復(fù)蘇細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后當(dāng)天換液,全部更換成客戶自己的新鮮培養(yǎng)基,放進(jìn)培養(yǎng)箱,第二天再消化。
2. 邊觀察邊消化,根據(jù)細(xì)胞的形態(tài),終止消化時(shí)間,采取以半分鐘間隔吹打細(xì)胞邊緣,
如可吹打下來(lái),即終止消化。客戶摸索*消化時(shí)間。
3. 隨細(xì)胞有一份細(xì)胞操作說(shuō)明書,請(qǐng)客戶仔細(xì)查看。
4. 記得加1%雙抗,降低被污染的概率。另外盡早凍存留種,以備后用。
5. 售后時(shí)間為一周,于細(xì)胞本身的質(zhì)量問(wèn)題,而因乙方自己不當(dāng)操作(不規(guī)范操作,消化過(guò)度,不加雙抗導(dǎo)致的污染等)導(dǎo)致的細(xì)胞問(wèn)題不在售后范疇。
6. 收到細(xì)胞后,如細(xì)胞狀態(tài)不佳,或培養(yǎng)中遇到問(wèn)題,煩請(qǐng)當(dāng)天盡快,以便處理。當(dāng)天及時(shí)反饋細(xì)胞情況和細(xì)胞照片是售后跟蹤處理重要的參考依據(jù),請(qǐng)您務(wù)必重視。
7. 剛收到細(xì)胞時(shí),胎牛血清可以用15%培養(yǎng)兩三天,利于細(xì)胞盡快恢復(fù)狀態(tài),細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后,再調(diào)回10%即可。
目前國(guó)內(nèi)大多數(shù)細(xì)胞是會(huì)用常溫運(yùn)輸一般3天左右問(wèn)題不大,當(dāng)然細(xì)胞收到后可以馬上檢查細(xì)胞狀態(tài),有什么問(wèn)題及時(shí)細(xì)胞專家 王老師 ,如果細(xì)胞收到時(shí)密度70%-80%左右可以,收到后換液第二天消化;如果密度已經(jīng)90%以上 可以收到后馬上換液,然后放置培養(yǎng)箱靜置一段時(shí)間,四五個(gè)小時(shí)候再去消化細(xì)胞,但是細(xì)胞消化時(shí)候一定注意邊觀察邊消化,避免消化過(guò)度 ,胰酶首先在水浴鍋直接復(fù)溫到37度后加入細(xì)胞,然后每隔30秒 即吹打下細(xì)胞邊緣 如果能夠吹打散細(xì)胞 即可終止消化 吸走胰酶 用培養(yǎng)基把細(xì)胞打散后均勻接種,如果30秒吹打不下 再等30秒重復(fù)操作。分瓶不要分的太稀 分瓶后滿足細(xì)胞的貼壁率不低30% ,細(xì)胞的生長(zhǎng)有密度依賴性 原始分瓶細(xì)胞密度很低的話 會(huì)造成細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢或者不長(zhǎng), 建議同等大小容器1;2或者1;3傳代 傳代周期三天左右。
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