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SILAC實驗|實驗技術服務

來源:上海拜力生物科技有限公司   2015年06月02日 12:54  

關鍵詞:SILAC實驗|實驗技術服務
簡介:世界*品牌SILAC實驗|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
SILAC實驗|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。在獲得重組蛋白產品的同時,我們也會提供相應的原始數據和原始圖片,不需要再額外花費精力重復實驗。另一方面,我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌:   http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html    
測序實驗流程:
SILAC即細胞培養條件下穩定同位素標記技術(Stable isotope labeling with amino acids in cell culture,SILAC),其基本原理是分別采用含有輕、中或重型同位素必需氨基酸的培養基培養細胞(用于SILAC的穩定同位素氨基酸主要有Lys和Arg),新合成的蛋白質即嵌合了同位素氨基酸,如此培養5-6代后,細胞的所有蛋白質均被同位素標記上。經處理因素刺激后,等量混合各類型蛋白質,然后經SDS-PAGE分離和質譜分析,通過比較一級質譜圖中同位素峰型的面積大小進行相對定量,同時二級譜圖對肽段進行序列測定從而鑒定蛋白質。
    由于SILAC標記技術是體內標記技術,幾乎不影響細胞的功能,同時靈敏度高,因此其在蛋白質組學相關領域中得到了廣泛的應用,如比較蛋白質組學,蛋白質與蛋白質相互作用,蛋白質與DNA相互作用,蛋白質與RNA相互作用等領域。
與體外標記技術相比,SILAC屬于體內標記,具有以下技術優勢
 1、高通量,可同時鑒定并定量數百至數千種蛋白質;    
 2、定量,降低由于樣品制備不同而造成的實驗差異;    
 3、線性定量范圍廣;    
 4、靈敏度更高,蛋白質需要量明顯減少;
 5、標記采用的是體內標記技術,更接近樣品真實狀態。
SILAC技術服務內容
 1、細胞同位素標記;
 3、SDS-PAGE分離;
 4、胰酶酶切后液相分離和質譜分析;
  5、數據庫檢索及蛋白質定量分析;
 6、差異蛋白的生物信息學分析
 7、實驗報告提交。
實驗服務報告內容
 1、蛋白定鑒定和SILAC定量分析結果;  
  2 、顧客蛋白質對應的質譜峰圖;  
  3、SILAC實驗完整的實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數等。

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