關鍵詞:胃上皮細胞培養|實驗技術服務
簡介:世界*品牌胃上皮細胞培養|實驗技術服務原裝,質量保證,*。
胃上皮細胞培養|實驗技術服務——pCzn1質粒+Arctic Express宿主菌低溫表達體系。
我們具備豐富的蛋白表達設計經驗及實驗操作技巧,承諾客戶不成功不收費。我們所有的實驗數據真實可信,我們提供原始的表達菌株和克隆質粒,客戶可以依據我們的實驗報告重復我們的實驗結果。
產品品牌: http://www.。。com/goodsid/fenleiyi/2868603/1.html
測序實驗流程:
一、背景介紹:
實驗材料:
1. 動物胎體胃黏膜,胃潰瘍或胃癌手術切除的正常胃黏膜組織
2. 1%Ⅳ膠原蛋白或1%明膠鋪培養瓶,4℃冰箱內,使用前在37℃培養箱內放置2h,然后用培養液浸洗1次。
3. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素,pH7.4
4. 250000U/LⅠ型膠原酶或125000U/LⅠ型膠原酶和0.5%透明質酸酶,DMEM配置
5. 解剖剪、解剖鑷、眼科剪,眼科鑷
6. 離心管(15ml、50ml)
實驗方法:
1. 取妊娠19-21d胚胎大鼠,切開腹壁,取胃底部黏膜組織,放入預冷的PBS中,然后沖洗3次。
2. 在解剖顯微鏡下,用眼科鑷仔細剝除黏膜固有層。將黏膜上皮組織剪成1mm 3 左右的小塊。
3. 將組織塊放入消化液中,在37℃條件下消化1-3h。然后,加入含血清培養液,終止消化。
4. 用200目不銹鋼篩網濾出組織塊,收集濾液,離心(1500r/min,5min)。用PBS洗滌2次。
5. 離心后,吸去上清液,加入培養液,混懸沉淀細胞。將細胞懸液加入培養皿或培養瓶中,放入37℃,含5%CO2 的孵箱中培養24h。
6. 吸去培養液,用PBS浸洗。然后,加入培養液,繼續培養。以后每隔2-3d換液1次。
保存和應用:客戶可以根據自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮原代細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養箱內靜置后2-3h,再進行后續的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研 ,不得用于臨床應用。
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