標(biāo)題名稱：HFF細(xì)胞 HFF細(xì)胞株  細(xì)胞株培養(yǎng)

我公司認(rèn)為購買細(xì)胞的客戶有培養(yǎng)細(xì)胞的經(jīng)驗(yàn)，客戶收到細(xì)胞后，因運(yùn)輸途中細(xì)胞會(huì)有分泌物，所以原瓶中的培養(yǎng)液不能循環(huán)利用，將其全部倒掉，使用自己實(shí)驗(yàn)室的培養(yǎng)基（試劑銷售推薦使用的培養(yǎng)基）

細(xì)胞英文名稱  HFF細(xì)胞   細(xì)胞中文名稱 人包皮成纖維細(xì)胞株

形態(tài)特性   成纖維細(xì)胞樣  生長(zhǎng)特性   貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)體系   DMEM培養(yǎng)基+10% FBS

傳代方法   1:2 傳代情況   2~3天換液

凍存條件   90%FBS+10%DMSO    支原體檢測(cè) 陰性

使用權(quán)限   A類    實(shí)物狀態(tài)   可用

備注   消化液：0.25%trypsin+0.53mM EDTA

保藏單位   上海試劑銷售科技有限公司

張昕

PS: 若客戶收到2ml小管細(xì)胞

收到細(xì)胞以后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作；然后將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶，加入5ml左右含F(xiàn)BS的培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱隔夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞匯合度：若未超過80%匯合度，換液繼續(xù)培養(yǎng)，根據(jù)情況傳代或者凍存。若超過80%匯合度，可直接進(jìn)行傳代。

客戶收到細(xì)胞后請(qǐng)務(wù)必仔細(xì)閱讀細(xì)胞注意事項(xiàng)，確保細(xì)胞的培養(yǎng)條件一致，如果由于培養(yǎng)條件不一致導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任有客戶自行承擔(dān)。

1.  客戶在收到細(xì)胞時(shí)，請(qǐng)首先觀察培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否外滲，培養(yǎng)液是否混濁。如發(fā)現(xiàn)有瓶破、滲漏、培養(yǎng)液混濁等問題，請(qǐng)?jiān)谑盏郊?xì)胞后立即與我們。

2.  由于運(yùn)輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)離心收集，重懸細(xì)胞，置培養(yǎng)箱培養(yǎng)，細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如果細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力。

3.  收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況，請(qǐng)按照細(xì)胞處理方法處理細(xì)胞。

貼壁細(xì)胞處理方法

一、細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿*培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。從細(xì)胞資源中心獲得細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作。

二、鏡下觀察：

未超過80%匯合度時(shí)，將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml*培養(yǎng)液，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時(shí)，按要求比例消化傳代。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

三、消化方法

1、將瓶裝的*培養(yǎng)液移入無菌瓶中，留待日后培養(yǎng)用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。（收到細(xì)胞，建議棄去原基培養(yǎng)，使用新鮮*培養(yǎng)基培養(yǎng)）

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細(xì)胞*脫離瓶壁分離成單個(gè)后，加培養(yǎng)基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細(xì)胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養(yǎng)基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)。

HFF細(xì)胞 HFF細(xì)胞株  細(xì)胞株培養(yǎng)

生物試劑銷售中心細(xì)胞庫熱賣細(xì)胞株

YAC-1 淋巴瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

Nb2－11 淋巴瘤 體外培養(yǎng)株

C26 結(jié)腸癌 瘤株

G422 神經(jīng)膠質(zhì)瘤 瘤株

B16 黑色素瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

B16 黑色素瘤 瘤株

C3 白血病 體外培養(yǎng)株

L1210 淋巴白血病 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

L1210 淋巴白血病 瘤株

SP2/0 骨髓瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

NS-1 骨髓瘤 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

P388D 淋巴母細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

Kert-3 腎癌 瘤株

TC-1 HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

W256 肉瘤(Wistar) 瘤株

PC-12 嗜鉻細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清+5%馬血清 體外培養(yǎng)株

HIH 3T3 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

L929 小鼠成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

HSC-T6 大鼠肝星狀細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

L-02 人肝細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

Lewis 肺癌 瘤株

LA795 肺腺癌 瘤株

EAC 艾氏腹水瘤 瘤株

S180 腹水瘤 瘤株

H22 肝癌 瘤株

H22 肝癌 1640+10%胎牛血清 體外培養(yǎng)株

MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

MPC-83 胰腺腺泡細(xì)胞癌 瘤株

RIN-m5F β胰島素瘤 1640+10%胎牛血清體外培養(yǎng)株

MA891 乳腺癌 瘤株

TA2 自發(fā)高乳腺癌 瘤株

U14 宮頸癌 瘤株

SRA01/04 人晶體上皮細(xì)胞 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

CHO 中國倉鼠卵巢細(xì)胞（野生型） 1640+10%胎牛血清

IEC-6 大鼠小腸隱窩上皮細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

P815 小鼠肥大細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

NRK-49F 大鼠正常腎成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

自建 正常成人皮膚成纖維細(xì)胞 DMEM+20%胎牛血清 原代培養(yǎng)

HELF 人胚肺成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清 5，6代

293 人胚腎細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

293T 人胚腎T細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

GES-1 人胃粘膜細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

3T3-L1 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞（前脂肪） DMEM+10%胎牛血清

Vero 猴腎細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

CHO-dhFr- 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(二氫葉酸缺陷型） 1640+10%胎牛血清

V79 中國倉鼠肺細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

PA317 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

Cos-7 綠猴腎細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

MA104 非洲綠猴胚胎腎上皮細(xì)胞 DMEM+10%胎牛血清

16HBE 人支氣管上皮細(xì)胞 1640+10%胎牛血清

CNE-1 高分化鼻咽鱗癌 1640+10%胎牛血清

CNE-2 低分化鼻咽鱗癌 1640+10%胎牛血清

KB 口腔表皮樣癌 1640+10%胎牛血清

Hep-2 喉癌 1640+10%胎牛血清

Ec109 食管癌 1640+10%胎牛血清

KYSE 450 食管癌 1640+10%胎牛血清

KYSE 150 食管鱗癌 1640+10%胎牛血清

EC97076 食管癌 1640+10%胎牛血清

BGC-823 胃腺癌 1640+10%胎牛血清

MGC-803 胃腺癌 1640+10%胎牛血清

SGC7901 胃低分化腺癌 1640+10%胎牛血清(P53基因第六外顯子204位密碼發(fā)生缺失突變)

MKN-45 低分化胃癌 1640+10%胎牛血清

HuTu-80 十二指腸腺癌 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

Caco-2 結(jié)腸癌 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

COLO 205 結(jié)腸癌 1640+10%胎牛血清

COLO320DM 結(jié)腸癌 1640+10%胎牛血清

HCT-8 回盲腸腺癌 1640+10%胎牛血清

HCT-116 低分化結(jié)腸腺癌 1640+10%胎牛血清

HT-29 結(jié)腸腺癌 1640+10%胎牛血清

LS-174T 結(jié)腸腺癌 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

SW480 結(jié)腸癌 L15

BEL-7402 肝細(xì)胞癌 1640+10%胎牛血清

BEL-7405 肝細(xì)胞癌 1640+10%胎牛血清

H7402 肝癌 1640+10%胎牛血清

HCC-9204 肝癌 1640+10%胎牛血清

Hep3B 肝癌 DMEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

Hep G2 肝癌 DMEM+10%胎牛血清

SMMC-7721 肝癌 1640+10%胎牛血清

PANC-1 胰腺導(dǎo)管上皮癌 1640+10%胎牛血清

Panc 10.05 胰腺腺癌 高糖1640+15%胎牛血清+胰島素等

SW1990 胰腺腺癌 1640+10%胎牛血清

JF305 胰腺癌 1640+10%胎牛血清

PC-3 胰腺癌 1640+10%胎牛血清

Capan-2 胰腺癌 1640+10%胎牛血清

SK-RC-42 腎癌 1640+10%胎牛血清

95-C 低轉(zhuǎn)移肺癌 1640+10%胎牛血清

95-D 高轉(zhuǎn)移肺癌 1640+10%胎牛血清

973 肺腺癌 1640+10%胎牛血清

A2 肺腺癌 1640+10%胎牛血清

A549 肺腺癌 1640+10%胎牛血清

A549/DDP 肺腺癌/順鉑耐藥株 1640+10%胎牛血清

Calu-3 肺腺癌 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

GLC-82 肺腺癌 1640+10%胎牛血清 已有

H1299 非小細(xì)胞肺腺癌 1640+10%胎牛血清

NCI-H157 非小細(xì)胞肺腺癌 1640+10%胎牛血清

NCI-H460 大細(xì)胞肺癌 1640+10%胎牛血清

LTEP-P 小細(xì)胞肺癌 1640+10%胎牛血清

NCI-H209 小細(xì)胞肺癌 1640+10%胎牛血清

NCI-H345 小細(xì)胞肺癌 1640+10%胎牛血清

NCI-H446 小細(xì)胞肺癌 1640+10%胎牛血清

SPC-A-1 肺腺癌 1640+10%胎牛血清

Bcap-37 乳腺髓樣癌 1640+10%胎牛血清

BT474 乳腺導(dǎo)管癌 DMEM+10%胎牛血清 無

MDA-MB-157 乳腺癌 1640+10%胎牛血清

MDA-MB-231 乳腺導(dǎo)管癌 L15+10%胎牛血清

MDA-MB-453 乳腺癌 1640+10%胎牛血清

RajiBurkitt 淋巴瘤 1640+10%胎牛血清

RAMOSB 淋巴細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清

THP 1 單核細(xì)胞型淋巴瘤 1640+10%胎牛血清

RPMI-8226 多發(fā)骨髓瘤 1640+10%胎牛血清

U266 骨髓瘤 1640+10%胎牛血清

BIU87 膀胱癌 1640+10%胎牛血清

SHG-44 腦惡性膠質(zhì)瘤 1640+10%胎牛血清

U251 神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清

M17 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 DMEM+10%胎牛血清

LAN-5 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清

LAN-6 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清

SK-N-SH 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 DMEM+10%胎牛血清

SH-SY5Y 神經(jīng)母細(xì)胞瘤 DMEM+10%胎牛血清

SF126 腦瘤 1640+10%胎牛血清

SF17 腦瘤 1640+10%胎牛血清

SF763 腦瘤 瘤株

SF767 腦瘤 瘤株

MLA-144 長(zhǎng)臂猿淋巴瘤 1640+10%胎牛血清

T47D 乳腺導(dǎo)管癌 1640+15%胎牛血清

ZR-75-1 乳腺導(dǎo)管癌 1640+10%胎牛血清

A875 黑色素瘤 1640+10%胎牛血清

SK-HEL-1 皮膚黑色素瘤

A431 皮膚基底細(xì)胞癌

Jurkat 急性T淋巴細(xì)胞白血病 1640+10%胎牛血清

U937 單核細(xì)胞白血病 1640+10%胎牛血清

MJ 淋巴瘤 1640+10%胎牛血清

CEM 白血病 1640+10%胎牛血清

K562 慢性髓原白血病 1640+10%胎牛血清

HPB-ALL T細(xì)胞白血病 1640+10%胎牛血清

HL-60 白血病 1640+10%胎牛血清

Daudi B淋巴細(xì)胞瘤 1640+10%胎牛血清

SK-BR-3 乳腺腺癌 1640+15%胎牛血清

MCF-7 乳腺腺癌 1640+10%胎牛血清

MCF-7/Adr 乳腺腺癌/阿霉素耐藥株 1640+10%胎牛血清

A2780 卵巢癌 1640+10%胎牛血清

CoC1 卵巢癌 1640+10%胎牛血清

CoC2 卵巢癌 1640+10%胎牛血清

OVCAR-3 卵巢癌 DMEM+10%胎牛血清

SK-OV-3 卵巢腺癌 1640+10%胎牛血清

SK-OV-3/DDP 卵巢腺癌順鉑耐藥株 1640+10%胎牛血清

HeLa 宮頸癌 1640+10%胎牛血清

HeLaS3 宮頸癌 1640+10%胎牛血清

HEC-1B 子宮內(nèi)膜癌

JEG-3 絨癌 1640+10%胎牛血清

Du145 前列腺癌 高糖DMEM+10%胎牛血清

LNCaP 前列腺癌

LNCaP clone 前列腺癌

PC-3 前列腺癌 DMEM+10%胎牛血清

Tsu-pr1 非雄激素依賴型前列腺癌 1640+10%胎牛血清

HOS 骨肉瘤 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

MG-63 成骨肉瘤 MEM+非必需氨基酸+10%胎牛血清

Saos-2 骨肉瘤 1640+10%胎牛血清

U-2OS 骨肉瘤 1640+10%胎牛血清

OS-732 骨肉瘤 1640+10%胎牛血清 瘤株

A-204 橫紋肌肉瘤

HT1080 纖維肉瘤 1640+10%胎牛血清

A375 皮膚黑色素瘤 DMEM+10%胎牛血清