1 目的：DNA抽提標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)范適用于HLA試驗(yàn)中的DNA抽提操作。

2 適用范圍：DNA抽提實(shí)驗(yàn)室

3 依據(jù)： DNA抽提標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)范

4 引用文件：德國(guó)BAG公司（以下簡(jiǎn)稱BAG） 《Instructions for use EXTRA-GENE I》

5 程序
5.1試劑準(zhǔn)備
5.1.1 BAG® EXTRA-genE I 
該試劑盒包括3部分：Solution 1 、Solution 2、Solution 3
使用前，若Solution 2有沉淀請(qǐng)將其在37℃孵育，直至沉淀*溶解
5.1.2 乙醇溶液，濃度（V/V）為96%或100％
5.1.3 乙醇溶液，濃度（V/V）為70%
5.1.4 滅菌蒸餾水，按照滅菌蒸餾水配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范
5.2儀器及用具準(zhǔn)備
5.2.1 移液器，規(guī)格：20µl – 200µl、200µl – 1000µl
5.2.2 移液器配套吸頭，規(guī)格：200µl和1000µl，滅菌、無(wú)DNA/RNA殘留
5.2.3 Eppendorf離心管，規(guī)格：1.5mL 或2.0 mL ，滅菌
5.2.4 混勻器
5.2.5 離心機(jī)（至少13，000 rpm，）
5.2.6 水浴箱
5.2.7 DNA濃度測(cè)定儀（DNA單位為ng/µl，可提供A260/280）
5.2.8 試管架（每排24孔）
5.2.9 手套規(guī)格：乳膠手套，與操作者手形相適應(yīng)，經(jīng)滅菌

5.3操作步驟：
5.3.1 換工作服、戴手套
5.3.1.1 從工作服衣柜中換取工作服，戴上適應(yīng)自己手形的乳膠手套。
5.3.2 血樣檢查
5.3.2.1 血樣應(yīng)在-20℃保存，保存時(shí)間不應(yīng)超過(guò)1年，無(wú)溶血、血樣保存容器無(wú)破裂、無(wú)滲漏、容器蓋子無(wú)松動(dòng)等現(xiàn)象。
5.3.2.2 核對(duì)血樣記錄與捐獻(xiàn)者記錄，確定血樣是否有效，只有有效捐獻(xiàn)者記錄的血樣才能用于試驗(yàn)。
5.3.2.3 血樣量至少1 mL。
5.3.2.4 選取滿足以上要求的24個(gè)血樣作為一組抽提標(biāo)本。
5.3.2.5 若血樣本是凍存的，請(qǐng)將血樣在室溫下孵育至其*解凍。

5.3.3 DNA抽提
5.3.3.1 將選取的24個(gè)血樣按照編號(hào)的順序依次放置在試管架上，每排12個(gè)，共2排。在記錄本上按順序記錄樣品號(hào)、抽提日期、抽提者等。
5.3.3.2 取24個(gè)1.5mLEppendorf離心管，依次放置在試管架上，每排12個(gè)，共2排，與血樣一一對(duì)應(yīng)，并在離心管上用油性記號(hào)筆標(biāo)上對(duì)應(yīng)血樣的號(hào)碼。