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小鼠肺部活化調節趨化因子試劑盒

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供貨周期 一個月 應用領域 化工,生物產業,制藥/生物制藥
小鼠肺部活化調節趨化因子試劑盒:精準檢測的得力工具
小鼠肺部活化調節趨化因子試劑盒,在科研與醫學研究領域發揮著關鍵作用,為深入探究相關生理病理機制提供有力支持。該試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA),能夠精準測定標本中小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)的水平。
試劑盒的核心原理基于抗原抗體的特異性結合。首先,將純化的小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)抗體包被于微孔板,制成固相抗體。當往包被單抗的微孔中依次加入標本、標準品以及 HRP 標記的檢測抗體后,若標本中存在肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18),其會先與固相抗體結合,進而再與 HRP 標記的抗體結合,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。經過徹di洗滌去除未結合物質后,加入底物 TMB。在 HRP 酶的催化下,TMB 轉化成藍色,并在酸的作用下最終轉變為黃色。顏色的深淺與樣品中的肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)含量呈正相關,通過酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),再依據標準曲線即可精確計算出樣品中小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)的濃度。
在樣本處理方面,該試劑盒具有廣泛的適用性。血清樣本,需將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置 2 小時或 4℃過夜,隨后 1000×g 離心 20 分鐘,取上清備用,上清也可置于 - 20℃或 - 80℃保存,但要避免反復凍融;血漿樣本,以 EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標本,在采集后的 30 分鐘內于 2 - 8℃、1000×g 離心 15 分鐘,取上清用于檢測,同樣需注意避免反復凍融;組織勻漿樣本,先用預冷的 PBS (0.01M, pH = 7.4) 沖洗組織以去除殘留血液,稱重后剪碎,按 1:9 的重量體積比(如 1g 組織對應 9mL PBS,可根據實驗需求適當調整)加入含蛋白酶抑制劑的 PBS 于玻璃勻漿器中,在冰上充分研磨,還可通過超聲破碎或反復凍融進一步裂解細胞,最后 5000×g 離心 5 - 10 分鐘,取上清檢測;細胞培養物上清或其它生物標本,則直接 1000×g 離心 20 分鐘,取上清即可檢測,也可低溫保存并避免反復凍融。
操作該試劑盒時,從室溫平衡 20min 后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條密封放回 4℃。除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體 100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育 60min。之后棄去液體,在吸水紙上拍干,每孔加滿 350μL 洗滌液,靜置 1min 后甩去洗滌液并拍干,如此重復洗板 5 次(也可用洗板機洗板)。接著每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min,再加入 50μL 終止液,15min 內于 450nm 波長處測定各孔的 OD 值。
小鼠肺部活化調節趨化因子(PARC/CCL18)在免疫反應中扮演重要角色,能吸引淋巴細胞參與 B 細胞遷移到 B 細胞濾泡淋巴結,對初始 T 淋巴細胞、CD4 + 和 CD8 + T 細胞也具有趨化活性。該試劑盒憑借其高靈敏度、特異性強、操作相對簡便、檢測快速以及結果穩定等優勢,可用于定量檢測體液中抗原成分,在生化領域應用廣泛,助力科研人員深入開展相關研究,推動相關領域的知識拓展與技術進步。


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