資料簡介
以下是關于人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒的實驗使用說明:
BS-1713 人血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒 天津本生
一、實驗原理
采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA),通過HRP標記的檢測抗體與樣本中AT2R結合,經TMB顯色后測定吸光度(OD值),顏色深淺與AT2R濃度呈正相關?。
二、試劑盒組成
酶標包被板(48T/96T)
標準品(凍干粉,需用稀釋液重構)
檢測溶液A/B(HRP標記物)
濃縮洗滌液(需30倍稀釋)
顯色液A/B(TMB溶液)
終止液?。
三、樣本處理
血清/血漿?:3000rpm離心10-30分鐘,避免溶血?;
組織勻漿?:加入生理鹽水搗碎后離心取上清?;
保存?:分裝凍存于-20℃,避免反復凍融?。
四、操作步驟
標準品稀釋?:將凍干標準品用稀釋液重構,梯度稀釋為7個濃度(如5000pg/mL至78pg/mL)?;
加樣?:每孔加入50μL標準品或樣本,37℃孵育30分鐘?;
洗滌?:棄液后拍干,加洗滌液靜置30秒,重復5次?;
顯色?:加入顯色液A/B各50μL,避光反應15分鐘?;
終止?:加入50μL終止液,立即450nm測OD值?。
五、注意事項
避免試劑接觸金屬器械或強氧化劑?;
顯色時間需嚴格控制,超過30分鐘可能導致背景升高?;
渾濁樣本需離心澄清后檢測?;
不同批次試劑組分不可混用?。
六、結果計算
以標準品濃度為橫坐標,OD值為縱坐標繪制標準曲線,通過曲線方程計算樣本濃度?。
注:以上資料僅供參考,具體請產品說明請咨詢技術老師或品牌供應商。
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