在elisa實驗中新手朋友由于各種的原因重復性會差,上海滬鼎的錢為您詳細整理了重復性差的9大因素:
1、樣品數量不一,加樣時間長短不一 | 重復某一樣品時,加樣時間盡可能與*次接近 |
2、樣品加入后未混勻 | 加樣后在混勻器上充分混勻 |
3、酶標儀濾光片不對或輸入波長不對 | TMB顯色用450/630波長 |
4、酶標儀測定重復性差 | 校對酶標儀 |
5、洗滌不正確 | 洗滌液注滿各孔但不要溢出。洗板時反應板面向下,垂直用力甩凈內容物(可多甩幾次),在干凈、無或少塵的吸水材料上拍干。洗板機洗板時不應有堵孔,洗滌應充分 |
6、溫育條件不一致(一次用水育,一次用恒溫箱) | 恒溫箱溫育較水浴顯色深, OD值高出0.1-0.15,均采用恒溫箱.如用水浴水溫應控制在37℃ |
7、不慎多加或少加酶或顯色劑 | 多加時顯色深,少加則淺,用記號筆圈上,便于分析 |
8、閾值附近時陰時陽 | 同一樣品做三個復孔,以二個(含二個以上相同結果為準) |
9、加樣量不足、保溫時間、洗滌條件一致 | 盡可能使用同一移液器和裝緊吸嘴重復測定標本。條件、人員等應盡量與上次保持一致 |
希望經過以上的分析能使您避開這些問題,能成功的做出的實驗!
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