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多克隆抗體制備|實驗技術服務

來源:上海拜力生物科技有限公司   2015年08月01日 13:42  

關鍵詞:多克隆抗體制備|實驗技術服務
簡介:世界*品牌多克隆抗體制備|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
多克隆抗體制備|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程:
多克隆抗體的制備步驟
  1) 家兔仰臥于兔架上固定頭部,用紗布固定四肢。頭部略放低以暴露頸部。剃毛并消毒皮膚。
   2) 沿頸部中線用手術刀切開皮膚約10cm,分離皮下結締組織,直至暴露出氣管兩側的胸鎖乳突肌(小心操作,如碰到小血管出血,可用止血鉗止血)。
   3) 用直頭止血鉗分離胸鎖乳突肌與氣管間的頸三角區疏松組織,暴露出頸總動脈后用彎頭眼科鑷使之游離,剝離神經和結締組織。
   4) 于動脈下套入兩根黑絲線,分別置于遠心及近心端。結扎遠心端的絲線。近心端的動脈用血管夾夾住。
   5) 用小拇指墊在血管下,用尖頭眼科手術剪在兩根絲線間的動脈璧上剪一小口(勿剪斷),插入塑料放血管。再將近心端的絲線結扎固定于放血管上,以防放血管滑脫。
   6) 松開止血鉗,使血液流入容器中。一般一只家兔可放血100-120ml。
3. 血清的分離
如果用三角瓶或平皿盛血,將器皿傾斜放置于37oC烘箱2hr,轉移到4oC沉淀,第二天早上用吸管吸取血清。如果用離心管收集,37oC烘箱放置2hr,轉移到4oC沉淀,第二天早上離心,10000RCF,10分鐘。在血清中加入NaN3至終濃度0.02%,分裝后-20oC保存
抗血清收獲后,加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐,或加入等量的中性甘油,分裝小瓶,置-20℃以下的低溫保存,數月至數年內抗體效價無明顯變化。注意避免反復凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。
多克隆抗體的制備一般包括以下幾個步驟:
1、制備抗原。
2、選擇實驗動物。
3、動物免疫。
4、試取血進行測試,看看是否成功免疫。
5、如果成功免疫,殺死實驗動物,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
(一)抗原制備
Ig 是免疫球蛋白,對異種動物而言,是良好的抗原物質??梢源碳ぎ惙N動物產生抗 Ig 血清,
經適當提取后,產生抗 Ig 抗體,又叫第二抗體或抗抗體。在多數的間接標記反應中,均需制備
抗 Ig 抗體。
(二)材料與試劑
1.提取的動物 Ig
2.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
3.青霉素和鏈霉素
4.實驗動物 兔
5.其它材料及試劑

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