雙抗體夾心法是用特異性抗體包被于固相載體,經洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結合,經保溫孵育洗滌后,即可加入酶標記特異性抗體,再經孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。
這種方法欲測的抗原必須有兩個可以與抗體結合的部位,因為其一端要包被于固相載體上的抗體作用,而另一端則要與酶標記特異性抗體作用。因此,不能用于分子量小于5000的半抗原之類的抗原測定。我們用在霍亂腸毒素的測定。HbSAg及HbS的測定。
在昨天上午上班沒多久錢在“在線”上看到了這樣一個問題:雙抗體夾心法實驗報告為什么要設計空白組和陰性對照組?錢馬上為這位客戶解決了這個問題:
設計空白組和陰性對照組是為了保證通過雙抗夾心法檢測到的信號確實是來自于目標目標蛋白。
空白組,只加緩沖液,看板子或者是液體有沒有引入背景,如果有一些,可以用樣品信號值減去空白組的值,算出具體的信號值。
陰性對照,則是不加樣品,其他都和樣品組一樣,這樣的話,如果有信號,肯定是非特異反應引起的。
有了這些對照就可以看出來樣品的檢測是否正確了。
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