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FO細胞

來源:生物試劑銷售中心   2016年04月29日 17:24  

文章標題:FO細胞

關鍵詞:FO細胞培養,FO細胞價格,來源背景,染色鑒定,特征特性

中文名稱:小鼠骨髓瘤細胞

生長狀態:貼壁生長

來源:美國ATCC

在正常細胞中,磷脂酰絲氨酸只分布在細胞膜脂質雙層的內側,細胞發生凋亡早期,膜磷脂酰絲氨酸(PS)由脂膜內側翻向外側。Annexin V是一種磷脂結合蛋白,與磷脂酰絲氨酸有高度親和力,故可通過細胞外側暴露的磷脂酰絲氨酸與凋亡早期細胞的胞膜結合。因此Annexin V被作為檢測細胞早期凋亡的靈敏指標之一。在細胞發生凋亡時,膜磷脂酰絲氨酸外翻的發生早于細胞核的變化,而此時Propidium Iodide(PI)不能通過細胞膜。

細胞壞死時,雖然也會發生磷脂酰絲氨酸外翻,但此時細胞膜的通透性明顯增加,PI等核酸染料進入細胞與細胞核中的核酸結合,發出紅色熒光。所以Annexin V-FITC(綠色熒光)常與鑒定細胞死活的核酸染料(如PI)合并使用,來區分凋亡細胞與死亡細胞。

技術原理及步驟

1. 離心收集細胞,微量離心機轉速1000 rpm,離心時間5 min,棄培養基。

2. 用冷PBS洗滌細胞兩次。

3. 用400 μL1× Binding Buffer懸浮細胞,濃度大約為1×106 cells/mL。

4. 在細胞懸浮液中加入5 μlLAnnexin V-FITC,輕輕混勻后于2~8°C避光條件下孵育15min。

5. 加入10 μL PI后輕輕混勻于2~8°C避光條件下孵育5 min。

6. 在1小時內用流式細胞儀或熒光顯微鏡檢測。

應用實例

應用領域

細胞的早期凋亡及區分凋亡與壞死細胞

服務周期

我公司在正式接受實驗委托2個星期左右完成實驗并提供實驗報告。

客戶須知(對材料的要求、注意事項)

需提供細胞類型,處理條件。

選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下,96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大,因此,在進行MTT試驗前,要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線,確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間,以保證培養終止致細胞過滿。這樣,才能保證MTT結晶形成酌量與細胞數呈的線性關系。否則細胞數太多敏感性降低,太少觀察不到差異。

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