2019/07/08
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁上的一種脂多糖(LipopolySaccharide,LPS)和蛋白的復(fù)合物,當(dāng)細(xì)菌死亡或自溶后便會(huì)釋放出內(nèi)毒素。內(nèi)毒素大量進(jìn)入血液就會(huì)引起發(fā)熱反應(yīng)—“熱原反應(yīng)”。內(nèi)毒素與多種感染疾病密切相關(guān),病情惡化往往伴隨著內(nèi)毒素含量的增加,病情緩解也常伴隨著內(nèi)毒素含量的減少。因此,快速檢測(cè)(1小時(shí))血液、臟器內(nèi)毒素含量可以為臨床相關(guān)疾病的診斷預(yù)后提供參考。內(nèi)毒素測(cè)定方法有:凝膠法系通過鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來定性檢測(cè)或半定量?jī)?nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見規(guī)格為0.1ml
ELISA試劑盒的操作法,您做對(duì)了么?2019/07/05
ELISA試劑盒的操作法,您做對(duì)了么?上海滬鼎生物科技有限公司常年供應(yīng)ELISA試劑盒,為確保試驗(yàn)的成功,使用ELISA試劑盒時(shí)一定要注意相關(guān)的事項(xiàng),今天,我們主要介紹人白介素ELISA試劑盒操作步驟。1.確定本次檢測(cè)所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。2.將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中,1孔只加樣品稀釋液的作為對(duì)照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。3.酶標(biāo)板加上蓋,37℃反應(yīng)90分鐘。4.反應(yīng)后用自動(dòng)洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體;或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體,再對(duì)著吸水紙拍幾下。洗滌2次。5
梅雨季節(jié),預(yù)防措施大派送2019/07/01
隨著梅雨季節(jié)的到來,都開始頭疼如何防潮、防霉、防各種化學(xué)揮發(fā)變質(zhì)?;瘜W(xué)試劑在儲(chǔ)存過程中由于本身的性質(zhì)受到外界條件因素的影響,會(huì)發(fā)生這樣或那樣的變化引起質(zhì)變。試劑變質(zhì)現(xiàn)象較多,現(xiàn)介紹常見的變質(zhì)現(xiàn)象及預(yù)防措施。(1)潮解。潮解是一些易溶于水的固體試劑,由于吸收空氣中的水分,逐漸變成液體的現(xiàn)象。發(fā)生潮解的速度取決于空氣的相對(duì)濕度,相對(duì)濕度愈大,潮解速度越快。相對(duì)濕度越小,溶解速度就越慢或不潮解。如氯化鈣、乙酸鉀、硝酸鈣等極易潮解,潮解后試劑的形態(tài)發(fā)生了改變,但原有的化學(xué)性質(zhì)通常不發(fā)生變化。在一定溫度的
論文發(fā)表&文章寫作之文獻(xiàn)閱讀技巧2019/06/28
通過閱讀文獻(xiàn)了解世界上本專業(yè)領(lǐng)域的內(nèi)容和發(fā)展情況;并產(chǎn)生自己的idea,進(jìn)入這個(gè)領(lǐng)域。這是我們?cè)趯懽鱏CI之前大量閱讀文獻(xiàn)的主要目的。那么,漫無(wú)目的地閱讀是沒有意義的,我們應(yīng)該做到:1.別先讀摘要,從導(dǎo)言部分入手。摘要是論文文首那簡(jiǎn)短精煉的*段話。事實(shí)上,很多非科研人員在試圖建立一種科學(xué)觀點(diǎn)時(shí),常常就只讀一篇論文的摘要部分。(這是一種很糟糕的做法。別這樣。)總是zui后才閱讀摘要,因?yàn)槟抢锇藢?duì)整篇論文的簡(jiǎn)要概括,容易在無(wú)意之間被作者對(duì)結(jié)果的解讀灌輸了先入之見。2.找出大問題。“大問題”不是指
白細(xì)胞產(chǎn)生的特殊酶類MMP12的工作機(jī)理2019/06/21
滬鼎報(bào)道:作為人類機(jī)體免疫系統(tǒng)的一部分,白細(xì)胞可以產(chǎn)生許多幫助抵御疾病的酶類,有時(shí)候這些酶類會(huì)在炎性疾病中損傷組織,比如慢性阻塞性肺病、癌癥和心臟病;近日,研究人員的研究鑒別出了一種名為MMP12的酶類,該酶類在抵御感染期間并不會(huì)一直位于細(xì)胞外部,其會(huì)進(jìn)入到細(xì)胞中來發(fā)揮作用,該研究對(duì)于開發(fā)治療炎性疾病的新型療法或會(huì)帶來較大幫助。研究者說道,曾經(jīng)研究人員認(rèn)為這些酶類會(huì)一直位于細(xì)胞外部發(fā)揮作用,如今這種名為MMP12的酶類則可以結(jié)合細(xì)胞進(jìn)入到細(xì)胞核中來作用,后期我們將深入揭開該酶類的神秘面紗;MMP
滬鼎解說:檢測(cè)?ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)大全2019/06/17
無(wú)論是對(duì)試驗(yàn)的硬件條件還是對(duì)試驗(yàn)的操作人員的技能要求,ELISA的試驗(yàn)操作所要求的條件是比較嚴(yán)格的,稍有不慎,前功盡棄。下面上海滬鼎生物就為咱們分享一些ELISA試劑盒各個(gè)操作步驟需要注意的事項(xiàng)。ELISA試驗(yàn)通用規(guī)則:1、試驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。2、要裝備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。3、要在試驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更安穩(wěn)。4、要確保移液槍的性,差錯(cuò)不能超過2%。可用水和電
“上海滬鼎”文獻(xiàn):可溶性B7-H3 在人腦創(chuàng)傷合并骨折2019/06/14
高舒妤,朱國(guó)宴,郭國(guó)寧*[摘要]目的檢測(cè)外周血中可溶性B7-H3在腦創(chuàng)傷合并骨折,單純骨折和單純腦損傷患者中的表達(dá),并研究其對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞的作用。方法ELISA檢測(cè)可溶性B7-H3及骨折愈合的標(biāo)志物Cbfa1在腦創(chuàng)傷合并骨折、單純骨折,單純腦創(chuàng)傷和正常志愿者外周血中的表達(dá),茜素紅、real-timePCR檢測(cè)不同濃度重組B7-H3蛋白對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨細(xì)胞分化的作用。結(jié)果可溶性B7-H3在腦創(chuàng)傷合并骨折及單純腦創(chuàng)傷患者中的表達(dá)明顯高于單純骨折和正常人中的表達(dá);可溶性B7-H3在外
“上海滬鼎”文獻(xiàn):加味當(dāng)歸芍藥散抑制組蛋白乙?;缸饔脵C(jī)制研究2019/06/06
“上海滬鼎”文獻(xiàn):加味當(dāng)歸芍藥散抑制組蛋白乙酰化酶作用機(jī)制研究李燕紅楊謙李錦亮莊錦填李振潔鐘金寶【摘要】目的探討加味當(dāng)歸芍藥散抑制組蛋白乙酰化酶p300(p300HAT)/血清環(huán)加氧酶-2(COX-2)通路調(diào)控核因子E2相關(guān)因子2(Nrf2)在黃褐斑形成中的作用機(jī)制。方法健康人表皮黑素細(xì)胞及30只雌性小鼠納入研究,采用不同濃度加味當(dāng)歸芍藥散處理健康人表皮黑素細(xì)胞,肌肉注射huang體酮及紫外線照射建立黃褐斑小鼠模型,將小鼠隨機(jī)分為空白組、低劑量組及高劑量組各10只,分別給予常規(guī)劑量0.9%氯化鈉
血清滅活你知道多少2019/06/05
血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題,價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子,維生素,氨基酸等珍貴物質(zhì),而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒有必要的。盡管如此,在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來執(zhí)行,多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子、氨基酸等成分帶來的負(fù)面影響,在我們的技術(shù)熱線中常被提到的就是“是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活”,下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。血清熱滅活操作步驟①選用與血清瓶同規(guī)格的對(duì)照瓶一個(gè)。②對(duì)照瓶?jī)?nèi)放入與血清等體積的水。③溫度預(yù)試。對(duì)照瓶?jī)?nèi)
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