關鍵詞:Western Blotting服務|實驗技術服務
簡介：世界*品牌Western Blotting服務|實驗技術服務原裝，質量保證,*。
Western Blotting服務|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧，承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時，我們也會提供相應的原始數據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面，我們所有的實驗數據真實可信，我們提供原始的表達菌株和克隆質粒，客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌：   http://www.。。ｃｏｍ/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程：
免疫蛋白質印跡(Western blotting)是根據抗原抗體的特異性結合檢測復雜樣品中的某種蛋白的方法。寶賽生物為您提供全套的常規免疫印記技術服務，同時本公司采用**的LICOR Odyssey雙色紅外激光成像系統和雙色熒光染料標記的二抗推出高靈敏度的紅外激光免疫印跡服務。與常規化學發光方法比較，靈敏度可達到皮克級（pg），還具有雙色成像、定量、成像清晰的優點。同時具備功能強大的軟件系統，可快速判定樣品分子量大小并進行定量分析。
1.樣品收集
1）培養的細胞
貼壁和懸浮細胞收集方式不同，細胞裂解液種類各異，推薦含SDS的凝膠加樣緩沖液裂解，煮沸即可。
2）動物組織
與細胞不同，組織塊由于體積較大，須預先經破碎勻漿處理。
2．樣品定量
樣品電泳前需測定蛋白濃度，以便保證上樣量一致，有利于后續定量或半定量分析。常用的蛋白質濃度測定方法有好多種，其靈敏度和所需時間不同，且不同的方法會受不同干擾物質的影響，實驗者可根據樣品制備方法（裂解液成分、去垢劑和還原劑種類等）自行選擇。
注意事項：
a. 應盡量避免引入影響后續定量的雜蛋白（如細胞培養液、蛋白酶抑制劑等）及其他干擾物質；
b. 樣品濃度應適中，1×SDS凝膠加樣緩沖液建議用量：貼壁細胞按10cm2培養皿/0.1ml，懸浮細胞按5×106細胞/0.1ml比例加入；
c. SDS對蛋白質變性和電泳分離至關重要，濃度應控制在2-10%之間，并根據具體需要調整；
d. 制備好的樣品可以在-20℃保存，但時間不宜過長，并避免反復凍融，否則蛋白會發生降解；
e. 內參對實驗結果至關重要，應選擇合適的內參。
Western印跡含一系列步驟，包括：
?? 用聚丙烯酰胺凝膠分離蛋白樣品。
?? 將膠上的蛋白轉移到膜上。
?? 鑒定膜上特定蛋白。
主要實驗步驟如下：
1. 蛋白質抽提
2. 蛋白質定量
3. 變性聚丙烯酰胺不連續凝膠電泳(SDS-PAGE)
4. 蛋白質轉移到硝酸纖維膜；
5. 膜的封閉和一抗抗體孵育；
6. Rockland熒光標記二抗孵育
7. LICOR Odyssey雙色紅外激光成像系統掃描
8. Odyssey軟件數據分析
9. 提供實驗報告，包括詳細的實驗方法及免疫印跡實驗結果的相關圖表